Совершенствование селекционного процесса плодовых и ягодных растений на основе цитологических методов и культуры изолированных тканей (стр. 2 )

Нарушение сбалансированности систем, контролирующих нормальное развитие отдаленных гибридов, может привести к нарушениям в мейозе при расхождении хромосом в анафазе и образованию гамет с разным уровнем плоидности. Поэтому мы вправе предположить, что триплоиды и тетраплоиды могут формировать женские гаметы разных типов (рис.2).

Таблица 2 - Результаты использования метода эмбриокультуры при получении сеянцев F2 отдаленных гибридов

Показатель	Происхождение зародышей
триплоид х тетраплоид	тетраплоид х гексаплоид	тетраплоид х (диплоид + гексаплоид)	тетраплоид х тетраплоид
Средняя оценка развития зародышей, балл	5,0	4,2	4,6	4,5
Посеяно зародышей, шт.	2	35	8	21
Развились в проростки, шт. %	2 100	30 85,7	8 100	20 95,2
Высажено сеянцев в грунт, шт. %	1 50	27 77,1	7 87,5	17 81,0

Первая группа гибридов – х=8, 2х=16, 3х=24, вторая – х=8, 2х=16, 3х=24, 4х=32. При гибридизации триплоидов (F1) с терном в результате свободного комбинирования возможных типов гамет можно ожидать появление следующих классов потомства (F2): 3х=24, 4х=32, 5х=40. В комбинации скрещивания 4х (F1) х 6х : 4х=32, 5х=40, 6х=48, 7х=56. При опылении 4х (F1) х 4х, могут сформироваться гибридные организмы, имеющие кариотип: 3х=24, 4х=32, 5х=40, 6х=48. Вполне возможно появление анеуплоидных форм (моносомиков, нуллисомиков, трисомиков).

Исследования показали, что сеянцы F2 от скрещивания 4х (96-68) х 6х, 4х (96-68) х (2х+6х) и 4х х 4х характеризуются низкой степенью подмерзания (0-1 балл). Вместе с тем, в гибридной семье 4х х 4х одиночные растения имели 4-5 баллов подмерзания, несмотря на то (по литературным данным), что терн обладает высокой зимостойкостью и передает этот признак гибридам. Очевидно, при отдаленной гибридизации формируется широкий спектр форм по наследованию определенного признака. Исследованиями установлено, что у некоторых гибридных растений (F2) отмечали ограниченную силу роста. Причем, различия в силе роста между отдельными сеянцами в пределах гибридной семьи наблюдали уже по мере их роста в вазонах с почвой. По-нашему мнению, это связано с тем, что одним из компонентов скрещивания при получении F1 и F2 являлись слаборослые формы – сорт вишнесливы Опата и терн, которые могли передать сеянцам гены, контролирующие этот признак.

триплоид (F1) тетраплоид (терн)

	а б в
гетраплоид (F1) гексаплоид (слива домашняя) тетраплоид (F1) тетраплоид (терн)	а б в
Рис. 3. Формообразование в комбинациях скрещивания с участием гибридов сливы (F1): а – исходные формы; б – гаметы; в – гибрид (F2). Х-основное число хромосом рода Prunus Mill равно 8.	а б в

Так, в гибридных семьях 4х (96-68) х 6х и 4х (96-68) х (2х+6х) выделены формы с естественным сдержанным ростом, высота которых в пятилетнем возрасте не превышала 1 м.

4.2. Влияние физиологически активных веществ на развитие зародышей яблони в культуре in vitro. Исследованиями установлено, что введение в питательную среду экзогенных результатов роста оказывало положительное влияние на формирование проростков. В ряде вариантов опыта наблюдалось развитие из каждого зародыша нескольких побегов (табл.3).

Таблица 3 - Влияние экзогенных регуляторов роста на развитие

изолированных зародышей (среда Мурасиге-Скуга)

Происхождение зародышей (сорт)	Концентрация фитогормонов, мг/л	Число зародышей в опыте, шт.	Развились в проростки, шт.	Всего сформировалось побегов, шт.	Среднее число побегов из зародыша, шт.
Ренет Черненко	0 (контроль)	20	2	2	1,0
БАП 1,0	16	10	26	2,6
БАП 2,0	22	12	76	6,3
БАП 4,0	37	11	79	7,2
БАП 1,6 + ГК 0,5 + ИМК 0,1	20	7	7	1,0
НСР05					3,0
Кандиль Горшкова	0 (контроль)	40	5	5	1,0
БАП 1,0	44	24	48	2,0
БАП 2,0	41	23	64	2,8
БАП 3,0	41	13	89	6,8
БАП 4,0	41	7	20	2,9
БАП 1,6 + ГК 0,5 + ИМК 0,1	40	28	28	1,0
НСР05					1,28
Пепин шафранный	0 (контроль)	40	3	3	1,0
БАП 1,0	36	8	17	2,1
БАП 2,0	30	6	6	1,0
БАП 3,0	36	14	38	2,7
БАП 1,6 + ГК 0,5 + ИМК 0,1	15	5	5	1,0
НСР05					0,93
Антоновка обыкновенная	0 (контроль)	35	4	4	1,0
БАП 1,0	36	8	26	3,3
БАП 2,0	30	5	5	1,0
БАП 3,0	34	6	30	5,0
БАП 1,6 + ГК 0,5 + ИМК 0,1	30	8	8	1,0
НСР05					1,26
Грушовка московская	0 (контроль)	30	0	0	0
БАП 1,0	28	8	21	2,6
БАП 2,0	33	7	16	2,3
БАП 3,0	31	9	28	3,1
БАП 1,6 + ГК 0,5 + ИМК 0,1	22	6	6	1,0
НСР05					1,21

Способность зародышей к пролиферации дополнительных побегов отмечалась при добавлении в питательную среду 6-БАП, что связано с её физиологическим эффектом снимать апикальное доминирование верхушечной почки в растении. Воздействуя на верхушечную почку зародыша, 6-БАП вызывает дифференциацию пазушных почек, их пробуждение и активацию роста в побеги. Зародыши по-разному реагировали на присутствие в среде цитокинина. При этом эффект действия зависел от его концентрации, комбинации с другими регуляторами роста генотипических особенностей. Менее интенсивно протекал процесс активации прорастания пазушных почек и развитие побегов у зародышей культивируемых на других испытанных вариантов сред и в основном при сочетании 6-БАП с ИУК или ИМК. Эти варианты были на уровне контроля.