Клинико-иммунологическая характеристика детей дошкольного возраста с носительством treptococcus pneumoniae (стр. 2 )

Для оценки силы и направления связи влияния факторов риска, достоверно различающимися в исследуемых выборках, на формирование бактерионосительства S. pneumoniae мы использовали непараметрический коэффициент корреляции Тау Кенделла, который позволяет сравнивать между собой порядковые признаки. В результате, наиболее значимыми факторами, оказывающими влияние на формирование носительства S. pneumoniae у детей 3-7 лет явились хроническая лор-патология в стадии ремиссии (61,2±4,0%, коэффициент корреляции Тау Кенделла 0,452835) и отягощённый аллергологический анамнез (59,1±4,1%, коэффициент корреляции Тау Кенделла 0,412451).

Цитокиновый статус у детей с носительством S. pneumoniae. Анализ цитокинового профиля выявил достоверное (p<0,001) снижение концентрации IL-6 на локальном уровне у детей с отягощённым аллергологическим анамнезом (1 группа) до 1,9±0,2 пг/мл и детей с наличием хронических очагов инфекции со стороны лор-органов (2 группа) до 2,7±0,1 пг/мл по сравнению с группой контроля (4,1±0,2 пг/мл). Однако, у детей 3 группы зафиксирован повышенный уровень саливарного IL-6 (8,5±2,7 пг/мл). В то же время у всех детей с носительством пневмококка наблюдали системную гиперпродукцию IL-6, что составило 8,6±3,1 пг/мл, 6,2±0,1 пг/мл и 9,1±3,5 пг/мл в 1, 2 и 3 группах соответственно, многократно превышающую уровень у здоровых детей (2,7 ±0,04 пг/мл) (рис.1.).

Исследуя уровень рецепторов интерлейкина 6 в секрете ротовой полости, мы обнаружили различное его содержание у обследуемых групп (рис. 2.). Достоверное (p<0,001) снижение RIL-6 было зафиксировано у бактерионосителей S. pneumoniae 1 группы (17 038±30,8 пг/мл), тогда как двукратное повышение RIL-6 отмечалось у детей с хронической лор-патологией (116 302±1524 пг/мл) в сравнении с данными группы контроля (49 032±59,2 пг/мл).

Уровень рецепторов в 3 группе (49 450±1198 пг/мл) не отличался достоверно от значений, зарегистрированных у здоровых детей.

Содержание рецепторов интерлейкина 6 на системном уровне у детей 2 и 3 групп было достоверно (p<0,001) сниженным (6290±57,2 и 5982±279 пг/мл, соответственно), а в 1 группе уровень RIL-6 (7410±28,7 пг/мл) приближался к контрольным значениям (7940±27,2 пг/мл) (р>0,05).

контроль 1 группа 2 группа 3 группа

Рис. 2. Уровень RIL-6 в слюне и сыворотке крови у детей-носителей S. pneumoniae; * достоверность различий с группой контроля (p<0,001);

** достоверность различий с группой контроля (p<0,01).

Содержание рецепторов интерлейкина 6 на системном уровне у детей 2 и 3 групп было достоверно (p<0,001) сниженным (6290±57,2 и 5982±279 пг/мл, соответственно), а в 1 группе уровень RIL-6 (7410±28,7 пг/мл) приближался к контрольным значениям (7940±27,2 пг/мл) (р>0,05).

При оценке влияния цитокинового статуса на механизмы формирования бактерионосительства пневмококка выявлено, что у детей 1 группы формируется устойчивая обратная корреляционная связь между локальным уровнем IL-6 и его рецептора в слюне и наличием у ребёнка аллергологических заболеваний (r=-0,31 и r=-0,38, соответственно). Недостаточная продукция интерлейкина 6 на фоне низкого содержания рецепторов к нему в месте внедрения возбудителя способствует дезадаптации местных защитно-приспособительных механизмов и, как следствие, формированию бактерионосительства.

Отягощённый аллергологический анамнез при пневмококковом носительстве имел средней силы прямую корреляционную связь и с уровнем IL-6 (r=0,41), и его рецептором в сыворотке крови (r=0,35). Высокий уровень исследуемого цитокина у детей 1 группы обусловлен его доказанным патогенетическим влиянием на частоту аллергических реакций ( и др., 2001).

У детей 2 группы определена устойчивая обратная корреляционная связь между уровнем IL-6, его рецептором в слюне и наличием хронических заболеваний лор-органов (r=-0,23 и r=-0,59, соответственно). Однако, в сыворотке крови отмечена достоверная прямая корреляционная зависимость данных показателей от указанного клинического фактора риска (r=0,54 и r=0,13, соответственно). Вероятно, несостоятельность развития адекватного ответа на внедрение патогена на местном уровне способствует развитию системной воспалительной реакции, индуцированной провоспалительными цитокинами, в том числе и IL-6.

Изучение корреляционных связей в 3 группе не выявило существенной зависимости между наличием хронических и аллергических заболеваний у детей и высоким содержанием IL-6 на местном (r=0,24) и системном уровнях (r=0,16), но установило обратную зависимость между изучаемым фактором и содержанием рецепторов (r=-0,41 и r=-0,39 соответственно). Данная направленность цитокинового профиля снижает биологический эффект IL-6, реализующийся через специфический рецептор при связывании цитокина с высокой аффинностью (, 2004).

В результате исследования уровня TNF-α у детей-бактерионосителей S. pneumoniae зарегистрирован ассиметричный характер распределения значений данного цитокина в секрете ротовой полости и сыворотке крови (рис. 3).

В слюне было зафиксировано достоверное (p<0,001) повышение TNF-α у группы с отягощённым аллергологическим анамнезом в 2 раза (74,4±1,7 пг/мл) и детей с наличием хронической лор-патологии в 3 раза (138,2±1,6 пг/мл). У носителей 3 группы уровень TNF-α (33,9±11,2 пг/мл) оставался близким к значениям группы контроля (30,8±0,4 пг/мл).

В сыворотке крови у детей всех обследуемых групп отмечалась однонаправленная динамика концентрации TNF-α в сторону его достоверного (p<0,001) снижения.

контроль 1 группа 2 группа 3 группа

Рис.3. Содержание TNF-α в слюне и сыворотке крови у бактерионосителей S. pneumonia; *- достоверность различий с группой контроля (p<0,001).

Если в группе контроля данный показатель был зарегистрирован на уровне 3,8±0,03 пг/мл, то в 1, 2 и 3 группах значения TNF-α составили 1,0±0,2 пг/мл, 0,7±0,1 пг/мл и 0,7±0,1 пг/мл, соответственно.

Для более полного представления об участии туморнекротизирующего фактора альфа мы исследовали содержание специфических рецепторов р55 (CD120а) и р75 (CD120b), через которые осуществляются TNFα-опосредованные функции на локальном и центральном уровнях.

Достоверное (p<0,001) снижение саливарного количества sTNFR55 мы установили в 1 (168,6±11,3 пг/мл) и 3 (107,8±3,0 пг/мл) группах, нормальное содержание (216,6±10,1 пг/мл) – у детей с хроническими очагами инфекции (p>0,05) (рис. 4.). Выявлено достоверное (p<0,001) снижение уровня sTNFR55 в сыворотке крови у бактерионосителей пневмококка 1 группы (511,2±42,0 пг/мл), 2 группы (471,2±23,0 пг/мл), 3 группы (569,7±9,1 пг/мл) по сравнению с данными группы контроля (647,8±4,9 пг/мл).

Уровень второго рецептора – sTNFR75 был достоверно (p<0,001) повышен в секрете ротовой полости у всех обследуемых детей (в 1 группе - 47,1±1,6 пг/мл, во 2 группе - 113,8±15,9 пг/мл, в 3 - 36,7±2,1 пг/мл) по отношению к группе контроля – 8,9±0,4 пг/мл (рис.5.). В сыворотке крови носителей S. pneumoniae в 1, 2 и 3 группах зафиксировано достоверное (p<0,001) снижение содержания sTNFR75 по сравнению с данными контрольной группы (1729±13,5 пг/мл, 2034±18,1 пг/мл, 1780±11,2 пг/мл и 2904±17,8 пг/мл, соответственно).

Установлена прямая корреляционная связь между TNF-α, STNFR55 в слюне и наличием отягощённого аллергологического анамнеза (r=0,33 и r=0,28, соответственно). В то же время, отсутствовала зависимость между последним анамнестическим фактором и саливарным уровнем STNFR75 (r=-0,16). По данным литературы, локальная гиперпродукция TNFα и других провоспалительных цитокинов является результатом адгезивного контакта мукозальных эпителиоцитов с микроорганизмами (H. Kagami et al., 2000). Сниженная секреция STNFR55 у детей с отягощённым аллергологическим анамнезом ограничивает биологические проявления исследуемого цитокина на местном уровне.

Обратная корреляционная связь зафиксирована между сывороточным уровнем TNF-α, STNFR55, STNFR75 и наличием отягощённого аллергического фона у бактерионосителей пневмококка (r=-0,58, r=-0,35, r=-0,14, соответственно).

Рис.4. Уровень sTNFR55 в слюне Рис.5. Уровень sTNFR75 в слюне и и сыворотке крови у носителей сыворотке крови у носителей

S.pneumoniae; *-достоверность S.pneumoniae; *-достоверность

различий с группой контроля различий с группой контроля

(p<0,001). (p<0,001).

Снижение секреции иммунокомпетентными клетками цитокинов и рецепторных комплексов в условиях антигенной стимуляции, а именно персистенции пневмококка в носоглотке на фоне аллергопатологии свидетельствует о дисфункции иммунной системы детского организма.

У бактерионосителей S. pneumoniae с хронической лор-патологией на местном уровне установлена прямая корреляционная связь средней силы между TNF-α, STNFR55 и соответствующим анамнестическим фактором (r=0,36 и r=0,57), что указывает на наличие воспалительной реакции в месте входных ворот инфекции на фоне хорошо выраженных регионарных адаптационных иммунных механизмов.

Однако, сывороточная концентрация TNF-α и его рецепторов и выявленная прямая взаимосвязь между ними и наличием хронических заболеваний лор-органов (r=0,41, r=0,45, r=0,34) свидетельствует о подавлении клеточного звена иммунитета, видимо, «истощённых» за счёт длительно существующего воспалительного процесса на фоне носительства S. pneumoniae в носоглотке.

В 3 группе установлена отрицательная корреляционная связь средней силы между саливарным уровнем TNF-α, STNFR55 и наличием сочетанной патологии - отягощённого аллергологического анамнеза и хронических очагов инфекции со стороны лор-органов. В сыворотке крови устойчивой зависимости между TNF-α и его рецепторами не выявлено.

Полученная разнородность показателей цитокинов может отражать различное функциональное состояние Т-лимфоцитов у бактерионосителей пневмококка. С одной стороны, на воспалительный процесс срабатывают компенсаторные механизмы иммунной защиты, но с другой стороны, отмечается тенденция к истощению адаптационных возможностей иммунокомпетентных клеток и в секрете ротовой полости, и в сыворотке крови у детей с носительством S. pneumoniae.

Специфический иммунитет у бактерионосителей S. pneumoniae. У бактерионосителей пневмококка 1 группы зарегистрировано достоверное (р<0,001) снижение IgM-АТ к ПС серотипов Т-3, 6-В и 9-N и к ПС, входящих в состав вакцины «Пневмо 23» по сравнению с данными контрольной группы (табл. 2).

Таблица 2

Уровни IgM-АТ (в ед. ОП) к ПС, входящим в состав вакцины «Пневмо 23», и к ПС различных серотипов пневмококка у бактерионосителей S.pneumonia (M±m)

Смесь ПС различных серотипов S.pneumoniae	Уровень IgM-АТ
1 группа (n=17)	2 группа (n=18)	3 группа (n=15)	Контрольная группа (n=20)
Т-3	0,40±0,05*	0,48±0,02	0,46 ±0,01	0,49±0,02
6-В	0,40±0,04*	0,49±0,02	0,47±0,01**	0,53±0,02
9-N	0,37±,02*	0,49±0,02*	0,41±0,02*	0,70±0,02
23-F	0,42±0,03	0,46±0,01	0,48±0,02	0,47±0,01
Cмесь ПС, входящих в состав вакцины «Пневмо 23»	0,47±0,03*	0,59±0,08*	0,48±0,01*	0,70±0,04

Примечание. Достоверность различий с группой контроля: * - р<0,001;

** - p<0,01.

В группе детей с хроническими заболеваниями лор-органов отмечен достоверно (р<0,001) низкий уровень IgM-АТ только к ПС серотипа 9-N и к ПС, входящих в состав вакцин.

У детей 3 группы содержание IgM-АТ было достоверно снижено к ПС серотипа 6-В (p<0,01), серотипа 9-N (p<0,001) и к ПС, входящих в состав вакцины «Пневмо 23» (p<0,001) по сравнению с группой контроля.