Клональное микроразмножение и депонирование перспективных форм груши (стр. 5 )

Варианты	Показатели
Коэффициент размножения	Длина побега, мм	Число листьев, шт.
10 мг/л БАП 5 месяцев хранения	4,0±0,2	4,2±1,1	11,6±4,0
10 мг/л БАП 14 месяцев хранения	7,3±3,2	20,0±7,8	17,8±5,2

Восстановление развития побегов груши после хранения у этой формы было чрезвычайно медленно.

Срок хранения побегов сорта Лада на среде МС, содержащей 5 мг/л БАП - 6 месяцев. Пролиферации не наблюдали. Для дальнейшего развития их пересаживали на среду Ли и де Фоссарда с добавлением 2 мг/л БАП. Растения успешно развивались, давая адвентивные побеги. Коэффициент размножения составил 2,7.

Таким образом, в результате исследований показано, что хранение микрорастений груши при пониженной положительной температуре возможно. Растения в большинстве своем остаются жизнеспособными и могут быть использованы для дальнейшего микроразмножения. Необходимым условием остается индивидуальный подбор условий хранения, т. к. каждый генотип по-разному реагировал на состав питательной среды. Для депонирования лучше использовать среды с повышенным содержанием цитокинина и с разбавленной минеральной основой. При создании коллекций груши можно чередовать депонирование в холодильных камерах и культивирование в условиях светокомнаты.

10 Экономическая эффективность

Расчёт экономической эффективности производства посадочного материала груши проводили путем сравнения двух методов: обычная схема in vitro, включающая в себя все этапы клонального микроразмножения и метод микропрививки, где экспланты груши прошли всего два этапа - введения и микроразмножения, а затем микропобеги были привиты на семенные подвои, выращенные в нестерильных условиях.

В первом случае выход полноценных растений груши зависел от коэффициента размножения, % укоренившихся и адаптированных растений.

Во втором случае выход растений зависел от коэффициента размножения и от успешного срастания привоя и подвоя.

Метод микропрививки является более трудоемким, но требует меньше материальных затрат, обеспечивает окупаемость через 1 год и 3 месяца (табл. 13). В результате использования микропрививки значительно увеличивается прибыль (в 4,2 раза).

Как показали расчёты, технология выращивания посадочного материала груши с помощью метода микропрививки более выгодна, так как рентабельность производства повысилась на 51,9%.

Таблица 13 - Расчет экономической эффективности получения посадочного материала груши при использовании двух методов из расчета на 1000 штук

Статьи затрат	Растения, полученные по стандартной методике in vitro	Растения, полученные с помощью микропрививки
Реактивы	1302	1026
Зарплата	25620	33420
Начисления на зарплату 35,3%	9043	11797
Электроэнергия	10000	8000
Отопление	5700	5700
Ящики	360	360
Пленка полиэтиленовая	800	800
Стаканы, 200 мл.	1300	1300
Вода	10	10
Подвой, привой	-	14700
Амортизация и ремонт основных средств	4200	4200
Накладные расходы 10%	5833	6661
Итого затрат	641668	87974
Выход растительного материала (шт.)	473	917
Себестоимость 1 растения (руб.)	135,66	95,94
Цена реализации (руб.)	135,66	95,94
Сумма выручки (руб.)	80410	155890
Прибыль (руб.)	16242	67916
Рентабельность (%)	25,3	77,2
Окупаемость	4 года	1,3 года

ВЫВОДЫ

1. В результате проведенных исследований показана принципиальная возможность клонального микроразмножения груши перспективных сортов, гибридов, подвоев и дикого вида груши березолистная.

2. В процессе клонального микроразмножения груши продемонстрировано превалирующее влияние особенностей генотипа для каждого этапа клонального микроразмножения (введение, пролиферация, укоренение).

3. Применение в качестве стерилизующего агента смеси перекиси водорода (30%) и 96% этанола с последующей обработкой 0,1%-м раствором сулемы, а также 0,1% раствора мертиолата практически полностью исключает контаминацию, не вызывая некроза тканей.

4. На этапе введения в стерильную культуру для большинства испытанных форм груши наиболее эффективными оказались среды Мурасиге-Скуга и Пиерика.

5. Питательные среды Мурасиге-Скуга и Ли и де Фоссарда на этапе микроразмножения обеспечивают максимальную степень пролиферации и наилучший рост микрорастений большинства формы груши.

6. Для повышения коэффициента размножения неоходимо использовать концентрацию БАП 2 мг/л (для сортов Тютчевская, Орловская летняя, Аннушка, гибрида 40-4, груши березолистная) и 3 мг/л (для сорта Лада). Концентрация БАП 1 мг/л способствует росту побегов в длину. Поэтому данное количество цитокинина можно использовать на этапе элонгации.

7. Присутствие в питательной среде на этапе элонгации сочетаний регуляторов роста: 1,0 мг/л БАП + 0,2 мг/л ИМК, 0,5 мг/л БАП + 2,0 мг/л ГК, 3,0 мг/л БАП + 0,5 мг/л ГК +0,1мг/л ИМК, 1,0 мг/л БАП + 2,0 мг/л ГК + 0,2 мг/л ИМК усиливает рост побегов в длину.

8. Укореняемость побегов испытанных форм груши варьирует в зависимости от генотипа, состава питательной среды, типа индуктора ризогенеза и способа его аппликации:

- наибольшей укореняемостью побегов характеризуются сорта Тютчевская и Лада, Орловская летняя, подвой груша 4;

- оптимальной для этапа укоренения является питательная среда МС, разбавленная в два раза по минеральному составу;

- введение в среду НУК (1 мг/л) и сочетания ауксинов 0,5 мг/л НУК+0,5 мг/л ИУК, 0,5 мг/л ИМК+0,5 мг/л ИУК, а также обработка ИМК-содержащей пудрой и кратковременное замачивание в спиртовом растворе ИМК (50 мг/л) способствует повышению частоты укоренения.

9. Использование иммуностимулирующих веществ (Эль-1 и Экост 1/3) способствует повышению приживаемости микрорастений груши в нестерильных условиях до 69,2% по сравнению с контролем.

10. Применение метода микропрививки побегов груши in vitro на семенные подвои значительно повышает выход растений трудноукореняющихся и неукореняющихся в процессе клонального микроразмножения форм груши, тем самым повышая эффективность данного процесса.

11. Микропобеги груши березолистная характеризуются наибольшим сроком хранения при пониженных положительных температурах – 14 месяцев при замене сахарозы на манит в концентрации 5 г/л и 16 месяцев на среде МС, разбавленной в 4 раза по минеральному составу.

12. После хранения растения большинства испытанных форм остаются жизнеспособными и в условиях in vitro возобновляют рост и пролиферацию побегов.

РЕКОМЕНДАЦИИ ДЛЯ ПРОИЗВОДСТВА

1. Разработанные приемы клонального микроразмножения сортов и форм груши могут быть применены для производства посадочного материала этой культуры.

Для введения в культуру in vitro и размножения эксплантов груши рекомендуется использовать среды Мурасиге-Скуга, Ли и де Фоссарда и Пиерика. Где для усиления пролиферации побегов груши необходимо использовать БАП в концентрации 2,0 мг/л и 3,0 мг/л. А для получения побегов груши пригодных для укоренения использовать концентрации БАП 1,0 мг/л и 2,0 мг/л, а так же сочетания регуляторов роста БАП 1,0 мг/л + ГК 0,5 мг/л и БАП 1,0 мг/л + ГК 2,0мг/л + ИМК 0,2 мг/л.

2. В качестве индукторов корнеобразования рекомендуется использовать введение в состав среды МС с разбавленной в два раза минеральной основой НУК (1, 0 мг/л) и ИМК (1, 0 мг/л) и замачивание микропобегов груши в спиртовом растворе ИМК (50 мг/л) в течение 10 сек.

При адаптации груши рекомендуется обрабатывать субстрат препаратом Эль-1. Для увеличения выхода посадочного материала неукореняющихся или плохоукореняющихся в процессе клонального микроразмножения сортов и форм применять метод микропрививки на семенной подвой с обработкой срезов последних раствором аскорбиновой кислоты (50 мг/л).

3. Для длительного хранения микропобегов сортов и форм груши (14 месяцев) рекомендуется использовать способ депонирования при температуре +3…5°С с использованием среды МС, разбавленной в четыре раза по минеральному составу и среду МС, содержащую 10 мг/л БАП.

12. Список опубликованных работ

1. Ломовская, клонального микроразмножения сортов и перспективных форм груши / // Роль сортов и новых технологий в интенсивном садоводстве : материалы к междунар. науч.-метод. конф. (Орел, 28-31 июля 2003 г.) – Орел: ВНИИСПК, 2003. – С. 204-205.

2. Ломовская, оздоровления и размножения перспективных форм груши in vitro / // Достижения науки и техники АПК. – М., 2004. - №3 . ­­- С. 13-15.

3. Ломовская, размножения перспективных форм груши в культуре in vitro / // Селекция и сортовая агротехника плодовых культур: сб. науч. тр. – Орел, 2004. - С. 107-113.

4. Ташматова, культуры in vitro при размножении и депонировании форм груши / // Садiвництво : мiжвiдомчий тематичний науковий збiрник. – Киiв.: СЕРЖ, 2005. - Вип. 57. – С. 205-212.

5. Ташматова, груши in vitro / // Актуальные проблемы садоводства России и пути их решения : материалы всерос. науч.-метод. конф. молодых ученых (Орел, 2-5 июня 2007 г.). – Орел: ВНИИСПК, 2007. – С.310-313.

6. Ташматова, клонального микроразмножения и депонирования сортов и форм груши. / , В. А Высоцкий // Плодоводство и ягодоводство России : сб. науч. работ ГНУ ВСТИСП. - М.: ВСТИСП, 2008. – Т. XVIII. – С. 385-389.

7. Ташматова, прививки груши микропобегами in vitro / , // Совершенствование сортимента и технологий возделывания плодовых культур : сб. науч. тр. – Орел: ВНИИСПК, 2010. - С.228-229.

8. Ташматова, сохранение пробирочных растений груши / // Садiвництво. – Киiв.: СЕРЖ, 2011 – Вип. 64. (в печати)

9. Ташматова, и депонирование груши в условиях in vitro / // Плодоводство и ягодоводство России : сб. науч. работ – М.: ВСТИСП, 2011. – Т. XXVI. – С. 130-137.

Издательство ВНИИСПК, 2012. Орловская обл., Орловский р-н, д. Жилина

Заказ №28. Тираж 100 экз.