Оптимизация системы контроля эпизоотического процесса некробактериоза крупного рогатого скота (стр. 6 )

КСИ** *- коэффициент снижения интенсивности проявления эпизоотического процесса

В результате проведения оздоровительных мероприятий неспецифическими методами в хозяйстве №10 лабораторными исследованиями сыворотки крови установлено нормализация обменных процессов в организме животных, что видно по содержанию кальция - 2,90±0,12 ммол/л, щелочному резерву - 48,0±0,67 об% СО2, каротину - 0,53±0,042 мг%. Проведенные мероприятия способствовали снижению заболеваемости животных некробактериозом с 15 до 3,0%, КСИ составил 80 %. При проведении оздоровительных мероприятий при некробактериозе крупного рогатого скота экономическая эффективность из расчета на 1 рубль затрат равнялась 4,04 руб.

У животных хозяйства №11 биохимические показатели сыворотки крови: кальций общий, щелочной резерв, фосфор неорганический пришли в норму в 2004 году и составили соответственно 2,51 ± 0,04 ммоль/л, 52,44 ± 1,5 об% СО2 и 1,57 ± 0,06 ммоль/л. За двухлетний период оздоровления заболеваемость среди коров уменьшилась с 8 до 1,2%, среди молодняка - с 15 до 3%, КСИ составил соответственно 85 и 80%.

В результате применения неспецифических мероприятий по ликвидации некробактериоза в хозяйстве №12 с 2001 года по март 2006 заболеваемость коров некробактериозом снизилась с 12 до 3,0%, при КСИ - 75%.

В гг. биохимические показатели сыворотки крови животных хозяйство №13 по каротину (0,78 ± 0,02 - 0,94 ± 0,44 мг%); кальцию (2,5 ± 0,03 ммоль/л), фосфору (1,7 ± 0,09 ммоль/л) и щелочному резерву (48,5 ± 0,6 Об% СО2) пришли к норме. В результате проведения системы мероприятий по оздоровлению и профилактике некробактериоза с марта 2003 года по апрель 2006 заболеваемость коров некробактериозом уменьшилась с 19 до 2,7%, КСИ достиг 85,79%.

2.2.5 Разработка и испытание препаратов для лечения больных некробактериозом животных

2.2.5.1 Новый лекарственный препарат некрогель местного действия

2.2.5.1.1 Состав препарата и доклинические исследования

На основании данных о том, что при гнойно-некротическом процессе в области дистальных отделов конечностей наряду с возбудителем некробактериоза присутствует сопутствующая микрофлора и, учитывая ее биологические свойства, антибиотико - и лекарственную устойчивость, заключили, что препарат для местного применения при некробактериозе животных должен быть многокомпонентным и многофункциональным.

Исходя из этого положения, в состав препарата включили лекарственные вещества из групп антибиотиков, сульфаниламидов, местноанастезирующих, антисептических средств и формообразователей. Эта многокомпонентная смесь на водорастворимой основе, имеющая форму мази желто-коричневого цвета, со специфическим запахом чеснока, названа некрогель.

Минимальная ингибирующая концентрация (МИК) некрогеля составила в отношении штамма Fusobacterium necrophorum “ИВ” – 1,0 мкг/мл, изолята Fusobacterium necrophorum – 1,0 мкг/мл, Escherichia coli (изолят) – 7,8 мкг/мл, Staphylococcus aureus (изолят) – 4,3 мкг/мл, Streptococcus (изолят) – 4,2 мкг/мл, Micrococcus (изолят) – 22,4 мкг/мл.

Приведенные данные свидетельствуют, что некрогель обладает высокой антимикробной активностью в отношении микроорганизмов, участвующих в гнойно-некротическом процессе при некробактериозе животных.

Лечебная эффективность некрогеля в научном опыте. Для научного опыта по принципу аналогов подобрали две группы по 9 животных: опытная и контрольная. Лечение больных неробактериозом животных проводили следующим образом. Первоначально у подопытных животных осуществляли хирургическую обработку раны. Затем в опытной группе рану животных обрабатывали некрогелем, а в контрольной мазью Конькова. После этого накладывали марлевую повязку, смену ее проводили через 4 дня. Наблюдение за животными продолжали в течение 20 дней.

В обеих группах животные имели среднюю стадию некробактериозного поражения. За это время в опытной группе из 9 животных выздоровело 9, или 100%. Количество обработок составило 2,56±0,18, (Р<0,01), продолжительность лечения - 9,7±0,5 дня, (Р<0,01). В контрольной группе из 9 животных выздоровело 7 или 77,78%. Продолжительность лечения составила 14,4±0,7 дня, число обработок - 3,4±0,2.

У всех больных животных исследовали лизоцимную, бактерицидную и фагоцитарную активности до лечения и через 30 дней после выздоровления. Данные показатели у животных после выздоровления повысились соответственно на 2,85%, 0,92% и 4,15% Однако эта разность при оценке методом математической статистики оказалась недостоверной (Р>0,05). В контрольной группе показатели естественной резистентности остались на одном уровне.

2.2.5.1.2 Токсичность некрогеля для лабораторных животных

В экспериментах определили токсикологические параметры некрогеля для белых мышей при введении в желудок: максимально переносимая доза (МПД) – 4000 мг/кг, LD100 – 10000 мг/кг; расчетная LD50 – 6600 мг/кг массы.

При изучении острой токсичности некрогеля на белых крысах за 10-дневный период наблюдений ни одна из подопытных и контрольных животных не пали, что указывает о безопасности этого препарата для белых крыс. Поэтому сочли не целесообразным проводить дальнейшие опыты по определению острой токсичности некрогеля для данного вида животных, а также субхронической токсичности для лабораторных и сельскохозяйственных животных.

Изучение местно-раздражающего действия некрогеля проводили на кроликах и морских свинках. За животными наблюдали в течение 20 дней, определяя состояние кожи и измеряя толщину кожной складки. Ни в одном случае и ни у одного животного не отметили ее увеличения от исходного состояния. Не отмечали также гиперемии, отека и болезненности при пальпации. Применение некрогеля в виде аппликации на кожу не оказывало какого-либо влияния на гематологические показатели крови у кроликов.

2.2.5.1.3 Действие некрогеля на организм крупного рогатого скота

Исследования проведены на 5 коровах, у которых выстригали волосяной покров на участке средней трети шеи размером 2х3 см и измеряли толщину кожной складки. Затем на подготовленный участок кожи наносили некрогель в дозе 0,25-0,5 г дважды с интервалом 3 дня. Перед нанесением препарата, затем на 5-й и 10-й день брали пробы крови для гематологического исследования. Наблюдение за состоянием кожи и измерение толщины кожной складки проводили через 2 часа в течение 12 часов, а затем один раз в сутки в течение всего периода наблюдения (20 суток). Ни у одной из коров ни после первого, ни второго нанесения некрогеля на коже не обнаружили никаких изменений и утолщения кожной складки.

Применение некрогеля в виде аппликации на кожу не оказывало какого-либо влияния на гематологические показатели крови у коров.

Препарат стерилен, что подтверждено методом мембранной фильтрации.

Проведенные экспериментальные исследования на морских свинках показали, что мазь некрогель не обладает аллергизирующим действием.

Таким образом, на основании проведенных исследований можно сделать заключение, что в соответствии ГОСТ 12.1.00.7-76 “Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности” некрогель относится к препаратам 4-го класса опасности – вещества малоопасные.

2.2.5.1.4 Определение лечебной эффективности некрогеля в
контролируемых производственных опытах

Проведенные доклинические исследования позволили перейти к испытанию препарата в контролируемых производственных опытах, результаты которых приведены табл. 8.

По данным таблицы 8, некрогель испытан в 8 неблагополучных по некробактериозу хозяйствах на общем поголовье 1989 животных. Лечебная эффективность некрогеля колебалась от 78 до 92,86 % и в среднем по хозяйствам составила 85,67±1,89%, (Р<0,01). В контроле при обработке 1037 больных животных общепринятыми препаратами (присыпка Плахотина, Островского, мазь Вишневсого) лечебная эффективность варьировала от 61,00 до 71,00% и в среднем равнялась 64,76±1,32%.

Препарат некрогель мы впервые испытали при некробактериозе северных оленей. Для производственного испытания некрогеля сформировали две группы оленей: опытная – 195 животных и контрольная – 136 голов. В опытной группе животных обрабатывали некрогелем, в контрольной - мазью Вишневского. В опытной группе из 195 оленей выздоровело 152 головы(78%), (Х2=8,6; Р<0,01), в контрольной группе из 136 оленей - 86 животных(63,2 %).

Таким образом, некрогель в производственных условиях при обработке больных животных оказался более эффективным препаратом, по сравнению с общепринятыми лечебными средствами. При использовании некрогеля для лечения некробактериоза крупного рогатого скота, экономическая эффективность из расчета на 1 рубль затрат составила 5,39 руб. В контрольной группе животных экономическая эффективность на 1 рубль затрат была в 2,18 раза ниже и составила 2,47 руб.

Таблица 8 – Лечебная эффективность некрогеля при некробактериозе
животных в производственных условиях

Наименование хозяйства	Некрогель	Контроль
обработано животных	выздоровление, %	препарат	обработано, гол	выздоровление, %
ОАО “ПР Бурлинский” Алтайский край	224	92,86	присыпка Плахотина	205	65,37
“Новый Путь” Алтайский край	288	91,0	Присыпка Островского	172	66,86
СХПК "Серп и Молот" Ресублика Татарстан	207	85,9
ФГУ ППКЗ "Чикский" Новосибирская область	507	80,0	Присыпка Островского	236	61,0
Кирова Новосибирская область	212	86,0	Присыпка Островского	54	64,8
СПК “Шагаловский” Новосибирская область	106	89,62	Присыпка Островского	72	61,11
ЗАО “Овощевод”, Томская область	250	82	Присыпка Островского	162	71
Таймырский АО, (олени)	195	78,0	Мазь Вишневского	136	63,2
Итого, 8	1989	85,67± 1,89*		1037	64,76± 1,32

Примечание:*– достоверный уровень значимости по отношению к контролю, Р<0,01

2.2.5.1.5 Производственное испытание препарата некрогель в ряде регионов страны

В течение гг. препарат некрогель широко использовали в ряде регионов России, результаты которых отраженные в табл. 9.

Таблица 9 - Лечебная эффективность некрогеля при некробактериозе крупного рогатого скота в разных регионах страны

Наименование региона	Количество хозяйств	Получено препарата, кг	Обработа- но животных.	Выздорове- ло, %
Новосибирская область	34	621	9936	88
Алтайский край	10	120	1920	90
Республика Татарстан	5	215	3440	86
Томская область	2	21	335	84
Республика Хакасия	2	15	242	87
Кемеровская область	3	14	221	85
Читинская область	2	10	160	87
Кировская область	1	8	128	84
Тюменская область	1	6	96	85
Красноярский край	3	6	112	85
Краснодарский край	1	5	80	88
Таймырский АО (олени)	1	5	195	87
Итого 12	65	1046	16865	86,33±0,53

По данным таблицы 9, мазь некрогель испытана в 65 неблагополучных хозяйствах на 16865 больных животных в 12 субъектах России. Лечебная эффективность мази колебалась от 84 до 90 % и в среднем составила 86,33±0,53%. Больше всего обработано больных животных в Новосибирской области, Республики Татарстан и Алтайском крае, соответственно 9936, 3440, 1920 голов.

Таким образом, на основании проведенный исследований можно сделать заключение, что разработанный препарат некрогель (патент РФ № 000 от 01.01.01 г.) для лечения больных некробактериозом животных обладает достаточно высокой лечебной эффективностью, составляющей в научных опытах 100%, в производственных условиях - 78-95,3 %.

2.2.5.2 Разработка препарата местного действия в форме присыпки

Составлено несколько прописей лечебного препарата в форме присыпки. В качестве наполнителя и адсорбента использовали бентонит, энтеросорбенты, тальк.

В состав прописей присыпок входили антисептические и противовоспалительные средства, отсутствовали антибиотики.

Лечебная эффективность присыпок составила на основе бентонита - 100%, энтеросорбента – 91,7%, талька – 83,3%.

Присыпку на основе бентонита мы назвали фузоцид. Препарат фузоцид испытали в 6 хозяйствах Новосибирской области, трех хозяйствах Алтайского края и одном хозяйстве Республики Хакасия на 380 больных некробактериозом животных без учета стадии болезни при лечебной эффективности 78,15±1,2%, (Р<0,01). В контрольной группе из 146 больных животных (присыпки Островского, Плахотина) выздоровело 65,34±1,1%.

Таким образом, при производственном испытании лечебная эффективность фузоцида составила 78,15±1,2% а общепринятых лечебных средств (присыпки Островского, Плахотина) была достоверно ниже - 65,34± 1,1%.

2.2.5.3. Испытание лечебных препаратов разных фирм-производителей

Мазь профезима серии предложенная НИКТИ БАВ НПО “Вектор”. Профезим – бактериальный препарат протосубтилин, полученный из Bac. subtilis, иммобилизованный на аминоэтиленцеллюлозе, обладающий способностью быстро очищать гнойно-некротические раны за счет длительного гидролиза денатурированных белков. Лечебная эффективность мази составила 65%.

Процеол – препарат НИКТИ БАВ НПО “Вектор” применили для группового лечения и профилактики некробактериоза крупного рогатого скота в ножных ваннах. Лечебная эффективность в первоначальном контролируемом научном опыте равнялась 95,6%. Дальнейшее испытание процеола на разных группах в разных хозяйствах при терапии гнойных ран показало низкую терапевтическую эффективность (60–70%). Данный препарат, как и профезим при лечении гнойных ран необходимо применять с лечебными средствами, способствующими заживлению ран.

Новый антисептик – повиаргол изготовлен НИИКТИ БАВ НПО “Вектор”. Повиаргол – коллоидное серебро, стабилизированное синтетическим полимером. Лечебная эффективность в научном опыте была лишь 33,3%.

Учитывая полученный недостаточно высокий результат применения мази повиаргола, приготовили из порошкообразного повиаргола гель на водорастворимой основе с добавлением антибиотика тетрациклиновой группы и стабилизатора. Лечебная эффективность препарата составила 100%.

Однако, учитывая очень высокую цену при покупке повиаргола, мы вынуждены были отказаться от разработки препаратов на основе коллоидного серебра.

Оксигель-К – изготовитель ЗАО “Фармтехнология”. Оксигель – К представляет вязкую опалесцирующую массу от желтого до зеленевато-желтого цвета. Лечебная эффективность оксигеля-К составила 100%, присыпки Островского – 85%. Препарат оксигель-К испытали в 3 хозяйствах Новосибирской области на 184 больных некробактериозом животных, из которых выздоровело 76,3±2,3%.

Данный препарат, также как процеол и профезим при лечении гнойных ран необходимо применять с лечебными средствами, способствующими заживлению ран.

2.2.5.4 Разработка и испытание инъекционных лечебных препаратов

Для лечения больных некробактериозом животных предложено большое количество разных препаратов, эффективность которых не во всех случаях высокая. Это связано, по-видимому, с тем, что многие исследователи не учитывали или не указывали в своих работах степень некробактериозного поражения, что, на наш взгляд, может существенно влиять на результаты лечения. Большинство инъекционных препаратов готовят на основе окситетрациклина гидрохлорида. Однако, по данным (1989), окситетрациклин при внутримышечном введении сильно раздражает окружающие ткани на месте введения и вызывает жжение и боль, а также появление инфильтратов. Практикующие ветеринарные врачи хозяйств, также сообщали о раздражающем действии в месте введения инъекционных лечебных средств, и о снижении лечебного эффекта при длительном их применении.

Учитывая вышеперечисленные недостатки лечебных препаратов, нами на основе известных субстанций и использовании соответствующих растворителей, приготовили и испытали два препарата.

Некросептин – комплексный препарат, представляющий собой композит антибиотиков, пролангаторов и анальгезирующих веществ.

Испытание некросептина в зависимости от стадии болезни (начальная, средняя) провели в одном из неблагополучных хозяйств Новосибирской области.

Для эксперимента по принципу аналогов подобрали две группы по 10 коров в каждой. Первая группа – животные с начальной стадией некробактериоза, вторая – со средней. Животным 1-й группы некросептин вводили внутримышечно двукратно с интервалом 4 дня. Коровам 2-й группы одновременно с инъекцией некросептина в такой же дозе и по той же схеме проводили хирургическую обработку раны. Пораженную область смазывали некрогелем и накладывали марлевую повязку. Смену повязок проводили двукратно через 3-4 дня. Наблюдение за животными продолжали в течение 1 месяца. За это время в группе 1 (начальная стадия некробактериоза) из 10 коров выздоровело%). Продолжительность лечения составила 10 дней. В группе 2 (средняя стадия некробактериоза) из 10 коров выздоровело 9 (90,0%). Продолжительность лечения составила 16 дней.

Производственное испытание некросептина провели в трех неблагополучных хозяйствах на поголовье 317 животных. Лечебная эффективность препарата составила 84,7±0,56 %, (Р<0,01). В контрольной группе было 161 больных животных. Животных лечили инъекционным препаратом левотетрасульфин согласно наставлению. Эффективный лечебный результат достигнут 82,0±0,66%.

Однако, как некросептин, так и левотетрасульфин обладают раздражающим действием в месте введения больным животным. Учитывая это, нами разработан новый инъекционный препарат – тетрацин, который не вызывает побочной реакции при введении больным животным.

Тетрацин – комплексный препарат, представляющий собой композит антибиотиков нового поколения, пролангаторов и анальгезирующих веществ.

Минимальная ингибирующая концентрация (МИК) тетрацина для Fusobacterium necrophorum оставила 0,7-0,8 мкг/мл.

Тетрацин испытали в неблагополучном по некробактериозу хозяйстве. Для эксперимента по принципу аналогов подобрали две группы по 12 коров в каждой. Первая группа - животные с начальной стадией некробактериоза, вторая - со средней. Животным первой группы вводили только тетрацин 2-3 раза. Коровам 2-й группы одновременно с инъекцией тетрацина в такой же дозе и по той же схеме проводили хирургическую обработку раны. Пораженную область смазывали некрогелем и накладывали марлевую повязку. Смену повязок проводили двукратно через 3-4 дня. Наблюдение за животными продолжали в течение 20 дней. За это время в группе 1 (начальная стадия некробактериоза) из 12 коров выздоровело%). Продолжительность лечения равнялась 3-4 дням. В группе 2 (средняя стадия некробактериоза) из 12 коров выздоровело,7%). Продолжительность лечения составила 8-10 дней.

Производственное испытание тетрацина без учета стадии некробактериоза проведено в 4 неблагополучннных хозяйствах на 394 больных животных, из которых выздоровело в среднем 92,7±0,46 %, (Р<0,01). В контрольной группе при обработке левотетрасульфином 162 животных лечебная эффективность составила 81,0±0,43 %.

Таким образом, один тетрацин или в комплексе с некрогелем показал высокую лечебную эффективность в начальной и средней стадиях некробактериоза крупного рогатого скота. Продолжительность лечения животных больных некробактериозом тетрацином в начальной стадии в 2,5 раза меньше, чем некросептином, средней стадии в комплексе с некрогелем в 2 раза. При производственном испытании лечебная эффективность тетрацина составила 92,7±0,46%, некросептина - 84,7±0,56%, левотетрасульфина - 81,0±0,43 - 82,0±0,66%. При внутримышечном введении животным тетрацин не обладал раздражающим действием по сравнению с некросептином и левотетрасульфином.