Диагностика туберкулеза в современной централизованной микобактериологической лаборатории г. Москвы (стр. 4 )

Это свидетельствует о необходимости ведения постоянного мониторинга лекарственной устойчивости выделенных культур микобактерий среди впервые выявленных больных на территории г. Москвы и учета его данных при определении схемы лечения туберкулеза и микобактериозов.

В результате проведенных исследований разработан алгоритм раннего выделения возбудителя туберкулеза и микобактериозов (рис. 1).

Рис. 1. Алгоритм выделения, идентификации и определения лекарственной чувствительности микобактерий.

Алгоритм определяет последовательность применения и сочетание классических культуральных и современных ускоренных методов исследования. При его разработке учтено международное стандартное требование необходимости культивирования биологического материала на двух питательных средах (жидкой в АС и плотной Л-Й), а также применение ускоренного параллельного исследования с помощью тест-системы «ТБ-БИОЧИП». Алгоритмом предусмотрено обязательное определение ЛЧ к основным ПТП в АС всех выделенных культур МБ, к резервным препаратам на среде Л-Й, а микрочип «ТБ-БИОЧИП-2» позволяет обнаружить мутации в генах, ответственных за чувствительность к фторхинолонам. Идентификация штаммов проводится молекулярно-генетическими ВЭЖХ и/или БИОЧИПа «IMS», культуральным и биохимическими методами.

ВЫВОДЫ

1. Расчетная потребность в микобактериологических исследованиях в административной территории г. Москвы составляет 1634 исследования для впервые выявленных больных, 1190 для диагностических и 324 для пациентов с рецидивом заболевания, что позволяет планировать организационные мероприятия.

2. При применении разработанного алгоритма выделения, идентификации и определения ЛЧ микобактерий общее количество диагностических культуральных исследований увеличивается в 1,3 раза, а на жидких средах при автоматизированной обработке – в 1,8 раза. При этом повышается эффективность диагностических мероприятий, сокращаются сроки пребывания больных в стационаре в среднем на 47 дней.

3. Показано, что использованные для видовой идентификации выделенных из биологического материала культур микобактерий методы – микробиологические, ВЭЖХ и молекулярно-генетические (ТБ-БИОЧИП и БИОЧИП «IMS»), дают сопоставимые результаты, при этом ВЭЖХ и БИОЧИПы характеризуются большей скоростью их получения (в течение 48 часов).

4. Установлено, что применение автоматизированной системы для культивирования биологического материала и определения чувствительности к лекарственным препаратам выделенного возбудителя дает возможность получить наибольшее число штаммов микобактерий. При этом сокращается время получения результатов в 3,2 раза, чем при использовании плотных сред.

5. Частота выделения из диагностического материала впервые выявленных больных туберкулезом возбудителя с множественной лекарственной устойчивостью - 7,7%, с широкой –1,9%. Сроки обнаружения составляют 48 часов молекулярно-генетическими и 21 день бактериологическими методами.

6. Централизация микобактериологических исследований в условиях г. Москвы позволяет оптимизировать диагностику туберкулеза и микобактериозов за счет увеличения количества исследований, повышения их качества, создания единой базы данных, мониторинга лекарственной устойчивости, рационального использования оборудования и расходных материалов.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

Для проведения микобактериологических исследований населения мегаполиса с целью раннего выявления наиболее опасной категории пациентов - бактериовыделителей рекомендуется использовать разработанный в ЦБЛ алгоритм выделения, идентификации и определения лекарственной чувствительности микобактерий.

Для оптимального выявления источников туберкулезной инфекции и определения ЛЧ возбудителя, а также эффективного использования мощности современного высокотехнологичного оборудования в городах - мегаполисах с населением более 1 человек целесообразно создание централизованных микобактериологических лабораторий.

Исследования патологического материала, полученного от больных туберкулезом и лиц с подозрением на это заболевание или развитие рецидива, следует проводить в автоматизированных бактериологических анализаторах для культивирования в жидкой питательной среде в сочетании с плотной питательной средой.

С целью возможно раннего назначения адекватной химиотерапии больным лекарственную чувствительность выделенных культур МБ к основным ПТП также необходимо определять в жидких питательных средах (в автоматизированных системах). Для получения достоверных данных о МЛУ и ШЛУ возбудителя еще в более короткие сроки (48 часов) следует проводить комплексное бактериологическое и молекулярно-генетическое (тест-системы «ТБ БИОЧИП» и «ТБ БИОЧИП-2») исследование. Идентификацию вида выделенных культур НТМБ, учитывая короткие сроки, наиболее целесообразно проводить молекулярно-генетическими методами ВЭЖХ и/или БИОЧИПа «IMS».

Для определения объема бактериологических исследований на жидких средах рекомендуется использовать разработанный способ расчета потребности в микобактериологических исследованиях в административной территории.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Дорожкова технология для скрининга туберкулеза легких/ Дорожкова Г. Е., , //Российский медицинский журнал№ 2 - с.

2. Дорожкова микобактериологическая лаборатория – оптимальная модель современной, эффективной и экономически оправданной микробиологической службы противотуберкулезных учреждений в крупных городах России (на примере города Москвы) / , , // в сб. Научных трудов к 80-летию ведущего противотуберкулезного учреждения г. Москвы, М.- 2007.- с.

3. Дорожкова микробиологический скрининг туберкулеза легких с помощью автоматической системы BACTECTMMGITTM 960 / , , , , // в материалах VIII Всероссийского съезда фтизиатров «Туберкулез в России», М.- 2007.- с.

4. Дорожкова микобактериологическая лаборатория – необходимая структура фтизиатрической службы в мегаполисе/ , , // в материалах VI Московской Ассамблеи «Здоровье столицы», М.- 2007.- с. 135.

5. Дорожкова микобактериологическая лабортория – необходимый компонент фтизиатрической службы крупных городов России / , , // Проблемы туберкулеза и болезней легких№ 10. - с.

6. Централизованная микобактериологическая лаборатория - оптимальная модель современной противотуберкулезной микробиологической службы в крупных городах России (на примере г. Москвы)/ , , / в материалах VIII Российского съезда фтизиатров «Туберкулез в России», М.- 2007.- с.

7. Макарова микобактерий на разных питательных средах и их идентификация / , , Е // Журн. микробиол№ 3. - с.

8. Макарова чувствительности нетуберкулезных микобактерий, выделенных на плотных и жидких питательных средах, к противотуберкулезным препаратам / , // Туберкулез и болезни легких№ 8 .- с.

9. Макарова обнаружения разных видов микобактерий в Москве / , , // Туберкулез и болезни легких№ 9. - с.

10. Макарова и идентификация нетуберкулезных микобактерий микробиологическими методами // , , , //Методические рекомендации.- М.- 200с.

11. Централизация микобактериологических исследований – важнейшая задача оптимизации противотуберкулезной службы в мегаполисе (опыт работы)/ , , // в материалах II научно-практической конференции «Современные технологии и методы диагностики различных заболеваний, лабораторный анализ», М.- 2009.- с

12. Е. Централизованная микобактериологическая лаборатория: оптимизация лабораторной диагностики туберкулеза в мегаполисе / , //Справочник заведующего КДЛ.- 2009. - № 11.- с

13. Централизация микобактериологической службы – необходимый этап совершенствования этиологической диагностики туберкулеза/ , , // в материалах VIII Московской Ассамблеи «Здоровье столицы», М.- 2009.- с.

14. Выбор культуральных методов выделения возбудителя и определения лекарственной чувствительности микобактерий туберкулеза // в материалах VIII Московской Ассамблеи «Здоровье столицы», М.- 2009.- с.

15. Дорожкова развития микробиологической экспресс-диагностики туберкулеза в Москве с помощью автоматизированных систем BACTECTMMGITTM 960 / , , , , // в сб. Научных трудов МНПЦБТ и НИИ туберкулеза РАМН к 85-летию , М.- 2010.- с.

16. Централизация микобактериологических исследований – важнейшая задача оптимизации противотуберкулезной службы в мегаполисе / , //в сб. Научные труды МНПЦБТ и НИИ туберкулеза РАМН к 85-летию , М.- 2010.- с.

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

АС автоматизированная система

ВОЗ	Всемирная организация здравоохранения
ВЭЖХ	высокоэффективная жидкостная хроматография
КДЛ	клинико-диагностическая лаборатория
КУМ	кислотоустойчивые микобактерии
Л-Й	Левенштейна-Йенсена среда
ЛУ	лекарственная устойчивость
ЛЧ	лекарственная чувствительность
МБ	микобактерия
МБЛ	микробиологическая лаборатория
МБТ	микобактерия туберкулеза
МГМ	Молекулярно-генетические методы
МЛУ	множественная лекарственная устойчивость
МНПЦ БТ	Московский научно-практический центр борьбы с туберкулезом Департамента здравоохранения города Москвы
НТМБ	нетуберкулезные микобактерии
ОЛС	общая лечебная сеть
ПЗ	показатель заболеваемости
ПТД	противотуберкулезный диспансер
ПТП	противотуберкулезные препараты
ФКТ	фиброзно-кавернозный туберкулез
ХТ	химиотерапия
ЦБЛ	Централизованная бактериологическая лаборатория
ШЛУ	широкая лекарственная устойчивость