Изучение безвредности растворов, получаемых путем растворения разработанных составов гранул и таблеток
С целью выявления потенциальной опасности вредного воздействия разработанных препаратов на макроорганизм было проведено изучение in vivo биологической безвредности составов, путем определения острой (при однократном пероральном введении и накожном нанесении) и хронической токсичности (при 30 дневном накожном нанесении). Изучали биологическую безвредность растворов, получаемых путем растворения отобранных образцов быстрорастворимых гранул и таблеток, содержащих в качестве действующего вещества ПГМГф, следующего состава (таблица 6):
Таблица 6
Состав испытуемых на безвредность гранул и таблеток, содержащих ПГМГф
Ингредиент | 2-1 | 29-2 | Нормативная документация | ||
На 5,0 г гранулята | На 100,0 г | На таблетку массой 1,5 г | На 100,0 г | ||
1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 |
ПГМГф (лиофилизированный) | - | - | 0,48 | 31,80 | ТУ |
ПГМГф | 1,27 | 25,40 | - | - | –//– |
Винная кислота | - | - | 0,55 | 36,40 | ГОСТ 5817-77 |
Лимонная кислота | 2,08 | 41,73 | - | - | ФС |
1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 |
Карбонат натрия | 1,55 | 30,84 | 0,40 | 27,00 | ГОСТ 83-79 |
Коллидон | 0,10 | 2,03 | 0,04 | 2,80 | сер-кат BASF |
Бензоат натрия | - | - | 0,03 | 2,00 | ФС |
Изучение острой токсичности растворов гранул и таблеток, содержащих ПГМГф
Исследование проводили на базе отдела фармакологии и токсикологии Всероссийского научно-исследовательского института патологии, фармакологии и терапии Российской академии сельскохозяйственных наук (ВНИВИПФиТ РАСХН); в опытах были использованы половозрелые конвенциональные нелинейные разнополые белые мыши с массой г (252 головы) и белые крысы с массой г (252 головы).
Острая токсичность препаратов испытана при пероральном способе введения: растворов препаратов, приведенных в таблице 6; растворов ВВ входящих в растворы вышеуказанных препаратов; раствора ПГМГф (100 мг/кг); раствора ПГМГх (125 мг/кг). Препараты вводили однократно внутрижелудочно в дозах от 5000,0 до 50000,0 мг/кг массы тела в объеме 0,5 мл на мышь и 5,0 мл на крысу. На протяжении 14 дней наблюдения за животными, случаев гибели отмечено не было. Патоморфологическое изучение по окончании эксперимента не выявило нарушений в структурной организации внутренних органов, как у белых мышей, так и у белых крыс. Среднелетальную дозу – LD50 изучаемых препаратов при пероральном введении определить не удалось, так как при введении препарата в максимально возможных дозах 50000,0 мг/кг – белым мышам и белым крысам, не отмечалось гибели животных. Таким образом, препараты по степени токсичности можно отнести к IV классу опасности – малоопасные вещества (ГОСТ 12.1.007-76).
Также изучали острую токсичность препаратов при наружном применении. Установлено, что препараты не оказывают общетоксического действия и не вызывают гибели животных. Водные растворы препаратов, содержащие ПГМГф в концентрации 0,4%, не обладают острым токсическим действием при однократном внутрижелудочном (на организм мышей и крыс) и наружном (на организм крыс) введении; вспомогательные вещества в составе исследованных препаратов не усиливают токсичность ПГМГф при однократном внутрижелудочном и наружном применении.
Изучение хронической токсичности растворов гранул и таблеток, содержащих ПГМГф
Изучение хронической токсичности проводили на 42 белых крысах-самцах с массой г и на 42 белых крысах-самках с массой г при нанесении препаратов на кожу в течение 30 дней. Препараты наносили ежедневно один раз в день в течение 30 суток. Объем препарата 5,0 мл (на марлевой салфетке); площадь нанесения 20 см2; плотность нанесения препарата 0,25 мл/см2; продолжительность обработки 5 минут; доза ПГМГф в испытуемых препаратах составляла 1 мг/см2.
Экспериментальные группы животных различались по составу апплицируемых рецептур следующим образом: группа 1 – водный раствор гранул состава 2-1; группа 2 – водный раствор ВВ состава 2-1; группа 3 – водный раствор таблеток состава 29-2; группа 4 – водный раствор ВВ состава 29-2; группа 5 – водный раствор ПГМГф в дозе 1,0 мг/см2; группа 6 – водный раствор ПГМГх в дозе 1,25 мг/см2.
При изучении хронической токсичности в опытных и контрольной группах на протяжении всего эксперимента случаев гибели белых крыс не зарегистрировано. Клинические показатели состояния подопытных животных соответствовали показателям животных контрольной группы.
Препарат не вызывал изменений в поведенческих реакциях, реакции на внешние раздражители, а также нарушений в двигательной активности животных.
Динамика массы тела подопытных животных не отличалась от таковой у контрольных (таблица 7). В течение всего хронического эксперимента не было отмечено раздражающего действия изучаемых препаратов, содержащих ПГМГф, на кожу крыс. При ежедневном визуальном осмотре отсутствовали: шелушение, гиперемия, отек, изъязвление.
Таблица 7
Влияние хронического введения препаратов на динамику массы тела у крыс
Группа животных | Кол-во животных | Время от начала эксперимента (дни) | |||
Исходная | 10 | 20 | 30 | ||
Масса тела животных, mср±∆m, г | |||||
Самцы | |||||
Контроль | 6 | 175,6±5,4 | 183,4±4,1 | 194,6±6,3 | 213,8±5,4 |
№1 | 6 | 178,2±6,1 | 186,1±9,5 | 197,3±6,8 | 216,2±8,4 |
№2 | 6 | 176,8±5,5 | 185,2±7,2 | 197,3±9,0 | 213,2±14,3 |
№3 | 6 | 171,9±4,8 | 180,1±5,2 | 190,5±4,7 | 210,9±5,3 |
№4 | 6 | 174,7±4,3 | 182,4±3,9 | 193,2±7,1 | 213,3±10,4 |
№5 | 6 | 173,6±4,2 | 181,2±8,1 | 192,6±7,5 | 205,2±6,3 |
№6 | 6 | 174,9±6,1 | 183,1±6,8 | 193,4±8,4 | 209,4±10,9 |
Самки | |||||
Контроль | 6 | 166,7±5,9 | 176,4±5,9 | 196,4±8,3 | 235,1±9,7 |
№1 | 6 | 160,7±7,3 | 170,1±6,8 | 191,2±6,5 | 232,9±9,6 |
№2 | 6 | 165,9±5,6 | 174,9±6,0 | 200,5±9,5 | 238,9±15,1 |
№3 | 6 | 164,8±4,2 | 175,3±8,1 | 198,0±7,6 | 230,7±6,8 |
№4 | 6 | 161,9±4,8 | 170,8±7,7 | 195,7±9,3 | 234,1±11,7 |
№5 | 6 | 162,8±7,2 | 171,5±9,7 | 194,6±9,0 | 234,8±9,0 |
№6 | 6 | 168,6±4,3 | 177,1±7,5 | 201,1±7,8 | 233,5±14,6 |
Результаты исследований, представленные в таблице 8, свидетельствуют, что 30-дневное применение препаратов в испытанных дозах у крыс не вызывает изменений относительной массы внутренних органов – тимуса, селезенки, печени, почек, надпочечников, сердца, легких, семенников по сравнению с контрольными животными.
Таблица 8
Весовые коэффициенты внутренних органов крыс после 30-дневного применения препаратов
Органы | Группа животных | ||||||
Контроль | №1 | №2 | №3 | №4 | №5 | №6 | |
Самцы крыс (в каждой группе n=6) | |||||||
Тимус | 0,72±0,05 | 0,78±0,30 | 0,70±0,11 | 0,71±0,05 | 0,78±0,16 | 0,77±0,21 | 0,70±0,09 |
Селезенка | 4,44±0,31 | 3,73±0,25 | 4,24±0,55 | 3,87±0,28 | 3,77±0,09 | 3,92±0,24 | 3,83±0,27 |
Печень | 29,78±2,15 | 31,00±0,62 | 30,02±0,76 | 29,28±0,27 | 30,91±0,36 | 29,05±0,98 | 30,96±1,71 |
Почки | 5,40±0,26 | 5,88±0,36 | 5,67±0,24 | 5,75±0,10 | 5,69±0,25 | 5,71±0,04 | 5,91±0,19 |
Надпочечники | 0,20±0,014 | 0,20±0,02 | 0,21±0,02 | 0,20±0,02 | 0,21±0,03 | 0,20±0,015 | 0,20±0,04 |
Сердце | 3,19±0,07 | 3,54±0,19 | 3,38±0,35 | 3,29±0,08 | 3,44±0,13 | 3,30±0,01 | 3,58±0,15 |
Легкие | 5,56±0,18 | 5,27±0,43 | 5,77±0,34 | 5,23±0,03 | 5,49±0,03 | 5,52±0,08 | 5,21±0,27 |
Семенники | 12,87±0,24 | 12,19±0,28 | 12,03±0,08 | 12,36±0,71 | 12,06±0,10 | 12,56±0,33 | 12,04±0,50 |
Самки крыс (в каждой группе n=6) | |||||||
Тимус | 1,01±0,04 | 1,10±0,16 | 1,17±0,12 | 1,22±0,13 | 1,05±0,08 | 1,14±0,11 | 1,13±0,10 |
Селезенка | 4,00±0,33 | 3,80±0,17 | 3,92±0,26 | 3,96±0,10 | 3,83±0,14 | 3,91±0,27 | 3,83±0,23 |
Печень | 30,11±1,51 | 30,63±1,62 | 29,35±2,74 | 31,11±1,64 | 29,90±1,07 | 29,62±2,38 | 31,07±1,84 |
Почки | 5,62±0,16 | 5,58±0,27 | 5,46±0,31 | 5,48±0,13 | 5,55±0,21 | 5,35±0,12 | 5,39±0,26 |
Надпочечники | 0,21±0,02 | 0,20±0,019 | 0,21±0,014 | 0,20±0,004 | 0,20±0,015 | 0,22±0,01 | 0,20±0,011 |
Сердце | 3,55±0,15 | 3,94±0,20 | 3,13±0,12 | 3,48±0,18 | 3,78±0,13 | 3,30±0,25 | 3,32±0,17 |
Легкие | 5,28±0,15 | 4,91±0,36 | 5,54±0,31 | 5,32±0,32 | 5,11±0,28 | 5,33±0,06 | 5,29±0,23 |
Препараты не оказывают влияние на гематологические показатели животных (таблица 9).
|
Из за большого объема этот материал размещен на нескольких страницах:
1 2 3 4 |
