На основе антибиотика доксициклина из группы тетрациклинов совместно с аспирантами отдела патологии воспроизводства и молочной железы и разработаны два препарата для лечения и профилактики мастита у коров в сухостойный период.
Доксимаст, комплексный препарат, содержащий следующие компоненты, масс.%: доксициклин − 4,0; воск эмульсионный – 5,0; алюминия стеарат -3,0; масло вазелиновое до 100,0.
Неодоксимаст, комплексный препарат, содержащий следующие компоненты, масс.%: доксициклин − 3,0; неомицина сульфат − 1,0; воск эмульсионный – 5,0; алюминия стеарат -3,0 масло вазелиновое до 100,0.
3.6.1. Изучение параметров токсичности доксимаста и неодоксимаста
Острая токсичность. При однократном введении внутрь доксимаста и неодоксимаста дозах от 5000,0 до 30000,0 мг/кг массы тела в объеме 0,6 мл на мышь и 6,0 мл на крысу, за весь период наблюдения за животными не отмечено развития клинических признаков интоксикации и гибели животных.
При подкожном однократном введении препаратов в дозах: от 4000,0 до 21500,0 мг/кг массы (доксимаст), от 5000,0 до 16000,0 мг/кг (неодоксимаст) − для мышей, от 4500,0 до 22000,0 мг/кг (доксимаст), от 5000,0 до 16500 мг/кг массы тела (неодоксимаст) − для крыс, были получены следующие данные (табл. 14), которые позволили определить параметры острой токсичности доксимаста и неодоксимаста.
Таблица 14
Параметры острой токсичности доксимаста и неодоксимаста
для лабораторных животных при однократном подкожном введении (мг/кг)
Вид животных | Параметры токсичности | SLD50 | ||||
МПД | SLD16 | LD50 | LD84 | LD100 | ||
Доксимаст | ||||||
Белые мыши | 4000,0 | 6177,3 | 12706,1 (10600 ÷14800) | 19278,8 | 21500,0 | ±1038,0 |
Белые крысы | 4500,0 | 8118,7 | 13841,9 (11900 ÷ 15800) | 19701,5 | 22000,0 | ±968,0 |
Неодоксимаст | ||||||
Белые мыши | 13000,0 | 13525,4 | 14437,9 (14100 ÷14800) | 15332,1 | 15783,8 | ±190,8 |
Белые крысы | 14500,0 | 1433,72 | 15497,8 (15000÷16000) | 16662,8 | 17244,2 | ±243,4 |
Результаты приведенных исследований показывают, что доксимаст и неодоксимаст по степени токсичности относится к IV классу опасности – вещества малоопасные (ГОСТ 12.1.007-76).
Хроническая токсичность. Проведенными исследованиями установлено, что многократное подкожное применение доксимаста в дозе 276,8 мг/кг и 1384,2 мг/кг массы тела (1/50 и 1/10 от LD50 полученной при изучении острой токсичности), и неодоксимаста в дозе 310,0 и 1550,0 мг/кг (1/50 и 1/10 от LD50 в остром опыте) не вызывает существенных изменений в клиническом состоянии, не отмечено случаев гибели животных.
В течение курса применения доксимаста и неодоксимаста подопытные животные не отличались от контрольных животных по приросту массы тела. По окончании эксперимента статистически достоверных различий по массе тела между контрольными и опытными группами по каждому препарату не установлено.
Не установлены статистически достоверные различия в коэффициентах массы внутренних органов крыс опытной и контрольной групп.
Доксимаст в дозе 276,8 мг/кг массы тела (1/50 от LD50) не оказывает существенного влияния на биохимические показатели крови животных.
При исследовании крови животных, получавших препарат в дозе 1384,0 мг/кг массы тела (1/10 от LD50), у крыс достоверно возросло содержание в сыворотке крови мочевины на 30,0%, активность АлАТ – на 27,1%, креатинина – на 15,5%, В тоже время, среднее значение этих показателей у крыс опытной группы находилось в пределах нормы для данного вида животных.
Многократное подкожное введение неодоксимаста в дозах 310,0 и 1550,0 мг/мл не вызывает достоверных изменений в морфологическом составе крови, биохимических показателях по сравнению с показателями крови животных контрольной группы.
Таким образом, изучение хронической токсичности доксимаста и неодоксимаста, при подкожном введении препаратов, проведенное в опыте на белых крысах показало, что оба препарата в применяемых дозах 276,8-1384,2 мг/кг (доксимаст) и 310,0-1550,0 мг/кг (неодоксимаст) не вызывают существенных отклонений в жизнедеятельности животных, не оказывают отрицательного влияния на систему кроветворения и гомеостаз, не влияют на функциональное состояние печени и почек, не вызывают нарушений основных обменных процессов в организме.
3.6.2. Местно-раздражающее действие препаратов
Однократное воздействие. Установлено, что при однократной аппликации на кожные покровы кролика при плотности нанесения от 0,020 до 0,10 г/см2 препараты доксимаст и неодоксимаст не вызывают повреждение кожи в виде эритемы или её отёков.
Не выявлено изменений температуры тела, частоты пульса и количества дыхательных движений.
При визуальной оценке состояния конъюнктивы, роговицы и век опытных животных установлено, что препарат вызывает слабое раздражение конъюнктивы спустя два часа после инстилляции препарата, которое исчезало уже к 4 часу.
Многократное воздействие. Результаты проведенных исследований свидетельствуют о том, что длительное накожное применение основы и препаратов не вызывают повреждение кожи в виде эритемы или её отёков.
Не установлено изменений поведения и аппетита животных. Не отмечено различий температуры тела и живой массы в обеих группах кроликов. Толщина складки выстриженной и выбритой кожи животных контрольных и опытных групп на протяжении всего срока наблюдения не отличалась.
Накожное нанесение препаратов и основов приводит к незначительному увеличению толщины кожной складки в пределах 0,5-1,9 % по отношению к контролю и исходному состоянию. Таким образом, установлено, что доксимаст и неодоксимаст не оказывают раздражающего действия на кожу.
3.6.3. Аллергенные свойства доксимаста и неодоксимаста
Установлено что 20-ти кратная аппликация препаратов доксимаст и неодоксимаст не вызывает явлений сенсибилизации.
3.6.4. Фармакокинетические параметры и остаточные количества
доксимаста и неодоксимаста в биоматериале
| Доксимаст. Однократное интрацистернальное введение препарата на основе доксициклина в дозе 10 мл обеспечивает сохранение препарата в бактериостатической концентрации в секрете молочной железы и соответственно в доле вымени в течение 6 недель (рис. 4). Через 8 недель после введения доксициклин не детектируется в секрете молочной железы. |
Неодоксимаст. Однокра-тное интрацистернальное введение неодоксимаста в дозе 10 мл в каждую четверть вымени обеспечивает сохранение активнодействующих компонен-тов в секрете молочной железы и соответственно в доле вымени до 7 недель (рис. 5). Максимальная концентрация (60,0 мкг/мл) доксициклина в секрете молочной железы обнаруживается через трое суток, затем она на- |
|
чинает достаточно быстро снижаться в среднем до 12,5-6,3 мкг/мл и оставаться на этом уровне до 6 недель. В то же время в крови опытных коров доксициклин не обнаруживается на протяжении всего опыта. Основываясь на полученных результатах и данных литературы можно предположить, что доксициклин, обладая свойством хорошо растворяться в липидах, в период сухостоя быстро распределяется по паренхиме молочной железы и присутствует в количествах, превышающих минимальную подавляющую концентрацию.
| Несколько иная картина обстоит с неомицином. Данный антибиотик мало растворим в липидах, и поэтому он присутствует в секрете молочной железы в достаточно высоких концентрациях (рис. 5). Максимальная его концентрация (17,8 мкг/мл) установлена через четверо суток, затем она достаточно плавно начинает снижаться и на протяжении |
всего опыта превышает минимальную подавляющую концентрацию в 120-30 раз.
Неомицина сульфат в крови у коров обнаруживается через 1, 2, 3 и 4 недели соответственно в концентрациях 4,6; 3,8; 2,5 и 0,12 мкг/мл (рис. 6). Через 8 недель после введения препарата и в день отела доксициклин и неомицин не детектируются как в секрете молочной железы, так и в крови.
Следовательно, в пищевых целях молоко может использоваться без ограничения, при условии отсутствия признаков мастита, подтвержденных диагностическими тестами, и приобретения нормальных свойств молока.
3.6.5. Эффективность применения доксимаста и неодоксимаста для профилактики мастита у коров
Эффективность применения доксимаста для профилактики мастита определена на 370 коровах, разделенных по принципу аналогов на три группы. После последнего доения при переводе коров в сухостой животным первой группы (n=125) во все доли вымени вводили внутрицистернально однократно доксимаст, второй (n=124) - септогель, согласно наставлению по его применению, животным третьей группы (n=125) препараты не вводили, они служили отрицательным контролем. Профилактическая эффективность применения препаратов определялась в первый день после отела по результатам исследований секрета молочной железы с 2% раствором мастидина и пробой отстаивания (табл. 15).
Установлено, что в группе отрицательного контроля из 120 коров, использованных в опыте, маститом заболело 30 животных (25,%), при этом было поражено 73 четверти вымени (15,4%).
Применение септогеля обеспечило снижение заболеваемости коров до 12,9% или в 1,9 раза.
Введение доксимаста профилактировало развитие мастита у 94,4% коров. При этом пораженность долей молочной железы субклиническим маститом снизилось в сравнении с септогелем в 2,7 раза, а с контролем – в 4,9 раза.
Таблица 15
Результаты производственных испытаний применения доксимаста
для профилактики мастита у коров в сухостойный период
Группа животных | Всего в опыте | Не заболело маститом | Заболело маститом | |||||||
коров | долей | коров | % | долей | % | коров | % | долей | % | |
Доксимаст (опытная) | 126 | 496 | 119 | 94,4 | 481 | 97,0 | 7 | 5,6 | 15 | 3,0 |
Септогель (контроль) | 124 | 487 | 108 | 87,1 | 447 | 91,8 | 16 | 12,9 | 40 | 8,2 |
Отрицательный контроль | 120 | 474 | 90 | 75,0 | 401 | 84,6 | 30 | 25,0 | 73 | 15,4 |
Профилактическая эффективность неодоксимаста определена на 80 коровах, разделенных по принципу аналогов на 4 группы. Коровы первой группы (n=20) однократно внутрицистернально после последнего доения вводили препарат неодоксимаст, второй (n=20) – септогель, третьей (n=20) –орбенин ДС согласно наставлению по применению; четвертой (n=20) – препараты не применяли, они служили контролем.
Результаты исследований (табл. 16) свидетельствуют о том, что в группе отрицательного контроля из 20 коров, использованных в опыте, маститом заболело 5 животных (25,0%), при этом было поражено 12 четвертей вымени (21,1%).
Введение септогеля обеспечило снижение заболеваемости коров до 20,0% или в 1,3 раза.
Применение неодоксимаста коровам в конце запуска, как и орбенин ДС обеспечивает профилактический эффект у 90% животных, что на 10% выше септогеля. При этом пораженность долей молочной железы маститом снижается в сравнении с контролем в 2,9 раза.
Таблица 16
Эффективность применения неодоксимаста для профилактики мастита
у коров в сухостойный период
Группа животных | Всего в опыте | Не заболело маститом | Заболело маститом | |||||||
коров | долей | коров | % | долей | % | коров | % | долей | % | |
Первая, неодоксимаст | 20 | 57 | 18 | 90,0 | 53 | 92,9 | 2 | 10,0 | 4 | 7,1 |
Вторая, септогель | 20 | 60 | 16 | 80,0 | 51 | 85,0 | 4 | 20,0 | 9 | 15,0 |
Третья, орбенин ДС | 20 | 59 | 18 | 90,0 | 56 | 94,9 | 2 | 10,0 | 3 | 5,1 |
Четвертая, отрицательный контроль | 20 | 57 | 15 | 75,0 | 45 | 78,9 | 5 | 25,0 | 12 | 21,1 |
Таким образом, внутрицистернальное ведение коровам в период запуска доксимаста или неодоксимаста снижает заболеваемость коров маститом после родов в 2,5 и 4,46 раза.
|
Из за большого объема этот материал размещен на нескольких страницах:
1 2 3 4 5 6 7 |
