Примечание:* р < 0,05 по сравнению с контролем; # р < 0,05 по сравнению с группой физиологический раствор; сравнение по непараметрическому критерию Mann-Whitney U Test, n=10.
2.2. Влияние ладастена на индексы массы тимуса и селезёнки самцов мышей С57Bl/6 в экспериментальной модели тревожной депрессии
Результаты исследования влияния ладастена на индексы массы органов иммунной системы экспериментальных животных, подвергнутых ежедневному стрессированию, представлены в табл. 5.
У животных, подвергнутых стрессированию, по сравнению с контрольными особями, на всех изучаемых стадиях развития депрессии наблюдалось значимое уменьшение массы тимуса. На стадии Т3 в 1,9 раза, на стадии Т15 в 3,2 раза, на стадиях Т20 и Т30 в 1,5 раза (p<0,05). Увеличение массы селезёнки в 1,5 и 2,0 раза выявляли на стадии Т15 и Т30, соответственно (p<0,05).
Таблица 5
Влияние ладастена на индексы массы тимуса и селезёнки стрессированных самцов мышей С57Bl/6
Группы n=10 | Масса тимуса мг/10 г мыши | Масса селезёнки, мг/10 г мыши | |
Контроль | 13,8±2,6 | 37,1±6,9 | |
Т3 | физ. р-р. | 7,4±0,9* | 43,6±5,1 |
ладастен 30мг/кг, в/б | 9,2±1,1 | 48,0±6,9 | |
Контроль | 28,3±3,3 | 40,2±2,2 | |
Т15 | физ. р-р. | 8,8±1,5** | 60,7±7,8* |
ладастен 30мг/кг, в/б | 15,2±0,8*# | 43,8±2,2 | |
Контроль | 22,2±1,0 | 41,3±2,3 | |
Т20 | физ. р-р. | 14,8±2,9* | 70,6±18,9 |
ладастен 30мг/кг, в/б | 14,4±2,8* | 39,4±9,5 | |
Контроль | 20,5±0,8 | 31,9±1,4 | |
Т30 | физ. р-р. | 14,8±2,2* | 64,7±10,2** |
ладастен 30мг/кг, в/б | 18,3±2,8 | 52,8±6,2*# |
Примечание: * р < 0,05 по сравнению с контролем; # р < 0,05 по сравнению с группой физиологический раствор, сравнение по t-критерию Стьюдента
При введении ладастена на стадиях Т3 и Т30 индексы массы тимуса восстанавливалось до значений интактного контроля, на стадии Т15 масса тимуса увеличивалась на 48 % (р<0,05) по сравнению со стрессированными мышами (табл.5).
Таким образом, введение ладастена значимо снижало индуцированные стрес-
сом изменения массы тимуса и селезёнки стрессированных животных.
2.3. Влияние ладастена на содержание провоспалительных цитокинов у самцов мышей С57Bl/6 в экспериментальной модели тревожной депрессии
Оценка Th1/Th2 состава цитокинов в сыворотке крови стрессированных животных на стадии Т3 выявила значимое увеличение содержания провоспалительных интерлейкинов: IL-6, 125,8±50,7 пг/мл по сравнению с 15,9±9,6 в контроле, IL-17, 42,4±22,6 пг/мл по сравнению с 2,6±1,4 в контроле и IL-4, 58,4±26,5 пг/мл по сравнению с 9,6±5,5 в контроле, соответственно (рис. 4).
На стадиях Т3, Т15, Т20 и Т30 были выявлены динамические изменения содержания провоспалительного интерлейкина IL-6 (рис. 5). На стадии Т3 определили достоверное увеличение содержания цитокина до уровня 125,8±50,7 пг/мл (p<0,05), на стадии Т15 определяли максимальное увеличение содержания IL-6 739,8±343,7 пг/мл (p<0,01) , на стадии Т20 содержание IL-6 не отличалось от значения контроля и на стадии Т30 наблюдали тенденцию (p=0,06) повышенного содержания IL-6.
Рис.4. Влияние ладастена на уровень провоспалительных интерлейкинов определяемых у стрессированных самцов мышей С57BL/6 при 3-х дневном стрессировании (Т3); * р < 0,05 по сравнению с контрольной группой; сравнение по дисперсионному непараметрическому критерию Краскела-Уоллиса; n=10; 1- контрольная группа, 2-физ. р-р., 3- ладастен 30 мг/кг, |
Не выявлено изменения концентраций других определяемых цитокинов на исследуемых этапах.
У стрессированных животных, которым вводили ладастен на стадии Т3, повышенное содержание провоспалительного IL-6 снижалось до значений контрольной группы, на стадии Т15 повышенный уровень IL-6 достоверно уменьшался в 5 раз по сравнению с группой, получавшей физиологический раствор, на стадиях Т20 и Т30
содержание IL-6 соответствовало значениям контрольной группы (Рис. 5).
Рис. 5. Влияние ладастена на уровень IL-6 в сыворотке крови мышей C57BL/6 в экспериментальной модели тревожной депрессии; * р < 0,05; ** р < 0,01; # р = 0,06 по сравнению контролем; сравнение по дисперсионному непараметрическому критерию Краскела-Уоллиса; n=10; 1- контрольная группа, 2- физ. р-р., 3- ладастен 30 мг/кг, |
2.4. Влияние ладастена на субпопуляционный состав Т-лимфоцитов крови и иммунокомпетентных органов самцов мышей С57Bl/6 в экспериментальной модели тревожной депрессии
При изучении иммунокорригирующего действия ладастена в экспериментальной модели тревожной депрессии было установлено, что хроническое стрессирование мышей в условиях зоосоциального поражения приводит к достоверному снижению процентного содержания основной популяции Т-клеток в тимусе CD4+CD8+, по сравнению с контрольными особями. На стадиях Т15, Т20 и Т30 выявили значимое по сравнению с контролем уменьшение содержания тимоцитов на 5 %, 6 % и 7 %, соответственно. Снижение процентного содержания Т-лимфоцитов на стадиях Т15 и Т20 происходило с сохранением соотношения субпопуляций Т-хелперы/Т-цитотоксические лимфоциты. Анализ соотношения CD4+/СD8+ на стадии Т30 выявил достоверное нарушении баланса субпопуляций, в частности, накопление содержания Т-цитотоксической популяции (Рис.6).
В селезёнке на стадии Т15 выявлена тенденция (р=0,06) к снижению общего процентного содержания Т-клеток (CD3+ фенотип) на 10 %, за счёт снижения в составе Т-хелперной (CD4+) популяции на 16 % (p=0,06). На стадии Т20 определяемое снижение на 20 % носило достоверный характер (p<0,05). На стадии Т30 определили значительное снижение Т-клеток селезёнки на 38 % (p<0,05), за счёт значимого уменьшения обоих субпопуляций лимфоцитов, Т-хелперной на 46 % (p<0,05) и Т-цитотоксической (CD8+) на 21 % (p<0,05), а также сдвиг баланса в сторону цитотоксической популяции (Рис. 6) .
В крови только на стадии Т30 определили достоверное снижение общего процентного содержания Т-лимфоцитов на 18 % (p<0,05), за счёт совместного снижения
(р=0,08) как CD4+ , так и CD 8+ популяций с сохранением их соотношения.
Введение ладастена в дозе 30 мг/кг в течение 5-ти дней экспериментальным животным на каждом из исследуемых этапах (Т15, Т20, Т30) значимо снижало индуцированные стрессом нарушения субпопуляционного состава Т-лимфоцитов тимуса и селезёнки и предупреждало развитие дисбаланса Т-клеточных субпопуляций. В группах животных, получивших ладастен, процентное содержание и фенотипное распределение Т-лимфоцитов соответствовало таковым у контрольных животных.
Контроль
|
Рис.6. Влияние хронического стрессирования самцов мышей С57Bl/6, в условиях зоосоциального поражения, на субпопуляционный состав Т-лимфоцитов тимуса и селезёнки, % (M ± sem)
Примечание: *р < 0,05 по сравнению с контрольной группой по t-критерию Стьюдента
Таким образом, совокупность полученных данных, свидетельствует о вовлечении медиаторов воспалительного процесса в формирование депрессивного состояния и развитии иммунного дисбаланса при депрессии, что подтверждает «цитокиновую теорию депрессии». Введение ладастена экспериментальным животным, нормализовало показатели субпопуляционного состава Т-лимфоцитов и снижало содержание провоспалительных цитокинов, что позволяет констатировать иммунофармакологическую активность ладастена в модели тревожной депрессии у мышей.
3. Оценка иммунокорригирующего действия ладастена в экспериментальной модели тревожной депрессии самок мышей С57BL/6
При изучении иммунокорригирующего действия ладастена в экспериментальной модели тревожной депрессии у самок было выявлено, что длительное содержание самок в условиях психоэмоционального воздействия (ПЭВ, в присутствии дерущихся самцов) не влияло на показатели спонтанной двигательной активности. Тогда как в тестах ПКЛ и ПП определили достоверное изменение показателей, свидетельствующих о выраженном тревожном и депрессивном состоянии особей по сравнению с контрольными самками. Выявлено значительное уменьшение время пребывания в открытых рукавах лабиринта на 73 % по сравнению с контрольной группой и уменьшение латентного времени до проявления первой иммобилизации на 38%.
|
Из за большого объема этот материал размещен на нескольких страницах:
1 2 3 4 5 6 7 |
