Иммуно-патогенетическая характеристика эффективности применения (стр. 3 )

Таблица 3

Динамика уровня цитокинов в сыворотке крови пациентов с ХВГС

Цитокины (пг/мл)	Здоровые доноры (n=22)	Опытная группа (n=27)	Контрольная группа (n=30)
Mе (LQ-UQ )	Mе (LQ-UQ )	Mе (LQ-UQ )
IL-10	4,8 (4,0-6,0)	4,94 (4,20-5,80) 4,93 (4,00-5,70)	4,8 (3,10-6,30) 4,81 (3,30-5,60)
IL-6	5,0 (4,29-6,92)	5,4 (4,2-6,3) 4,9 (4,0-5,9)	4,8 (4,0-5,9) 4,5 (4,1-5,7)
TNF-α	3,01 (2,40-4,38)	3,2 (2,3-4,2) 3,1 (2,3-4,9)	3,05 (2,40-3,80) 2,9 (2,4-3,5)
INF-α	14,0 (12,0-18,0)	7,6 (5,9-10,3)3 8,0 (5,5-9,4)3	7,7 (6,4-9,2)3 7,3 (5,9-9,9)3
INF-γ	23,6 (18,0-29,0)	26,0 (20,0-31,2) 24,8 (18,0-30,7)	26,0 (15,0-30,0) 27,0 (16,6-30,0)
IL-4	4,2 (3,99-5,00)	9,1 (5,7-11,6)3 5,0 (4,8-5,4)1,2	8,0 (6,0-12,1)3 9,6 (5,3-10,7)3
INF-γ/ IL-4	5,6 (3,7-6,5)	2,7 (2,0-4,6)3 4,6 (3,6-6,2)1,2	2,5 (1,6-5,2)3 2,7 (1,6-4,7)3

Примечание: в числителе – показатели до начала лечения, в знаменателе – показатели после лечения; 1 - различия по отношению к показателям до начала лечения статистически значимы; 2 - различия по отношению к показателям контрольной группы после лечения статистически значимы. 3 - различия по отношению к показателям здоровых доноров статистически значимы.

По окончании лечения у пациентов опытной группы содержание IL-4 в сыворотке крови снижалось до уровня средне-нормальных значений, сопровождаясь увеличением соотношения INF-γ/IL-4, тогда как у пациентов контрольной группы после базисного лечения содержание IL-4 не менялось, не изменялось также и соотношение INF-γ/IL-4 (табл.3).

Поскольку системный уровень цитокинов не всегда адекватно отражает тяжесть состояния (так как цитокины являются локальными медиаторами, имеют короткий период полураспада в сыворотке крови, способны активно связываться с растворимыми рецепторами к ним ( с соавт., 2003), мы оценили способность клеток цельной крови пациентов с ХВГС, получавших полисахариды из бурых водорослей в комплексе с базисной терапией, к продукции цитокинов in vitro.

Полученные результаты свидетельствовали о сохранении резервных возможностей клеток периферической крови пациентов с ХГВС в отношении продукции про - и противовоспалительных цитокинов на фоне снижения интерферонпродуцирующей функции: до начала терапии у пациентов с ХВГС способность клеток периферической крови к спонтанной продукции IL-6, TNF-α, IL-10 и IL-4 была усилена, способность к выработке INF-α и INF-γ – снижена - по сравнению с показателями у здоровых доноров; митогенстимулированная продукция TNF-α, IL-6, IL-10, и IL-4 у пациентов с ХГВС значимо превышала соответствующие показатели стимулированных лимфоцитов у здоровых доноров, в то время как концентрация INF-γ и INF-α в супернатантах стимулированных лимфоцитов пациентов с ХВГС снижалась (табл.4).

В супернатантах ЛПК пациентов контрольной группы после базисного лечения было отмечено незначительное снижение концентрации TNF-α, однако этот показатель значимо превышал таковой у пациентов опытной группы. Продукция IL-6 значимо не изменялась и сохранялась на высоком уровне. Наблюдалось незначительное увеличение спонтанной продукции INF-γ, не достигающее уровня нормальных показателей. Спонтанная и митогениндуцированная продукция INF-α значимо не изменялась, способность клеток крови к продукции IL-10 и IL-4 оставалась повышенной (табл.4).

Применение полисахаридов из бурых водорослей в комплексе с базисной терапией способствовало снижению и нормализации уровня спонтанной продукции провоспалительных цитокинов TNF-α и IL-6, индуцированной продукции TNF-α, а также противовоспалительных цитокинов IL-10 и IL-4 и усилению интерферонпродуцирующей функции клеток периферической крови пациентов с ХВГС (табл.4). Таким образом, полисахариды из бурых водорослей оказывают иммунорегулирующее действие на измененные показатели цитокинового статуса у пациентов с ХВГС: нормализуют баланс цитокинов Th1- и Th2-лимфоцитов за счет снижения концентрации противовоспалительных цитокинов и усиления интерферонпродуцирующей функции клеток крови, снижают уровень провоспалительных цитокинов.

Таблица 4

Спонтанная и митогениндуцированная продукция цитокинов ЛПК у здоровых доноров и пациентов с ХВГС по окончанию лечения

Цитокины (пг/мл)	Спонтанная продукция	Индуцированная продукция
Здоровые Доноры (n=22)	Опытная Группа (n=27)	Контрольная группа(n=30)	Здоровые доноры(n=22)	Опытная группа(n=27)	Контрольная группа(n=30)
IL-10	4,2 (3,1-4,6)	5,3 (5,0-6,1)4 4,3 (2,9-4,9)1,3	5,6 (4,6-6,4)4 5,4 (4,7-5,9)	9,0 (4,8-11,5)2	18,1 (11,3-22,1)2,4 10,8 (6,6-12,0)1,2,3	23,0 (12,1-29,0)2,4 17,6 (6,5-25,0)1,2
IL-6	210,0 (180,0-325,0)	373,0 (319,0-417,0)4 202,0 (146,0-333,0)1,3	353,0 (331,0-388,0)4 357,0 (246,0-423,0)	495,0 (360,0-605,0)2	725,0 (586,0-915,0)2,4 810,0 (559,0-1119,0)2	674,0 (417,0-1000,0)2,4 783,0 (517,0-1134,0)2
TNF-α	19,4 (19,1-21,6)	68,0 (45,0-94,0)4 32,0 (23,0-48,0)1,3	66,0 (52,0-76,0)4 55,0 (35,0-70,7)1	165,0 (115,0-200,0)2	224,0 (157,0-246,0)2,4 86,0 (39,0-118,0)1,2	184,0 (145,0-241,0)2,4 96,0 (46,0-125,0)1
INF-α	40,0 (34,2-46,3)	14,9 (12,0-18,3)4 18,0 (15,8-20,0)1,3	15,0 (12,7-17,0)4 14,6 (13,5-15,0)	53,0 (47,0-61,0)2	20,8 (19,3-24,0)2,4 21,7 (21,0-25,0)2	21,4 (18,8-24,0)2,4 20,7 (19,6-23,1)2
INF-γ	58,0 (48,0-69,0)	37,0 (33,0-41,0)4 48,5 (43,0-55,7)1,3	38,0 (35,0-43,0)4 41,9 (35,0-45,0)1	148,0 (136,4-163,2)2	55,2 (51,0-58,0)2,4 40,0 (35,0-46,0)1	55,4 (49,0-57,0)2,4 47,0 (45,0-49,0)1
IL-4	15,1 (11,3-17,0)	23,0 (14,7-29,0)4 12,4 (11,5-17,2)1,3	23,4 (18,0-30,0)4 20,7 (18,0-29,0)	19,7 (15,4-28,0)2	41,7 (29,0-42,0)2,4 28,8 (25,0-36,0)1,2	37,6 (32,0-43,0)2,4 36,3 (28,0-43,0)2
INF-γ/ IL-4	3,9 (2,6-5,2)	2,0 (1,4-2,5)4 4,4 (2,3-5,0)1,3	1,6 (1,3-2,2)4 1,85(1,50-2,20)1	7,3 (5,1-10,2)2	1,5 (1,3-1,7)2,4 1,35 (1,00-1,50)2	1,5 (1,1-1,8)4 1,26 (1,00-1,50)1,2

Примечание: в числителе - показатели до начала лечения, в знаменателе - показатели после лечения; 1 - различия по отношению к показателям до начала лечения статистически значимы; 2 - различия по отношению к показателям спонтанной продукции цитокинов статистически значимы; 3 – различия по отношению к показателям контрольной группы после лечения статистически значимы. 4 - различия по отношению к показателям здоровых доноров статистически значимы

III. Состояние врожденного иммунитета у пациентов с ХВГС и его коррекция полисахаридами из бурых водорослей

Воздействие различных инфекционно-токсических агентов, в том числе вирусов, может служить причиной изменения активности гуморальных и клеточных факторов врожденного иммунитета. Мы исследовали фагоцитарную активность нейтрофилов периферической крови, уровень ЦИК и их размеры у пациентов с ХВГС, а также влияние полисахаридов из бурых водорослей на эти факторы. При оценке фагоцитарной системы у пациентов с ХВГС было установлено снижение функциональной активности нейтрофилов периферической крови (ФП – 65,6±6,6%, ФЧ - 3,8±0,7) по сравнению с показателями у здоровых доноров (ФП - 80±5,0%; р=0,000, ФЧ - 4,5±0,5; р=0,010 соответственно). На фоне проводимой терапии у пациентов, получавших полисахариды из бурых водорослей в комплексе с базисным лечением, наблюдалось значимое увеличение ФП (с 68 (59-69) % до 74 (68-78) %; р=0,003) и ФЧ (с 3,9 (2,9-4,5) до 4,6 (3,6-5,7); р=0,007), в то время как в контрольной группе у пациентов, получавших только базисную терапию, эти показатели не изменялись и сохранялись на сниженном уровне (ФП с 68 (62-72)% до 69 (62-71)%; р=0,117; ФЧ с 3,5 (3,1-4,5) до 3,7 (3,1-4,6); р=0,157). Нарушение равновесия процессов формирования и нейтрализации ЦИК, необходимых для удаления чужеродных антигенов, способствует длительной персистенции иммунных комплексов в организме, фиксации их в тканях и, следовательно, развитию иммунокомплексных повреждений (, 2003; , 2004). При исследовании уровня ЦИК в сыворотке крови пациентов с ХВГС до начала лечения было выявлено увеличение концентрации иммунных комплексов (157,4±46 ед. ОП; у здоровых доноров - 62,4±5,4 ед. ОП, р=0,000) с преобладанием иммунных комплексов мелких размеров, менее эффективно активирующих систему комплемента и длительно циркулирующих в крови. Под влиянием проведенной терапии у пациентов опытной группы отмечено снижение уровня ЦИК в сыворотке крови (с 148 (129-158) ед. ОП до 107 (94-131) ед. ОП, р=0,0003) с уменьшением количества низкомолекулярных и увеличением крупномолекулярных ЦИК. В контрольной группе, получавших базисную терапию, концентрация ЦИК сохранялась на высоком уровне (с 153 (125-202) ед. ОП до 154 (119-181) ед. ОП, р=0,850), изменения в качественном составе иммунных комплексов выявлено не было. Таким образом, полисахариды из бурых водорослей в комплексе с базисной терапией у пациентов с ХВГС обладают регулирующим эффектом на измененные факторы врожденного иммунитета: снижают уровень ЦИК в сыворотке крови, увеличивают их молекулярную массу, нормализуют измененные показатели активности фагоцитарной системы.