Иммуно-патогенетическая характеристика эффективности применения (стр. 4 )

IV. Оценка влияния полисахаридов из бурых водорослей на воспалительный процесс в печени

Наличие репликации HСV в гепатоцитах, а также клетках иммунной системы, циркуляция иммунных комплексов, снижение продукции альфа-интерферона, прямое угнетающее влияние возбудителя на факторы врожденного и адаптивного иммунитета играют важную роль в патогенезе хронического гепатита, приводя к повреждению печеночной паренхимы с развитием воспалительной реакции, цитолитического синдрома и формированием фиброза печени. В предыдущих разделах работы мы установили способность полисахаридов бурых водорослей корригировать нарушения клеточных и гуморальных факторов врожденного и адаптивного иммунитета у пациентов с ХВГС, отражающие степень выраженности воспалительного процесса в печени. В этой связи нам представилось целесообразным оценить влияние полисахаридов из бурых водорослей на воспалительный процесс в органе-мишени (печени). С этой целью мы исследовали влияние полисахаридов из бурых водорослей на биохимические и морфометрические показатели печени и процессы ПОЛ-АОЗ у пациентов с ХВГС в фазе реактивации.

Анализ биохимических показателей крови у пациентов с ХВГС до начала лечения выявил высокий уровень аминотрансфераз (AлАТ – 132,5 (97,0-195,0) МЕ/л, АсАТ – 101,0 (83,0-151,0) МЕ/л) по сравнению с показателями у здоровых лиц (AлАТ – 25,0 (20,0-31,0) МЕ/л; р=0,000; АсАТ - 20,8 (18,4-23,5) МЕ/л; р=0,000), свидетельствующий о наличии цитолитического синдрома у обследуемых. В результате проведенного лечения наблюдалось снижение активности аминотрансфераз в опытной (AлАТ c 133,0 (90,0-198,0) МЕ/л до 54,0 (46,0-73,0) МЕ/л, р=0,000; АсАТ c 101,0 (83,0-139,0) МЕ/л до 53,0 (42,0-57,0) МЕ/л, р=0,000) и контрольной (AлАТ c 131,0 (99,0-172,0) МЕ/л до 88,0 (66,0-108,0) МЕ/л, р=0,000; АсАТ c 100,0 (83,0-144,0) МЕ/л до 82,0 (65,0-99,8) МЕ/л, р=0,000) группах, однако у пациентов, получавших полисахариды из бурых водорослей в комплексе с базисным лечением, уровень этих показателей был значимо ниже, чем у пациентов в контрольной группе (р1=0,001; р1=0,000 соответственно). Увеличение размеров печени, выявленное при объективном осмотре и свидетельствующее об усилении активности воспалительного процесса, подтверждали данные ультразвукового исследования органов брюшной полости (сагиттальный размер печени по срединно-ключичной линии (17,3±1,3 см) значимо превышал показатели у здоровых доноров - 10,5±1,5 см; р=0,000). На момент окончания терапии у большинства пациентов опытной группы размеры печени уменьшились (с 17,4 (16,2-18)см до 14,0 (12,8-14,9) см, р=0,000), в то время как в контрольной группе нормализации размеров печени выявлено не было (с 17,4 (16,3-18,0) см до 17,0 (16,9-17,9) см, р=0,287).

Нарушения процессов ПОЛ и АОЗ играют важную роль в развитии патологического процесса при хронических вирусных гепатитах (Choi J. et al., 2004), смещая окислительно-восстановительный баланс в сторону активации процессов ПОЛ и приводя к развитию синдрома липидной пероксидации, связанного с накоплением активных форм кислорода и липидных радикалов, участвующих в повреждении биомембран гепатоцитов (, 2003; Choi J., 2006). В наших исследованиях до начала лечения у пациентов с ХВГС в фазе реактивации выявлено высокое содержание МДА (7,2±1,7 мкмоль/гНв) в эритроцитах крови и сниженный уровень АОА плазмы (75,4±13,4%) по сравнению с показателями у здоровых доноров (5,6±0,64 мкмоль/гНв, р=0,000; 82±7,1%, р=0,043 соответственно), свидетельствующие о смещении окислительно-восстановительного баланса в сторону активации процессов ПОЛ. После применения полисахаридов из бурых водорослей в комплексе с базисной терапией у пациентов опытной группы наблюдалась нормализация показателей системы ПОЛ/АОЗ: уровень МДА в эритроцитах крови снизился с 6,7 (6,0-7,6) мкмоль/гНв до 5,7 (5,4-6,6) мкмоль/гНв; р=0,001, показатель АОА плазмы крови повысился до средне-нормальных значений (с% до%; р=0,004). В контрольной группе пациентов после базисной терапии изменений показателей ПОЛ/АОА выявлено не было. Окислительно-восстановительный баланс был смещен в сторону процессов липопероксидации, что проявлялось высоким уровнем МДА в эритроцитах крови (до лечения – 6,8 (6,2-8,3) мкмоль/гНв, после лечения - 6,6 (6,0-7,3) мкмоль/гНв; p=0,175) и сниженными показателями АОА плазмы (до лечения%, после лечения –%; р=0,750).

Таким образом, полисахариды из бурых водорослей в комплексе с базисной терапией у пациентов с ХВГС способствуют снижению воспалительного процесса в печени: уменьшают уровень аминотрансфераз, нормализуют размеры печени, оказывают регулирующее действие на процессы липопероксидации, восстанавливая баланс между процессами перекисного окисления липидов и механизмами антиоксидантной защиты. С целью доказательства универсальности действия полисахаридов из бурых водорослей на воспалительные процессы в печени, мы оценили влияние фукоидана из бурой водоросли Fucus evanescens на биохимические и морфометрические показатели печени у мышей с хроническим токсическим гепатитом, индуцированным тетрахлорметаном. Индукция токсического гепатита у мышей сопровождалась статистически значимым увеличением массы печени, содержания аминотрансфераз, лактатдегидрогеназы, глюкозы и общего билирубина в сыворотке крови по сравнению с показателями у интактных животных, свидетельствующим о развитии цитолитического синдрома и нарушении пигментообразующей функций печени (рис.2). Данные магнитно-резонансной томографии свидетельствовали об увеличении линейных размеров печени (рис.2), края долей были неровными, просматривались нечетко, строма и паренхима печени были резко деформированы.

______ интактная группа; _ _ _ _ профилактическая схема;

…… контрольная группа; ______ лечебная схема

Рис.2. Влияние фукоидана на биохимические показатели крови, массу и линейные размеры печени у мышей с хроническим токсическим гепатитом (по отношению к контролю, принятому за 100% (различия показателей у интактных животных и животных опытных групп статистически значимы по отношению к показателям у животных контрольной (ССl4) группы (p<0,05).

У животных, получавших фукоидан по лечебной и профилактической схемам, содержание аминотрансфераз, лактатдегидрогеназы, глюкозы и общего билирубина снижалось, приближаясь к показателям у интактных здоровых мышей, нормализовалась масса печени, уменьшались линейные размеры (рис.2). Края печени были ровными, паренхима и строма печени не деформированы, желчные протоки не изменены.

Таким образом, проведенное исследование выявило нарушения факторов врожденного, адаптивного иммунитета, цитокинового статуса и системы перекисного окисления липидов/антиоксидантной защиты у пациентов у пациентов с ХВГС в фазе реактивации. Оценка влияния полисахаридов из бурых водорослей на состояние иммунной системы и воспалительный процесс в печени у пациентов с ХВГС позволила обосновать целесообразность их применения для оптимизации базисной терапии.

ВЫВОДЫ

Установлены особенности дисфункции иммунной системы у пациентов с ХГВС в фазе реактивации с низкой и умеренной степенью биохимической активности, выражающиеся в активации гуморальных факторов иммунитета, изменении функциональной активности нейтрофилов (снижение фагоцитарной активности) и лимфоцитов (нарушение процессов активации) на фоне нормальных количественных параметров их субпопуляционного состава. Состояние цитокиновой системы у пациентов с хроническим вирусным гепатитом С в фазе реактивации с низкой и умеренной степенью биохимической активности характеризуется дисбалансом сывороточных цитокинов с доминированием медиаторов Th2-лимфоцитов, а также снижением интерферонпродуцирующей функции клеток периферической крови на фоне гиперпродукции про - и противовоспалительных цитокинов. Применение полисахаридов из бурых водорослей в комплексе с базисной терапией у пациентов с хроническим вирусным гепатитом С оказывает иммуномодулирующее действие на факторы врожденного и адаптивного иммунитета, сопровождающееся изменением процессов активации лимфоцитов, зависящим от исходного состояния клетки, нормализацией уровня основных классов иммуноглобулинов, ЦИК и их качественного состава, увеличением фагоцитарной активности нейтрофилов. Полисахариды из бурых водорослей в составе базисной терапии у пациентов с хроническим вирусным гепатитом С регулируют цитокиновый баланс, нормализуя соотношение сывороточных цитокинов, продуцируемых Th1/Th2-лимфоцитами. Усиление интерферонпродуцирующей функции клеток крови пациентов с хроническим вирусным гепатитом С, получавших полисахариды из бурых водорослей и снижение секреции про - и противовоспалительных цитокинов, отражает снижение активности инфекционного воспалительного процесса. Полисахариды из бурых водорослей в комплексе с базисной терапией у пациентов с хроническим вирусным гепатитом С способствуют снижению воспалительного процесса в печени, нормализуя функциональную активность и морфометрические показатели печени, восстанавливая баланс системы перекисного окисления липидов и антиоксидантной защиты. Фукоидан из Fucus evanescens снижает проявления воспалительного процесса в печени у экспериментальных животных с индуцированным хроническим токсическим гепатитом - нормализует морфометрические показатели и функциональную активность печени.

РЕКОМЕНДАЦИИ ДЛЯ ВНЕДРЕНИЯ В МЕДИЦИНСКУЮ НАУКУ И ПРАКТИКУ

1. Выявленные наиболее информативные показатели иммунного статуса у пациентов с хроническим вирусным гепатитом С (уровень экспрессии активационных антигенов на поверхности ЛПК - CD25, CD95, HLA-DR), рекомендовано использовать для оценки степени выраженности иммунных нарушений, а также эффективности их коррекции в лечебных мероприятиях.

2. На основании оценки иммуно-патогенетической эффективности полисахаридов из бурых водорослей рекомендовано включение БАД “Фуколам” в состав базисной терапии у пациентов с хроническим вирусным гепатитом С с целью коррекции дисфункции иммунной системы и нормализации функциональной активности печени. Режим приема - по 1 капсуле 2 раза в день в течение 30 дней в комплексе с базисной терапией.

СПИСОК ОПУБЛИКОВАННЫХ НАУЧНЫХ РАБОТ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Функциональная активность лимфоцитов периферической крови пациентов с хроническим вирусным гепатитом С при включении в комплекс лечения фукоидана из Fucus evanescens / , , // Тихоокеанский медицинский журнал№3. - С.55-58.

2. Гепатопротекторные свойства фукоидана из бурой водоросли Fucus evanescens / , , // Тихоокеанский медицинский журнал.-2010.- №4. - С.32-35.

3. Влияние фукоидана из Fucus evanescens на показатели цитокинового статуса у пациентов с хроническим гепатитом С / , , // Цитокины и воспаление. – 2011. – Т.10, №4. – С.105-110.

4. Клинико-биохимическая эффективность применения БАД “Фуколам“ в комплексной терапии больных с ХВГС / , , // Материалы XII Международной научной конференции “Здоровье семьи – XXI век”, Эйлат, Израиль, 29 апреля – 07 маяС. 332-333.

5. Влияние фукоидана на экспрессию активационных антигенов лимфоцитами периферической крови при хроническом вирусном гепатите С / , , , // Тихоокеанский медицинский журнал№3. - С.138.

6. Влияние фукоидана из Fucus evanescens на показатели иммунного и цитокинового статуса у больных хроническим вирусным гепатитом С при включении в комплекс лечебных мероприятий / , , // Вестник Уральской медицинской академической науки. – 2010. - №2/1. – С. 215-216.

7. Влияние фукоидана из Fucus evanescens на показатели антиоксидантной системы у пациентов с хроническим гепатитом С / , , // Достижения науки и практики в обеспечении санитарно-эпидемиологического благополучия Вооруженных Сил Российской Федерации: труды Третьего съезда военных врачей медико-профилактического профиля Вооруженных Сил Российской Федерации. – СПб. – 2010. – С.160.

8. Филонова, фукоидана из Fucus evanescens на гуморальные факторы естественной резистентности у больных хроническим вирусным гепатитом С / , , // Журнал инфекционной патологии. – 2010. - Т.17. - №3. – С.203.

9. Коррекция нарушений интерферонпродуцирующей способности клеток крови у пациентов с хроническим гепатитом С / , , , // Инфекционные болезни. – 2011. – Т.9, Приложение 1. – С. 337.

10. Филонова, фукоидана из бурой водоросли Fucus evanescens на факторы врожденного иммунитета у пациентов с хроническим вирусным гепатитом С / , , // Фундаментальные аспекты компенсаторно-приспособительных процессов: Материалы Пятой Всероссийской научно-практической конференции, Новосибирск, 12-14 апреля– С.225-226.

11. Филонова, цитокинпродуцирующей функции клеток периферической крови пациентов с хроническим вирусным гепатитом С фукоиданом из морских бурых водорослей / , , // Дни иммунологии в Сибири: Материалы Всероссийской научно-практической конференции с международным участием, Абакан, 27-28 апреля– С.216-217.

12. Клинико-патогенетическое обоснование применения фукоидана из бурой водоросли Fucus evanescens в комплексной терапии у пациентов с хроническим вирусным гепатитом С / , , // Актуальные вопросы аллергологии и иммунологии: Материалы Χ Региональной научно-практической конференции, Владивосток, 19 апреля. – 2012. – С.54-58.

13. Применение полисахаридов из бурых водорослей в комплексе с базисной терапией у пациентов с хроническим вирусным гепатитом С / , , // Методические рекомендации. Владивостокс.

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

АлАТ – аланиновая аминотрансфераза

АОА – антиокислительная активность

АсАТ – аспарагиновая аминотрансфераза

БАД – биологически активная добавка к пище

КонА – конканавалин А

ЛДГ – лактатдегидрогеназа

ЛПК – лимфоциты периферической крови

МДА – малоновый диальдегид

МРТ – магнитно-резонансная томография

ПОЛ/АОЗ – перекисное окисление липидов - антиоксидантная защита

ФП – фагоцитарный показатель

ФЧ – фагоцитарное число

ХВГС – хронический вирусный гепатит С

ЦИК – циркулирующие иммунные комплексы

CD25, CD95, HLA-DR – молекулы активации

IgA, IgG, IgM – иммуноглобулины A, G, M

IL – 1,4,6,10 – интерлейкины 1,4,6,10

IFN-α – интерферон-α

IFN-γ – интерферон-γ

HCV – вирус гепатита С

Th1 – Т-лимфоциты – хелперы 1 типа

Th2 – Т-лимфоциты – хелперы 2 типа

TNF – туморнекротизирующий фактор