Диагностика туберкулеза в современной централизованной микобактериологической лаборатории г. Москвы (стр. 2 )

* – определение ЛЧ к 4 препаратам 1-го ряда и пиразинамиду + 2 контроля =7 пробирок (расчет скорректирован в 2008 г, до этого чувствительность к пиразинамиду не определяли)

**- статистическая форма ф.33

C = AxB

E = Dx7

F = С+E

Расчет произведен для групп пациентов, которым требуется исследование на жидких питательных средах:

– пациентов с клиническими и рентгенологическими признаками поражения органов дыхания, требующими дифференциальной диагностики;

– больных, взятых на диспансерный учет с впервые установленным диагнозом туберкулеза легких;

– лиц из контингентов, состоящих на учете по туберкулезу, с остаточными посттуберкулезными изменениями и клиническими признаками рецидива заболевания.

Установлено, что расчетная потребность в культуральном исследовании диагностического материала в автоматизированной системе (АС) в год для населения ВАО (1,4 млн. чел.) – 2035. Учитывая количество бактериовыделителей и число лекарственных препаратов, к которым возможно определение ЛЧ в одном приборе АС, необходимое количество исследований на ЛЧ в системе для населения ВАО составило 1113. Таким образом, суммарно необходимо ежегодное проведение 3148 (в среднем ) микробиологических исследований.

По данным фирмы – производителя, мощность одного прибора АС– 8000 исследований в год, что соответствует данным, полученным в МНПЦБТ.

В 2005 году общее количество выполненных исследований для наиболее эпидемически опасной группы больных с бактериовыдением в ПТД ВАО, составило 3030 посевов и 1030 исследований ЛЧ. (таблица 2).

Таблица 2.

Микобактериологические исследования, выполненные в ЦБЛ

на жидких питательных средах для ВАО за гг.

Категории пациентов	ГОДЫ И ПОКАЗАТЕЛИ
2005г.	2006г.	2007г.
кол-во пациентов	кол-во проб	кол-во бактериовыделителей	кол-во ис-следо-ваний ЛЧ	кол-во пациентов	кол-во проб	кол-во бактерио-выделителей	кол-во ис-следо-ваний ЛЧ	кол-во пациентов	кол-во проб	кол-во бак-териовыделителей	кол-во ис-следований ЛЧ
1	2	3	4	5	6	7	8	9	10	11	12	13
подозрение на туберкулез	998	1513	95	350	698	1051	83	370	627	946	75	420
впервые выявленные больные	339	655	92	405	331	648	73	475	370	781	114	515
подозрение на рецидив	277	441	66	215	178	308	40	190	223	378	72	240
контроль лечения	291	421	40	60	126	272	45	135	223	385	52	265
ВСЕГО	1905	3030	293	1030	1333	2279	241	1170	1443	2490	313	1440

На 2 этапе в диагностическое обследование с использованием автоматизированных систем включены еще 5 диспансеров, обслуживающих 3406202 человек: ПТД № 5 ЮАО (989884 чел.), ПТД №чел.) и № 20 ЗАО (530407 чел.), ПТД № 16 САО (541118 чел.), а затем ПТД № 13 СЗАО (796900 чел.). В итоге общая численность населения, охваченного ранней диагностикой с применением АС, составила 4786702 человека. Численность всего обслуживаемого ЦБЛ населения, в том числе, с применением классических методов исследования, составила 7687056 человек, т. е. 73,1% всего населения г. Москвы.

Следовательно, применение расчета потребности, использование современного высокоэффективного оборудования, стандартизованных методов диагностики и научно-обоснованной схемы обследования позволило увеличить общее число посевов за период с 2005 по 2009 гг. в 1,3 раза, а на жидких средах в автоматизированных системах – в 1,8 раза.

2. Выделение и идентификация видов микобактерий

2.1. Сравнительное изучение эффективности культуральных методов выделения микобактерий. Для определения оптимального комплекса методов наиболее эффективного выделения МБ из клинического материала проведено исследование с использованием 3-х применяющихся для этих целей в микобактериологической практике питательных сред – плотной яичной Л-Й, модифицированной жидкой Миддлбрука 7Н9 (М7Н9) в автоматизированной системе и агаровой Миддлбрука 7Н11 (М7Н11), имеющих различное соотношение питательных компонентов.

Часть клинического материала (6542 пробы), поступившего на исследование в ЦБЛ, была посеяна одновременно на 3 питательные среды.

Анализ частоты выделения разных видов микобактерий из диагностического материала показал, что наибольшее число культур микобактерий (как МБТ, так и НТМБ) получено в среде М7Н9 (таблица 3).

Таблица 3.

Эффективность выделения микобактерий на разных питательных средах

(абс., %)

Вид микобактерий	Среда
Левенштейна-Йнсена (1)	Миддлбрука 7Н11 (2)	Миддлбрука 7Н9 (3)	р
МБТ (n=436)	,2)	,8)	,1)	1-2>0,05 1-3<0,05 2-3<0,05
НТМБ (n=296)	,5)	,9)	,4)	1-2>0,05 1-3<0,05 2-3<0,05
ВСЕГО (n=732)	,1)	,7)	,0)	1-2>0,05 1-3<0,05 2-3<0,05

При этом обнаружение роста микобактерий в среде М7Н9 происходило на 10-20 дней раньше, чем на плотных средах за счет оптимального соотношения питательных компонентов (таблица 4).

Таблица 4.

Сроки выделения микобактерий на разных питательных средах

Вид микобактерий	Левенштейна-Йнсена (1)	Миддлбрука 7Н11 (2)	Миддлбрука 7Н9 (3)	Различия в длительности культивирования (коэффициент)	Достоверность различий (р)
МБТ (n=436)	45,6+31,0	29,0+4,1	12,9 +8,1	(1)-(2) – 1,6 (1)-(3) – 3,5 (2)-(3) – 2,2	p1-2>0,05 p 1-3<0,01 p 2-3<0,05
Медленнорастущие НТМБ (n=221)	37,4+4,7	28,9+5,2	12,7+9,3	(1)-(2) – 1,3 (1)-(3) – 3,0 (2)-(3) – 2,3	P1-2>0,05 P1-3<0,01 P2-3<0,01
Быстрорастущие НТМБ (n=75)	31,5+8,1	22,6+9,2	14,4+12,9	(1)-(2) – 1,4 (1)-(3) – 2,2 (2)-(3) – 1,6	P1-2>0,05 p1-3<0,01 P2-3<0,01
ВСЕ микобактерии (n=732)	41,7+14,6	28,3+6,2	13,0+10,1	(1)-(2) – 1,4 (1)-(3) – 2,9 (2)-(3) – 2,0	P1-2>0,05 P1-3<0,01 P2-3<0,05

Несмотря на то, что АС, по сравнению с плотными питательными средами, обладает большей эффективностью при выделении МБ, часть культур выросла только на плотных питательных средах, что подтверждает основное требование применения в микобактериологической практике различных по составу питательных сред для обеспечения оптимального выделения возбудителя из клинического материала.