Влияние селенсодержащих соединений (стр. 2 )

Кровь у кур из каждой группы брали утром перед кормлением из подкрыльцовой вены в 200, 400-дневном возрасте. Отбор проб крови у цыплят проводили из каждой группы в возрасте 41день. Кровь исследовали в условиях: областной ветеринарной лаборатории г. Пензы, клинико-диагностической лаборатории г. Заречного, кафедры биологии животных и ветеринарии Пензенской государственной сельскохозяйственной академии.

Морфологические исследования крови включали: определение концентрации эритроцитов, лейкоцитов, гемоглобина, уровень гематокрита с помощью общепринятых в гематологии методик.

Количество гемоглобина определяли гемоглобин-цианидным методом (с ацетонциангидридом). Для определения количества форменных элементов крови использовали пробирочный метод, как наиболее простой и точный. Для дифференцированного подсчета лейкоцитов (лейкограмма) окрашивали мазки по Паппенгейму.

Биохимические исследования крови включали определение: общего белка - методом рефракции сыворотки крови на рефрактометре ИРФ-45 ИБМ, белковых фракции на ФЕКе КФК-2-УХЛ-У2;общего кальция в сыворотке крови комплексометрическим методом по Уилксону (Беляков, 1975); неорганического фосфора с ванадат-молибдатным реактивом (по Пулсу в модификации и (1975)).

Содержание витамина А (по реакции Карр – Прайса), витамина Е (по реакции Эмери – Энгеля) в яйце и печени определяли спектрофотометрическим методом, рефрактометрическим методом, при длине волны 520 нм. Производилось определение витамина В2 в яйце и печени флуориметрическим методом. Активность АсАТ (К. Ф.2.6.1.1.) и АлАТ (К. Ф.2.6.1.2.) определяли по методу Райтмана-Френкеля.

Содержание селена в крови, корме, яйце определяли флуориметрическим методом в модификации , , с использованием флуориметра «Флюорат-02-3М». Нижний предел определения селена – 0,08 мкг/дм3.

В течение всего опытного периода определяли показатели, продуктивности (яйценоскость на среднюю несушку, ежедневно с учетом всех сносимых яиц); инкубационное качество яиц (массу определяли взвешиванием 50 штук яиц от группы 2 раза в месяц на аналитических весах ВЛКТ-500 с точностью до 0,01 г), толщину скорлупы с помощью винтового микрометра МК-25 (толщина тупого и острого концов яйца в средней части, не менее трех измерений), продольный и поперечный диаметр яйца, содержание в яйце витаминов Е, В2; оплодотворенность, выводимость и вывод суточных цыплят; сохранность поголовья.

От подопытных групп кур было проинкубировано яйцо в инкубаторе «Универсал», в количестве 500 штук из каждой группы. В процессе инкубации проводили биологический контроль яиц, просматривая всю партию с помощью овоскопа. Было проведено три осмотра яиц с учетом эмбриональной смертности цыплят.

В процессе инкубации первый осмотр проводили на 6 день инкубации. Отбирали яйцо с погибшими зародышами и неоплодотворенное. При втором просмотре на 15-й день инкубирования учитывали количество «замерших» эмбрионов и при третьем просмотре на 19-й день отбирали задохликов.

Оплодотворенность яиц определяли как процент оплодотворенных яиц от числа заложенных на инкубацию. Выводимость – как процент вывода здорового молодняка от числа оплодотворенных яиц.

Балансовый опыт проводили согласно методике . Опыт состоял из 2 периодов. Первый, предварительный – длительностью 7 дней. Цель этого периода – исключить влияние предшествующего кормления кур. Второй, опытный - длительностью 5 дней. В опытный период помет собирали и взвешивали ежедневно в одно и тоже время. Из собранного каждый раз помета на анализ брали приблизительно 10 % и помещали в специально приготовленную литровую банку с притертой пробкой. Аммиак фиксировали 10 н. раствором щавелевой кислоты из расчета 2 мл кислоты на 50 г помета. Собранные порции помета хранили в холодильнике. Определяли следующие показатели: влагу, жир, азот, клетчатку и селен. Коэффициент переваримости вычисляли по формуле:

где Х – коэффициент переваримости, %;

VК – содержание вещества в корме, %;

VП – содержание вещества в помете, %.

Исследования проводили в условиях кафедры биологии животных, кормления и кормопроизводства Пензенской ГСХА.

Статистическая обработка результатов проводилась в соответсвии с общепринятыми методами математического анализа с применением программы Microsoft Excel. Для оценки достоверности различий использовали t-критерий Стьюдента. Различия считались достоверными при Р<0,05 вариационной статистики.

3. Результаты исследований и их обсуждение

3.1. Влияние различных доз селенсодержащих соединений на физиолого-биохимические показатели кур.

3.1.1. Гематологические показатели.

В первой серии эксперимента проведен анализ содержания гемоглобина в крови кур всех опытных групп. Содержание гемоглобина находилось в пределах физиологической нормы. При включении в рацион кур исследуемых селенсодержащих соединений содержание гемоглобина в крови кур всех опытных групп увеличилось, но достоверного различия показателей опытных групп и контрольной группы нами не обнаружено.

При включении в рацион кур опытных групп селенсодержащих соединений количество эритроцитов достоверно возросло по сравнению с показателями контрольной группы на 0,62х1012/л или 23,3 % (Р<0,05) в первой опытной группе, на 0,66х1012/л или на 24,8 % (Р<0,01) во второй опытной группе, на 0,70х1012/л или на 26,3 % (Р<0,01) в третьей опытной группе и на 0,53х1012/л или на 19,9 % (Р<0,01) в четвертой опытной группе.

Предположительно, исследуемые селенсодержащие препараты стимулируют процесс кроветворения в красном костном мозге, что ведет к увеличению содержания эритроцитов в периферической крови.

Показатель гематокрита у кур всех опытных групп в начале исследований колебался незначительно и находился в пределах физиологической нормы. После введения в рацион кур опытных групп селенсодержащих препаратов показатель гематокрита крови стал выше по сравнению с показателями контрольной группы на 3,17 % в первой и во второй опытных группах, на 11,6 % в третьей опытной группе и в четвертой опытной группе на 4,8 %. Достоверных различий между показателями опытных и контрольной группами нами не обнаружено.

Включение в рацион кур опытных групп селенсодержащих соединений не оказало заметного влияния на количество лейкоцитов в их крови. Количество лейкоцитов в крови кур колебалось по группам в пределах 24,2 ± 1,79 – 29,9 ± 1,91х109/л в возрасте 200 дней и 27,58 ± 1,18 – 32,4 ± 2,04х109/л, что соответствует физиологической норме.

Таким образом, включение в рацион кур родительского стада селенсодержащих соединений стимулирует процесс кроветворения, повышает количество эритроцитов в крови, что согласуется с ранее проведенными исследованиями и др., 1992; и др., 1997, 2000;, 2003. Однако селенсодержащие препараты не оказали существенного влияния на количество лейкоцитов и содержание гемоглобина.

У кур всех опытных групп в 200-дневном возрасте содержание белка в сыворотке крови находилось в пределах 43,0 ± 1,38 – 46,8 ± 2,08 г/л. С введением в рацион селенсодержащих соединений к 400-дневному возрасту содержание белка в сыворотке крови кур опытных групп превышало содержание белка в сыворотке крови кур контрольной группы на 0,3 г/л или 0,7 % в первой опытной группе, 6,6 г/л или на 17,2 % (Р<0,05) во второй опытной группе, 8,6 г/л или на 22,3 % (Р<0,05) в третьей опытной группе, 6,8 г/л или на 17,6 % (Р<0,05) в четвертой опытной группе (рисунок 1).

Рис.1 Содержание общего белка в крови кур

Данный показатель достоверно превышал контроль только во второй, третьей и четвертой опытных группах. Если рассматривать количество общего белка в сыворотке крови как показатель, характеризующий обмен веществ в организме птицы, то, очевидно, добавление селена в рацион кур в виде ДАФС-25 положительно влияет на обменные процессы в организме.

В возрасте 200 дней содержание кальция в крови кур всех групп колебалось на уровне физиологической нормы 2,59 ± 0,49 – 2,91 ± 0,62 ммоль/л. В возрасте 400 дней содержание кальция в крови кур 1, 2, 3 опытных групп было больше, чем в крови кур контрольной группы на 0,01 ммоль/л или на 0,28 %, а в крови кур четвертой опытной группы - на 0,01 ммоль/л ниже, чем у кур контрольной группы.

Содержание неорганического фосфора в крови кур всех групп в возрасте 200 дней достоверно не различалось и колебалось в пределах 1,22 ± 0,20 – 1,34 ± 0,25 ммоль/л. Однако, в возрасте 400 дней по этому показателю куры опытных групп незначительно превышали кур контрольной группы - на 0,02 ммоль/л во второй опытной группе, на 0,06 ммоль/л в третьей опытной группе и ниже контроля на 0,02 ммоль/л в четвертой опытной группе.

У кур с хорошей яйценоскостью, как правило, отрицательный баланс кальция, даже при наличии избытка его в рационе, так как такие куры не могут ассимилировать кальций в нужном количестве и используют его на образование скорлупы яйца из запасов своего организма. В связи с этим содержание кальция в крови сильно варьирует в период яйценоскости. Очевидно, введение селена в организм кур способствует более эффективному усвоению не только основных питательных веществ, но и минеральных веществ.

Во все периоды исследований активность АлАТ и АсАТ у кур колебалась незначительно, в возрасте 200 дней показатели находились на уровне 0,75 ± 0,18 мкмоль/мл/ч и 0,95 ± 0,11 мкмоль/мл/ч в контрольной группе, и 0,78 ± 0,14 - 1,17 ± 0,23 мкмоль/мл/ч, и 1,13 ± 0,15 – 1,40 ± 0,21 мкмоль/мл/ч. Введение препаратов селена в рацион кур опытных групп незначительно повлияло на активность этих ферментов, которая в возрасте 400 дней находилась на уровне 0,62 ± 0,22 мкмоль/мл/ч и 0,83 ± 0,15 мкмоль/мл/ч в контрольной группе, и 0,75 ± 0,29 – 0,85 ± 0,35 мкмоль/мл/ч и 0,89 ± 0,22 – 1,20 ± 0,28 мкмоль/мл/ч.

Нами не установлено достоверных различий между активностью этих ферментов у кур контрольной и опытных групп. Следовательно, можно сделать вывод, что включение в рацион кур селенсодержащих препаратов не нарушает функцию печени. Исследованиями ряда авторов (La Due, 1954; Agress et al, 1955) установлено, что повышение активности АлАТ и АсАТ в сыворотке крови наблюдается при некоторых заболеваниях сердца и печени.

Содержание витамина А в крови кур всех групп в возрасте 200 дней колебалось незначительно (рис.2). Введение в рацион кур исследуемых селенсодержащих препаратов, вероятно, предохраняет витамин А в крови от быстрого разрушения, продлевая его действие, что наблюдалось у кур опытных групп в 400-дневном возрасте, а именно, увеличение содержания витамина А в крови кур опытных групп по сравнению с показателями кур контрольной группы на 0,1 мкг/% или 1 % в первой, на 0,5 мкг/% или 5,4 % во второй, на 1,1 мкг/% или на 12 % (Р<0,05) в третьей и на 0,3 мкг/% или 3,2 % в четвертой опытных группах.

Рис.2 Содержание витаминов А, Е в крови кур

Содержание витамина Е в крови кур в периоды опыта незначительно колебалось в возрасте 200 дней и составляло 13,02 ± 0,39 мкг/% в контрольной группе и 12,98 ± 0,46 – 13,68 ± 0,32 мкг/% в опытных группах. В возрасте 400 дней этот показатель увеличивался незначительно и находился на уровне 13,3 ± 0,20 мкг/% в контрольной группе, 13,7 ± 0,10 – 13,5 ± 0,22 мкг/% в первой и второй опытных группах. Однако достоверное увеличение витамина Е на 3,5 мкг/% или 26,3 % наблюдалось в третьей опытной группе, а также на 2,7 мкг/% или 20,3 % в четвертой опытной группе.

В конце эксперимента отмечается достоверное увеличение содержания микроэлемента селена в крови кур во всех опытных группах по сравнению с показателями кур контрольной группы на 24,3 мкг/л или 33,6 % в первой опытной группе, на 27,3 мкг/л или 37,7 % во второй опытной группе, на 29,9 мкг/л или 41,3 % в третьей опытной группе и на 23,9 мкг/л или 33 % в четвертой опытной группе. Полученные нами результаты согласуется с ранее проведенными исследованиями (, 1989; , 1995; , 2002; , 2003).

Таким образом, включение в рацион кур селенсодержащих соединений способствует увеличению содержания в крови общего белка, эритроцитов, селена, витаминов А и Е, что положительным образом сказывается на общем состоянии организма кур и их продуктивности. Следует отметить, что диацетофенонилселенид оказал более выраженное действие на исследованные показатели крови кур, чем селенит натрия.

3.1.2. Содержание витамина А и Е в печени кур.

Содержание витамина А в печени кур находилось в пределах физиологической нормы. Достоверное увеличение составило: в первой опытной группе - 42,1 %; во второй опытной группе – 57,1 %; в третьей опытной группе – 51,8 %; в четвертой опытной группе – 21 %.

Увеличение витамина Е в печени кур опытных групп по отношению к контрольной группе составило: в первой опытной группе – 14 %; во второй опытной группе – 18 %; в третьей опытной группе – 32 %; в четвертой опытной группе – 5 % (таблица 4).

Таблица 4

Содержание витаминов А и Е в печени кур

Группы	Содержание витамина А, мкг/г	Содержание витамина Е, мкг/г
Контрольная	766,6 ± 18,9	229,8 ± 5,6
I опытная (0,1 мг/кг корма ДАФС-25)	1089,5 ± 39,8***	262,8 ± 9,4**
II опытная (0,2 мг/кг корма ДАФС-25)	1204,0 ± 64,4***	271,5 ± 8,8***
III опытная (0,4 мг/кг корма ДАФС-25)	1164,0 ± 74,7***	303,5 ±1,9***
IV опытная (0,1 мг/кг корма Na2SeO3)	928,1 ± 21,5***	242,4 ± 2,9*

Примечание: * Р<0,05; ** Р<0,01; *** Р<0,001 – достоверно при сравнении с контролем.

По результатам анализа содержания витаминов А и Е в печени кур, можно говорить о положительном влиянии селенсодержащих препаратов на обеспеченность организма птицы этими витаминами. При этом протекторное действие ДАФС-25 на сохранность витаминов наиболее ярко выражено у кур в третьей опытной группе.

Воспроизводительные качества кур.

Средняя интенсивность яйценоскости кур опытных групп не превышала показатели яйценоскости кур контрольной группы за весь период опыта. Достоверное увеличение яичной продуктивности в первой опытной группе, по сравнению с показателями контрольной группы, зафиксировано в возрасте 300, 330 и 360 дней на 6,8%, 8,9% и 9,9% соответственно (таблица 5).

Таблица 5

Яйценоскость кур родительского стада

Возраст, дней Группа	Яйценоскость кур родительского стада, %	Средняя интенсивность яйценоскости,%
210	240	270	300	330	360
Контрольная	45,9±3,47	50,8±2,69	42,0±1,71	26,3±1,29	24,2±1,58	25,2±0,81	35,8±2,45
I опытная 0,1 мг/кг корма ДАФС-25	44,9±4,04	50,9±2,67	42,9±1,69	33,1±1,84 ***	33,1±0,32 ***	35,1±2,89 ***	34,0±1,67
II опытная 0,2 мг/кг корма ДАФС-25	44,9±3,58	58,0±0,78 **	46,0±1,39 **	37,7±1,07 ***	38,5±1,23 ***	36,6±1,11 ***	43,6±1,66 **
IIIопытная 0,4 мг/кг корма ДАФС-25	44,9±1,54	52,9±1,88	50,6±0,53 ***	37,7±2,78 ***	38,1±3,28 ***	38,0±3,25 ***	43,7±1,57 **
IVопытная 0,1 мг/кг корма Na2SeO3	43,4±2,99	55,8±2,63	43,9±1,33	36,7±1,66 ***	27,0±1,67	32,5±3,06 *	39,9±2,12

Примечание: * Р<0,05; ** Р<0,01; *** Р<0,001 – достоверно при сравнении с контролем.

Во второй опытной группе кур средняя интенсивность яйценоскости превышала показатели яйценоскости кур контрольной группы на 7,8% (Р<0,01). Достоверное увеличение интенсивности яйценоскости зафиксировано в возрасте 240, 270, 300, 330 и 360 дней на 7,2 %; 4 %; 11,4 %; 14,3 % и 11,4 % соответственно.

В третьей опытной группе кур средняя интенсивность яйценоскости превышала показатели яйценоскости кур контрольной группы на 7,9%. Достоверное увеличение продуктивности (на 8,6-13,9 %) зафиксировано в возрасте 270-360 дней.

В четвертой опытной группе кур средняя интенсивность яйценоскости превышала показатели яйценоскости кур контрольной группы на 4,1%. Разница показателей была не достоверна. Достоверное увеличение продуктивности на 10,4 % и 7,3 % (Р<0,05)зафиксировано в возрасте 300 и 360 дней соответственно.

Интенсивность яйцекладки кур опытных групп изменялась в соответствии с биологическими закономерностями. Первые 3 месяца показатели нарастали, а после этого наблюдалась тенденция постепенного снижения.

При использовании селенсодержащего препарата ДАФС-25 тенденция к увеличению интенсивности яйценоскости оказалась наиболее выраженной. Важно отметить, что наибольшие различия в продуктивности были в период интенсивной яйцекладки. Результаты инкубации подтверждают более выраженное влияние диацетофенонилселенида на воспроизводительные качества кур.

Анализ результатов инкубации показал, что процент оплодотворенности яиц от кур третьей опытной группы превышал оплодотворенность яиц кур контрольной группы на 3,2 %. В остальных группах отмечено незначительное повышение оплодотворенности по сравнению с контрольной группой (I – на 0,1 %; II – на 0,4 % ; IV – на 1,4 %) (таблица 6).

Таблица 6

Результаты инкубации яиц

Группа	Проинкубировано яиц, шт.	Оплодотворенность, %	Выводимость, %	Вывод, %
Контрольная	500	85,7	79,9	74,6
I опытная	500	85,8	82,4	70,5
II опытная	500	86,1	84,4	72,1
III опытная	500	88,9	87,8	77,2
IV опытная	500	87,1	87,1	76,4

Выводимость цыплят в третьей опытной группе была выше за счет снижения количества замерших эмбрионов и кровяных колец и составила 87,7 %, что выше показателей контрольной группы на 7,9 %.

При использовании диацетофенонилселенида в рационе кур родительского стада в дозах 0,1; 0,2 и 0,4 мг/кг корма не обнаружено достоверного различия в показателях инкубации, но заметна тенденция к снижению количества замерших эмбрионов во всех группах.