Клональное микроразмножение и депонирование перспективных форм груши (стр. 2 )

Таблица 2 - Длина побегов, сформированных эксплантами груши различных сортов и форм в зависимости от минерального состава питательных сред (мм).

Сорт, форма	Питательная среда
Гамборга	Пиерика	Ли и де Фоссарда	Мак Коуна	Мурасиге-Скуга (контроль)
Тютчевская	7,1±4,8	3,4±0,7	6,6±3,6	2,4±0,6	5,9±2,8
НСР05=3,3 для сорта Тютчевская между средами
Орловская летняя	2,0±0,5	2,5±0,7	2,4±0,9	3,7±2,3	5,9±0,2
Лада	10,5±5,6	4,9±2,3	12,3±6,5	4,4±1,4	4,4±1,8
НСР05=5,3 для сорта Лада между средами
Аннушка	4,4±1,3	3,8±0,8	5,6±2,7	2,1±0,5	5,5±2,8
40-4	3,6±2,8	3,6±,16	4,3±1,7	1,2±0,1	6,5±1,1
Груша березолистная	6,7±3,2	5,5±1,3	6,7±5,5	3,0±0,4	4,8±2,3
Груша 4	13,4±10,3	8,5±3,4	12,5±3,4	8,0±6,4	15,5±1,7
	6,4±2,3	5,7±2,1	8,9±4,3	-*	4,9±4,2
НСР05=3,05 для гибрида .

Для других сортов и форм НСР05 не вычисляли, т. к. Fф<F05

На среде МС рост побегов в длину был отмечен у сортов Орловская летняя, Аннушка, у гибрида 40-4 и груши 4.

По количеству листьев на побег лучшие результаты показали среды Гамборга, Ли и де Фоссарда и МС.

Таким образом, для большинства сортов и форм груши среды МС и Ли и де Фоссарда оказались оптимальными. На питательной среде МС были получены лучшие результаты по таким показателям, как коэффициент размножения и длина побегов у большинства форм груши. Эта среда была пригодна для культивирования побегов без частых пересадок. Среды Пиерика и Ли и де Фоссарда пригодна для культивирования форм груши с низким коэффициентом размножения (сорт Лада и гибрид 40-4, груша 4).

6 Влияние регуляторов роста на характер развития
эксплантов груши

6.1 Влияние различных концентраций 6-бензиламинопурина (БАП) на развитие эксплантов груши

У микропобегов сорта Тютчевская наибольшая способность к пролиферации проявилась при введении БАП в концентрации 2 мг/л и где коэффициент размножения составил 7,8. Низкий коэффициент размножения наблюдали при содержании цитокинина в концентрации 0,5 мг/л (не более 3,0). Концентрация БАП 2 мг/л способствовала росту побегов в длину. При низком содержании БАП (0,5 мг/л) образовывались мелкие, хлоротичные побеги. У побегов, выросших на средах с высокой концентрацией БАП (3 мг/л), часто наблюдали фасциации. Количество листьев аппарата колебалось от 9,0 до 11,9 штук на побег.

Концентрация БАП 0,5 мг/л у эксплантов сорта Аннушка вызывала слабую пролиферацию и активный рост каллуса, 1 мг/л стимулировала рост побегов в длину (до 6,5 мм).

Введение в состав питательной среды 2 мг/л БАП обеспечивало максимальный коэффициент размножения у сорта Орловская летняя – 3,7, а также рост побегов в длину (до 5,9 мм). При концентрации регулятора роста 0,5; 1 и 3 мг/л хорошо развивался листовой аппарат.

У груши березолистной на средах Мурасиге-Скуга и Ли и де Фоссарда максимальный коэффициент размножения (5,3 и 5,1 соответственно) получили в присутствии в среде 2,0 мг/л БАП. Лучший рост побегов в длину отмечали при введении БАП 0,5 мг/л в состав среды Ли и де Фоссарда. Длина побегов в среднем составил 9,8мм со средним количеством листьев – 15,5 шт. на микропобег.

У сорта Лада наибольший коэффициент размножения обеспечивала концентрация БАП 2 мг/л – 3,2. Лучший рост побегов в длину вызывало введение в среду БАП в количестве 1 и 2 мг/л (13,1 мм). При использовании концентрации 3 мг/л длина несколько снижалась до 12,8 мм. Хорошее развитие листьев наблюдали при всех концентрациях БАП. Количество листьев на побегах колебалось в среднем от 9,1 до 13,1 штук.

У гибрида 40-4 концентрация БАП 2 мг/л отличалась образованием наибольшего количества адвентивных побегов. Использование этой концентрации способствовало росту побегов в длину. Количество листьев было практически одинаковым при всех используемых концентрациях и колебалось от 8,1 до 11,1 штук.

Таким образом, в результате экспериментов показано, что для массового размножения груши в культуре in vitro целесообразно использовать концентрацию БАП - 2 мг/л. Концентрация БАП 2 мг/л способствовала не только повышению степени пролиферации, но и росту побегов в длину (сорт Тютчевская, Орловская летняя, гибрид 40-4). Концентрация 6-БАП 1 мг/л также вызывала вытягивание побегов (сорта Аннушка, Лада).

6.2 Влияние сочетания 6-БАП и ИМК на развитие
и микроразмножение эксплантов груши

У сорта Тютчевская при введении в состав среды Мурасиге-Скуга сочетания БАП 3,0 мг/л и ИМК 0,05 мг/л наибольший коэффициент размножения составил 5,0. Сочетание БАП 0,5 мг/л и ИМК 0,2 мг/л позволило несколько повысить длину побегов в среднем до 6,3 мм (таб. 3).

Таблица 3 - Развитие эксплантов груши сорта Тютчевская на средах с

различным сочетанием концентраций БАП и ИМК на питательной среде МС

Сочетание регуляторов роста (мг/л)	Показатели развития
Коэффициент размножения	Длина побега, мм	Число листьев, шт.
БАП 2	7,8±1,9	5,9±2,7	10,0±1,8
БАП 0,5+ИМК 0,05	2,9±0,4	3,3±2,1	8,3±6,1
БАП 0,5 + ИМК 0,2	3,3±0,3	6,3±3,2	10,0±5,3
БАП 1,0+ИМК 0,05	3,5±0,5	3,3±1,4	10,5±4,7
БАП 1,0+ИМК 0,2	3,7±0,5	4,0±2,3	9,8±3,3
БАП 2,0+ИМК 0,05	2,4±0,3	5,4±0,6	13,4±9,0
БАП 2,0+ИМК 0,2	3,6±0,4	5,2±0,5	10,7±5,2
БАП 3,0+ИМК 0,05	5,0±0,7	5,1±2,9	12,1±3,5
БАП 3,0+ИМК 0,2	4,4±0,5	3,4±0,9	11,1±1,8
НСР0,5	1,3	1,9	3,8

В присутствии в питательной среде БАП 2 мг/л и ИМК 0,05 мг/л в первых пассажах наблюдали слабое вытягивание побегов в длину. В четвертом и пятом пассажах у сорта Тютчевская встречались побеги длиной до 36 мм. Видимо, для того, чтобы получить побеги пригодные для укоренения на питательной среде с БАП и ИМК, необходимо проводить не менее четырех субкультивирований.

У сорта Аннушка при всех вариантах концентраций БАП и ИМК коэффициент размножения был значительно ниже, чем в контрольном варианте. Однако добавление в среду БАП 1,0 мг/л и ИМК 0,2 мг/л способствовало росту побегов в длину, которая достигала в среднем 7,5 мм (табл. 4).

Таблица 4 - Развитие эксплантов груши сорта Аннушка на средах с
различным сочетанием концентраций БАП и ИМК на питательной среде МС

Сочетание регуляторов роста (мг/л)	Показатели развития
Коэффициент размножения	Длина побега, мм	Число листьев, шт.
БАП 2 мг/л	4,8±1,2	5,5±2,9	8,8±2,2
БАП 0,5+ИМК 0,05	1,6±0,1	4,8±1,5	8,0±1,8
БАП 0,5+ИМК 0,2	2,0±0,4	5,7±0,8	5,4±0,8
БАП 1,0+ИМК 0,05	2,2±0,3	4,8±1,5	8,9±6,9
БАП 1,0+ИМК 0,2	2,7±0,3	7,5±1,0	9,3±3,9
БАП 2,0+ИМК 0,05	2,2±0,3	4,0±0,4	9,0±5,9
БАП 2,0+ИМК 0,2	2,8±0,3	3,1±1,4	6,2±3,6
БАП 3,0+ИМК 0,2	2,5±0,3	4,2±2,8	10,6±2,2
БАП 3,0+ИМК 0,05	2,1±0,2	3,5±1,5	8,4±2,3
НСР0,5	1,0	3,6	3,8

Хороший рост побегов наблюдали только в первых пассажах (до 14 мм). Растения были крепкие с темно-зелеными листьями. При последующих пассажах длина побегов снижалась до 4 мм.