Сборник научных трудов молодых ученых (стр. 3 )

Таким образом, детекция амплификации и экспрессии гена TOP2A, а также экспрессии генов b-тубулина и BRCA1 методом полуколичественной полимеразной цепной реакции (ПЦР) в реальном времени с учётом клинических, морфологических и биологических особенностей местно-распространённого РМЖ в клинической практике позволит:

- облегчить выбор лекарственной неоадъювантной терапии;

- индивидуализировать системное лечение;

- улучшить показатели выживаемости больных;

- уменьшить затраты на терапию за счет сокращения использования неэффективных дорогостоящих лекарственных средств.

ЛАПАРОСКОПИЧЕСКИЕ НЕРВОСБЕРЕГАЮЩИЕ РАДИКАЛЬНЫЕ ГИСТЕРЭКТОМИИ ПРИ РАКЕ ШЕЙКИ МАТКИ.

НЕПОСРЕДСТВЕННЫЕ И БЛИЖАЙШИЕ РЕЗУЛЬТАТЫ

Аспирант научного отделения онкогинекологии

ФГБУ «НИИ онкологии им. » Минздрава России

Санкт-Петербург

Цель исследования

Обоснование эффективности лапароскопической нервосберегающей радикальной гистерэктомии при раке шейки матки.

Задачи исследования

1.  Определить показания к эндовидеохирургической нервосберегающей радикальной гистерэктомии у больных раком шейки матки стадии Ia2-Ib1.

2.  Провести сравнительный анализ интраоперационных показателей при лапароскопическом и лапаротомном доступах в хирургическом лечении рака шейки матки стадии Ia2-Ib1.

3.  Провести сравнительный анализ послеоперационных показателей при лапароскопическом и лапаротомном доступах в хирургическом лечении рака шейки матки стадии Ia2-Ib1.

4.  Определить место эндовидеохирургической нервосберегающей радикальной гистерэктомии в комбинированном лечении рака шейки матки.

Научная новизна исследования

Проведен сравнительный анализ эндовидеохирургической нервосберегающей радикальной гистерэктомии и абдоминальной гистерэктомии традиционным лапаротомным доступом при раке шейки матки.

Оценены результаты сравниваемых методик хирургического лечения рака шейки матки с определением преимуществ эндовидеохирургической нервосберегающей радикальной гистерэктомии.

Определены показания к применению эндовидеохирургической нервосберегающей радикальной гистерэктомии у онкогинекологических больных.

Практическая значимость исследования

В результате проведенного сравнительного анализа интра - и послеоперационных показателей больных раком шейки матки после эндовидеохирургической нервосберегающей радикальной гистерэктомии и оценки результатов сравниваемых методик определены показания и противопоказания для их выполнения при хирургическом лечении рака шейки матки, сформулированы рекомендации и оценены прогнозы выживаемости.

Материалы и методы исследования

С целью изучения эффективности применения лапароскопической нервосохраняющей радикальной гистерэктомии в лечении больных раком шейки матки в отделении онкогинекологии НИИ онкологии им. проф. было проведено исследование по определению показаний к этой операции и оценены ближайшие результаты лечения.

С 2012г по декабрь 2014г в отделение выполнены лапароскопические нервосберегающие расширенные гистерэктомии у 26 больных раком шейки матки со стадией IA2-IB1 (средний возраст пациенток 38,5+/-4,5 года). В группу сравнения включены 30 пациенток, которым была выполнена лапаротомная расширенная гистерэктомия по методу Вертгейма-Мейгса в этот же период. Для уточнения дооперационной стадии опухоли (TNM) всем больным выполнены следующие методы обследования:

1.  Ультразвуковое исследование органов брюшной полости, почек, малого таза, забрюшинных лимфоузлов.

2.  Цистоскопия

3.  Ректороманоскопия

4.  Рентгенологическое исследование грудной клетки.

5.  Ректовагинальное исследование.

6.  Морфологическое исследование биоптатов и операционного материала.

7.  КТ/МРТ органов малого таза.

Непосредственные и ближайшие результаты хирургического лечения оценивались на основании следующих параметров:

1.  Продолжительность оперативного вмешательства.

2.  Интраоперационная кровопотеря.

3.  Частота интраоперационных и постоперационных осложнений.

4.  Продолжительность послеоперационной госпитализации.

5.  Количество удаленных лимфатических узлов и число л\узлов с метастазами.

6.  Длительность постановки мочевого катетера.

7.  Возникновение рецидивов заболевания.

Результаты исследования

После выполнения лапароскопической нервосохраняющей гистерэктомии у 60% больных I группы наблюдалось полное восстановление функции мочевого пузыря на 4 сутки, а в контрольной группе - только в 30% случаев. На 5 сутки после лапароскопической нервосберегающей радикальной гистерэктомии у всех пациенток исследуемой группы восстанавливалась нормальная функция мочеиспускания, в контрольной группе этот период длился от 11 до 16 суток.

Продолжительность пребывания в стационаре составила 9 против 22 дней в сравниваемых группах.

Выводы

1.  Внедрение лапароскопии в онкологическую практику, расширяет возможности хирургов выполнять нервосберегающие операции без потери радикальности и уменьшения выживаемости у онкогинекологических больных.

2.  Внедрение в клиническую практику лапароскопических нервосберегающих гистерэктомий в лечении рака шейки матки стадии IA2-IB1 гарантирует не только раннее восстановление функции мочевыводящих путей, но и более благоприятной с точки зрения объема кровопотери и длительности пребывания в стационаре прогноз.

3.  Учитывая отсутствие рецидива заболевания в исследуемой группе и данные зарубежной литературы по этому вопросу, можно сделать вывод, что лапароскопическая нервосберегающая радикальная гистерэктомия может применяться в лечении рака шейки матки IB1-IB2 стадии, без потери радикальности и ухудшения прогнозов выживаемости.

ОЦЕНКА ЭФФЕКТИВНОСТИ СОВРЕМЕННЫХ МЕТОДОВ ПЕРВИЧНОЙ И УТОЧНЯЮЩЕЙ ДИАГНОСТИКИ РАКА ЛЕГКОГО

Врач-онколог онкологического (торакальной хирургии) отделения

ГБУЗ «Санкт-Петербургский научно-практический центр специализированных видов медицинской помощи (онкологический)»

Санкт-Петербург

Цель исследования

Повышение эффективности диагностики рака легкого с использованием современных методов первичной и уточняющей диагностики.

Задачи исследования

1.  Проанализировать популяционную однородность контингента при проведении когортных исследований по изучению эффективности ранней диагностики рака легкого, с использованием низкодозной компьютерной томографии.

2.  Определить взаимосвязь между темпом набора участников и обнаружением различных дефектов сбора и обработки информации, установить целесообразность и периодичность контроля качества обследований.

3.  Изучить влияние когортных исследований по изучению эффективности ранней диагностики рака легкого на качество жизни и психологическое состояние участников.

4.  Установить диагностическую эффективность метода трансторакальной трепан-биопсии в зависимости от способа навигации иглы, патологии, размеров и расположения очагов в легких.

5.  Изучить частоту и характер осложнений при выполнении ТТБ и их взаимосвязь с различными факторами.

6.  Определить эффективные способы устранения основных хирургических осложнений после выполнения ТТБ.

Научная новизна исследования

Выполненная работа раскрыла новые пути решения актуальной проблемы – повышения эффективности ранней диагностики рака легкого, в том числе при применении в скрининговых программах.

Продемонстрировано, что при планировании скрининга рака легкого целесообразно провести предварительные когортные исследования, позволяющие оптимизировать условия его реализации.

На большом числе участников исследования (537 человек) показана высокая диагностическая ценность и безопасность методов НДКТ (369 участников) и ТТБ (168 больных).

Практическая значимость исследования

Показана необходимость проведения предварительных когортных исследований при планировании скрининговых программ, с целью оптимизации условий их реализации.

Доказана возможность эффективного использования метода НДКТ органов грудной полости в массовых исследованиях бессимптомных участников, относящихся к группе риска. Подтверждена эффективность и относительная безопасность метода ТТБ.

Материалы и методы исследования

Материалом для изучения стали данные о проведенных диагностических мероприятиях в отношении 537 человек. В целом, контингент больных состоял из двух групп: 1) участники 2-х когортных исследований по ранней диагностике рака лёгкого с использованием НДКТ – 369 человек; и 2) пациенты, госпитализированные для верификации патологического процесса в лёгких путём ТТБ – 168 больных.

Когортные исследования эффективности использования НДКТ для раннего выявления рака легкого проводились согласно протоколу, разработанному ФГБУ «НИИ онкологии имени » Минздрава России, а в качестве координирующего учреждения выступил Фонд профилактики рака. Исследования проводились на однотипных 16-срезовых томографах при ширине среза не более 1,25 мм. Участники включались в исследование по ряду критериев. Из 369 человек статистически значимое большинство представляло Самарскую область - 87,8%, а участники из Ханты-Мансийска – 12.2% Средний возраст участников составил 60,4 года.

При изучении эффективности ТТБ, подвергнуты анализу проспективные данные в отношении 168 больных. Все манипуляции больным выполнялись в условиях стационара под местной анестезией с использованием автоматических (95,8%), либо полуавтоматических (4,2%) игл 14-16G. Для наведения трепан-иглы применялись 2 основных способа: 1) рентгенотелевидение (78,6%); и 2)роботизированная система для стереотаксической биопсии совмещённая с компьютерным томографом - 21,4%.

Результаты исследования

По результатам двух когортных исследований выявлена различная патология органов грудной клетки: очаговые образования в легких подозрительные на опухолевые 24,1% (n=89), туберкулезный процесс 5,7% (n=21), и прочая патология (42,0%; n=155). В целом в изучаемом контингентета, та или иная патология в органах грудной полости выявлена у 265 из 369 участников (71,8%). Все узловые образования легких оценены по следующим критериям: расположение, размеры, количество, наличие кальцинатов. Очаговые изменения в лёгких были описаны рентгенологами как рак лёгкого у 8 больных (9,0%; все из г. Самара), а у остальных участников как подозрительные (91,0%; n=81).

По результатам когортных исследований выполнение дополнительного КТ-контроля органов грудной полости было рекомендовано 38,0% участников, в частности немедленное – 22,5%, через 3 мес.- 5,7%, через 6 мес. – 9,8%. Отсроченные результаты опроса участников когортных исследований через 1,5 года после окончания исследования позволили установить, что РЛ был подтверждён только у 4 участников когортного исследования в г. Самара, и ни у одного обследованного в г. Ханты-Мансийск.

Помимо анализа результатов самого исследования были изучены такие параметры как: статус курильщика, наличие и характер жалоб, психо-эмоциональное состояние. Число курильщиков значительно превышало число не курящих. (96,2% против 3,8%), а доля курящих участников с подозрением на рак легкого составила 96,2%. Большая часть жалоб предъявлялась именно участниками связанными с курением. Большинство участников не ощутили психологического дискомфорта от привлечения к выполнению НДКТ (69,4%; n=256).

Принципы набора участников исследований в регионах значительно различались. В Самарской области более интенсивно шел набор в сравнении с г. Ханты-Мансийск. Средний темп набора по регионам составил 11,6 в сутки (г. Самара) против 0,25 в г. Ханты-Мансийск.

Выработаны критерии контроля качества с учетом долей технического брака, дефекта сбора информации, нарушение критериев включения и исключения, напрямую связанные с темпом набора кандидатов.

Всего ТТБ были выполнены 168 пациентам, из них большинство 78,6% (n=132) пришлось на методику с традиционной навигацией иглы, а 21,4% (n=36) – на роботизированный вариант выполнения.

Эффективность ТТБ в целом для всех видов патологии составила 85,7%.

В целом в изучаемом контингенте осложнения после ТТБ развились у 34 пациентов, составив 20,2%. Выявлено значимое различие в зависимости от расположения очага. Наиболее частое осложнение после ТТБ постманипуляционный пневмоторакс – 16,7% (n=28).

Выводы

1.  Проведение когортных исследований эффективности НДКТ органов грудной полости в качестве метода ранней диагностики рака легкого продемонстрировало отсутствие статистически значимых межрегиональных различий по полу, возрасту, фактору курения, характеру и количеству лёгочных узлов (р>0,1) и позволило обнаружить различные патологические изменения у 71,8% (n=265) участников.

2.  Различия в организации когортных исследований в г. Самара и г. Ханты-Мансийск статистически значимо отразились на количестве обследованных (87,8% против 12,2%) и среднем темпе их набора (11,6 против 0,25 в сутки); причём установлена несомненная обратная связь между темпом рекрутирования участников и долями технического брака (32,1% против 2,2%), несоответствия критериям включения (42,9% против 22,2%), дефектов сбора информации (30,2% против 13,3%), что требует проводить контроль качества исследования не реже 1 раза в неделю.

3.  Когортные исследования по раннему выявлению рака лёгкого не вызвали существенного психологического дискомфорта у большинства участников.

4.  Эффективность ТТБ при определении характера паренхиматозных легочных узлов составляет 85,7% , без значимых различий в зависимости от характера патологии, морфологической структуры и способа навигации иглы и находится в прямой зависимости от размеров очагов и их расположения.

5.  Роботизированная ТТБ в отличие от обычной, характеризуется сопоставимой эффективностью при всех размерах легочных очагов, при этом отсутствуют статистически значимые различия между информативностью биопсии из различных участков лёгкого.

6.  Осложнения после ТТБ развиваются у 20,2% больных, и не связаны со способом наведения иглы и размером узла, однако напрямую зависят от расположения очага в легком. Основным хирургическим осложнением после ТТБ является ятрогенный пневмоторакс, необходимость дренирования которого возникла у 42,9% больных.

КРИОДЕСТРУКЦИЯ В ЛЕЧЕНИИ

БАЗАЛЬНОКЛЕТОЧНОГО РАКА КОЖИ

Аспирант кафедры онкологии

ГБОУ ВПО «Северо-Западный государственный медицинский

университет им. » Минздрава России

Санкт-Петербург

Цель и задачи исследования

Разработка методики и изучение результатов лечения базальноклеточного рака кожи различной локализации с применением нового оборудования и современных методов мониторинга.

Материалы и методы исследования

Клинические исследования были проведены в отделении хирургии головы и шеи НИИ онкологии им. .

Под наблюдением находились 54 больных в возрасте от 43 до 89 лет с базальноклеточным раком кожи различной локализации (2013-2014 г. г.). Среди них преобладали женщины – 35 (64,8%). В возрасте старше 60 лет было 96,2%, что совпадает с пиком частоты возникновения базальноклеточного рака кожи.

Рецидив опухоли был у 27 больных (50%). 14 из этих пациентов было с рецидивом после хирургического лечения, 6 - после лазерного лечения, 7 - после комбинированных видов лечения. 1 больной был после 7 и 1 после 9 сеансов лазерного лечения.

Диагноз устанавливали на основании анамнеза, клинической картины заболевания и данных патогистологического исследования.

Показанием к применению низкотемпературного лечения базальноклеточного рака кожи являлись рецидивы опухолей и неэффективность предшествующего лечения.

Для проведения криодеструкции использовали криогенный аппарат заливного типа АКГЭ-01, который обладает наибольшей мощностью среди приборов, разрешенных к применению, и современную криотерапевтическую систему «МКС» (регистрационный номер РЗН 2014/2273). Набор инструментов включал инъекционные криозонды 1,5 мм и аппликационные наконечники диаметром от 5 до 30 мм. Конечная рабочая температура поверхно-стей игл и аппликаторов составляла 160-180°С. Криогенное воздействие выполняли в трех циклах с экспозицией 5 минут в каждом из них. Отсчет времени начинали после достижения аппликатором рабочей температуры. Параметры температуры удерживались в заданных пределах автоматически контроллерами МКС. Оттаивание происходило в пассивном режиме. При поверхностных поражениях третий аппликационный цикл заменяли открытой обработкой опухоли спреем азота.

Процесс формирования ледяного фронта контролировали ультразвуковым мониторингом. Число точек аппликации или инъекций криозондами определяли соответственно размерам опухоли и глубине ее распространения. Вовлечение в опухоль костей носа не служило противопоказанием к операции. Окончательная форма сформированной ледяной сферы зависела от распространенности опухоли и очертаний границ опухолевой инфильтрации.

У 54 пациентов было выполнено 68 операций криодеструкции опухолей. Базальноклеточный рак кожи локализовался на коже головы и шеи (волосистая часть головы, лоб, висок, область глаза, нос, носогубная складка, щека, шея) в 95,7% всех наблюдений. На туловище (молочная железа, спина и поясничная область, передняя брюшная стенка и др.) располагалось 8 элементов (4,3%). Такое распределение частоты локализаций мы связываем с трудностями обнаружения базальноклеточного рака кожи самими пациентами.

Абсолютных противопоказаний к лечению базальноклеточного рака кожи низкотемпературной деструкцией мы не обнаружили. Сопутствующие заболевания (кардиопульмональные, хронические заболевания других внутренних органов) не являлись противопоказанием к проведению лечения.

Пациенты легко переносили послеоперационный период. Изменений со стороны общего статуса, осложнений во время и после криодеструкции, не отмечено. Уход за раной заключался в предотвращении ее инфицирования, что достигалось обработкой антисептиком в течение 3-5 дней 4-5 раз в сутки.

Результаты исследования

Эффективность лечения низкотемпературной деструкцией оценивали через 6 месяцев на основании клинического осмотра, повторного морфологического исследования и качества жизни пациентов. Критерием служило отсутствие рецидива и изменений, вызывающих функциональный или косметический недостаток.

Полная регрессия новообразований отмечена у всех больных. Рецидивов опухоли за время наблюдения не отмечено. Косметические и функциональные результаты оценивались, как удовлетворительные и хорошие.

Таким образом, на основании клинической и патоморфологической оценки ближайших результатов лечения базальноклеточного рака кожи можно констатировать высокую эффективность применения низких температур в комплексе с современными методами криодеструкции и мониторинга операции.

Криодеструкция позволяет полностью разрушить ткань новообразования и достигнуть оптимального косметического результата. Она легко переносится пациентами, независимо от локализации и количества новообразований. Полученные данные позволяют считать аппаратную криодеструкцию высокоэффективным методом лечения базальноклеточного рака кожи различной локализации.

Выводы

1.  Низкотемпературная деструкция обеспечивают полную ликвидацию опухоли, высокоэффективна в лечении базалиом различных локализаций.

2.  Криодеструкция не требует длительной предоперационной подготовки, она может применяться как в стационаре, так и в амбулаторной практике, не вызывают тяжелой реакции со стороны организма, не требует от пациентов частых визитов к специалисту.

3.  Криодеструкция малотравматична и функциональна, сопровождается гистотипическим заживлением раны с формированием косметичного и мягкого кожного регенерата.

СОВРЕМЕННЫЕ ПОДХОДЫ К УЛУЧШЕНИЮ РЕЗУЛЬТАТОВ ЗАГОТОВКИ ГЕМОПОЭТИЧЕСКИХ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК У ОНКОЛОГИЧЕСКИХ БОЛЬНЫХ ПРИ ТРАНСПЛАНТАЦИИ

Лаборант-исследователь научного отдела инновационных методов терапевтической онкологии и реабилитации

ФГБУ «НИИ онкологии им. » Минздрава России

Санкт-Петербург

Цель исследования

На основании анализа эффективности нескольких режимов мобилизации стволовых кроветворных клеток (СКК) предложение алгоритма ведения пациентов, которым показана высокодозная химиотерапия (ВДХТ) с аутологичной трансплантацией СКК периферической крови (ПК).

Задачи исследования

1. Провести сравнительную оценку эффективности различных режимом мобилизации СКК ПК.

2. Оценить роль и место селективных низкомолекулярных антагонистов рецептора CXCR4 в качестве средства улучшающего конечные результаты мобилизации СКК в комбинации с пегилированным филграстимом.

Научная новизна и практическая значимость исследования

Впервые в отечественной практике на определенной этнической группе будет показана возможность улучшить результат мобилизации СКК ПК у пациентов после неэффективности стандартных способов получения СКК. На основании анализа полученных данных предложен алгоритм ведения этой группы пациентов. Последние годы, ведутся попытки улучшить результаты мобилизации CD34+ клеток с помощью различных цитокинов и ростовых факторов в качестве дополнения к традиционным колониестимулирующим факторам. Более привлекательной представляется идея непосредственного воздействия на биологические механизмы, удерживающие ГСК в костномозговой нише, в частности, лиганд-рецепторное взаимодействие SDF1a - CXCR4. Изначально, созданный для лечения ВИЧ-инфекции, антагонист хемокинового рецептора CXCR4, плериксафор, быстро завоевал популярность в качестве агента для мобилизации стволовых клеток, эффективность которого доказана даже у доноров, у которых применение обычных КСФ было безуспешным. В декабре 2008 г. «Управление по контролю за продуктами питания и фармацевтическими продуктами» (FDA) зарегистрировало плериксафор для мобилизации ГСК в периферическую кровь с последующей их заготовкой для аутоТГСК у больных множественной миеломой (ММ) и неходжкинскими лимфомами (НХЛ). Его механизм действия основан на блокировании связей между стромальным рецептором SDF-1a - хемокин, который опосредует феномен локализации ГСК в костном мозге, и рецептором CXCR4, находящимся на поверхности СКК. Это приводит к высвобождению СКК (CD34+) из ниш костного мозга и увеличению их количества в периферической крови, что повышает шансы на проведение успешного лейкоаферез. Эффективность плериксафора в комбинации со стандартными гранулоцитарными КСФ была достоверно показана в двух плацебо-контролируемых клинических исследованиях с участием пациентов с неходжкинской лимфомой и множественной миеломой.

Возможность же применения пэгфилгастрима в комбинации с мозобилом изучено мало. Пегилированный колониестимулирующий фактор пегфилграстим имеет ряд преимуществ по сравнению с неконъюгированными КСФ – более раннее начало аферезов, уменьшения их числа и меньшее количество инъекций препарата. Одноцентровой ретроспективной анализ двух последовательных когорт пациентов, перенесших мобилизацию филгастримом и пэгфилгастримом (ПЭГ) в фазе стабильного кроветворения, показал достоверно более высокое содержание CD34+ клеток в периферической крови в группе с пэгфилгастримом (67.5% vs. 45.6%, p=0.01). Было показано, что применение 12 мг пэгфилгастрима ассоциируется с лучшей мобилизационной способностью, нежели использование филгастрима. В связи с этим, представляется многообещающим возможность изучения комбинации мозобила с пегфилгастриром у пациентов после неудачи мобилизации стандартными способами, определение его стоимости-эффективности, оценка качества получаемого трансплантата и результатов данных трансплантаций.

Результаты исследования

Основным критерием эффективности режима мобилизации СКК считалось >2,0х106 CD34+ клеток в продукте афереза.

В группе №1 (DHAP + Г-КСФ) эффективность режима составила 100%.

Уровень CD34+ клеток в конечном продукте в этой группе составил 5,3х106/кг массы тела.

В группе №2 (циклофосфамид 4 гр/м2 + Г-КСФ) эффективность режима также составила 100%. Уровень CD34+ клеток в лейкоконцентрате составил 8,4х106/кг массы тела.

В группе №3 (пэгфилгастрим + мозобил) инициировать аферез удалось также 100% больным. Уровень CD34+ клеток в этой группе составил 3,9х106/кг массы тела.

Помимо этого, эффективность пэгфилгастрима как мобилизующего агента в дни до инъекции мозобила была недостаточной, так как уровень CD34+ клеток в периферической крови составил 12 кл/мкл. Таким образом, применение его в монотерапии было бы нецелесообразно. Возможно, увеличение дозы пэгфилгасрима до 12 мг/сутки способствовало бы большему выходу CD34+ клеток в периферическую кровь и не требовало бы от нас применения дорогостоящего препарата – мозобила. Однако это предположение требует дальнейшего изучения.

Эффективность всех режимов мобилизации была одинаковой. Значимых проявлений токсичности ни в одной из групп зарегистрировано не было. Все нежелательные реакции, были связаны с гематологическими осложнениями на фоне курсов ПХТ, носили предсказуемый характер и требовали дополнительного назначения антибиотикотерапии, трансфузий компонентов крови.

В группе №3 нежелательные реакции, такие как, слабость, боли в костях, носили умеренную степень выраженности и не требовали сопроводительной терапии.

Выводы

1.  Анализ показал хорошую переносимость и эффективность применения пэгфилгастрима и плериксафора в качестве режима мобилизации СКК.

2.  Возможность применения этого режима в амбулаторных условиях, является не только комфортным, но и экономически выгодным. Он не нуждается в коррекции осложнений, возникающих на фоне ПХТ, и не требует дополнительных затрат на пребывание пациентов в стационаре.

ОПЫТ ПРИМЕНЕНИЯ ФОТОДИНАМИЧЕСКОЙ ТЕРАПИИ В ХИРУРГИЧЕСКОМ ЛЕЧЕНИИ ПЕРВИЧНЫХ И РЕЦИДИВНЫХ МЕЛАНОМ КОЖИ

Аспирант научного отделения общей онкологии и урологии

ФГБУ «НИИ онкологии им. » Минздрава России

Санкт-Петербург

Цель исследования

Улучшение результатов лечения первичных и рецидивных меланом кожи с использованием фотодинамической терапии (ФДТ).

Задачи исследования

1.  Изучить индукцию апоптоза клеток меланомы кожи человека под влиянием ФДТ в эксперименте in vitro.

2.  Оценить воздействие операции с или без ФДТ на субпопуляционный состав иммунокомпетентных клеток периферической крови у больных меланомой кожи.

3.  Оценить субпопуляционный состав иммунокомпетентных клеток у больных меланомой кожи.

4.  Сравнить отдаленные результаты общей и безрецидивной выживаемости радикально пролеченных больных меланомой кожи с и без ФДТ в лечении.

5.  Анализ эффективности ФДТ в хирургическом лечении больных меланомой кожи.

Научная новизна исследования

·  разработана оригинальная методика ФДТ в лечении первичных и рецидивных меланом кожи (подготовлена заявка на изобретение);

·  изучены различные режимы ФД-воздействия с использованием фотодитазина в экспериментах in vitro;

·  изучены иммунологические показатели у больных меланомой кожи, получавших ФДТ и хирургическое лечение;

·  представлены отдаленные результаты общей и безрецидивной выживаемости больных меланомой кожи, получавших ФДТ и хирургическое лечение.

Практическая значимость исследования

·  показана возможность индукции апоптоза клеток меланомы кожи при использовании ФД-воздействия с фотодитазином in vitro;

·  определена доза фотодитазина для оптимального процесса раннего апоптоза;

·  подтверждена возможность активации иммунного ответа у больных под воздействием ФДТ;

·  показана флуоресцентная диагностика меланомы кожи;

·  показана клиническая эффективность применения ФДТ с операцией в лечении больных меланомой кожи.

Материалы и методы исследования

В соответствии с задачами исследования, работа была разделена на две части: экспериментальную и клиническую.

Методика экспериментального исследования

Для экспериментального исследования in vitro использовали клеточную линию меланомы кожи человека (Mel 226), полученную в лаборатории клеточных технологий отделения химиотерапии и инновационных клеточных технологий и депонированную в Российском Банке клеточных линий позвоночных. ФД добавляли в разных концентрациях: 1) 0,5 мкг/мл, 2) 1мкг/мл (эквивалент дозе 1 мг/кг, рекомендованной в инструкции по применению ФД), 3) 2,5 мкг/мл. Через 30 мин проводили облучение клеток меланомы лазерным светом 662 нм, 40 Дж (доза для культуры опухолевых клеток, эквивалентная используемой в клинической практике), экспозиция 6 и 10 мин. Анализ проводили через 1 и 4 часа после фотодинамического воздействия.

Методика клинического исследования

В клиническую часть исследование были включены пациенты, получавшие лечение в ФГБУ «НИИ онкологии им. » Минздрава России с июля 2012 г. по январь 2015 г.

Оценка субпопуляционного состава иммунокомпетентных клеток у больных меланомой кожи проводилась по схеме: всем больным проводился забор крови для оценки содержания основных субпопуляций лимфоцитов периферической крови до лечения и через 7 дней после операции. Иммунофенотипический анализ проводилина проточном лазерном цитофлуориметре BD FACSCalibur (tm) (BD Biosciense). Для окрашивания клеток использовали панель МКА меченых FITC (изотиоцианат флуоресцеина, PE (фикоэритрин), PC5 (комплекс PE с цианином-5), PerCP (перидинин-хлорофилл протеин) или PerCP-Cy5.5 (комплекс PerCP с цианином 5.5) к белкам-маркерам (CD) клеточной мембраны лейкоцитов. Проводили регистрацию прямого светорассеяния (под углами 1-10о), бокового светорассеяния (под углом 90о). Для каждого образца анализировали не менее 105 клеток. Для оценки данных иммунофенотипического анализа использовали программное обеспечение CellQuest Pro (tm).

Пациенты в соответствии с этим распределены на две группы. Хирургическое лечение больных (1-я гр.) проводили по стандартной методике в объеме радикального хирургического вмешательства. Второй группе пациентов за 2 дня до хирургического лечения или за 2 часа в день операции проводили ФДТ отечественным ФС второго поколения - диметилглюкаминовая соль хлорина Е6 (фотодитазин, регистрационный номер №249188), 50,0 мг внутривенно капельно в течение 30 мин в 200 мл 0,9% раствора хлорида натрия. Через 2 часа после этого проводили лазерное облучение опухолевого очага (662 нм, 400 Дж), а тем, кто оперировался в тот же день – лазерное облучение проводили после удаления локализованной опухоли и/или метастатического поражения регионарных лимфатических узлов в течение 30 минут. С начала введения и в последующие 24 часа пациенты носили солнцезащитные очки.

В исследование включено 45 больных локализованной меланомой кожи. Пациенты, в изучаемых группах были сопоставимы по возрасту и полу, а также по стадиям заболевания.

Оценка результатов лечения проводилась путем сравнения с прогностически однородной группой пациентов сопоставимой по половозрастному составу, клинико-морфологической характеристики первичной или рецидивной опухоли, и получивших только хирургическое лечение. Количество, получивших только хирургическое лечение пациентов равнялось 42 (1-я группа). ФДТ и хирургическое лечение первичной или рецидивной меланомы кожи были применены у 42 пациентов с морфологически верифицированной первичной меланомой кожи (2-я группа).

Результаты исследования

Изучение уровня апоптоза в клетках меланомы после

фотодинамического воздействия (ФД-воздействие)

Концентрации ФС 0,5 мкг/мл, 1мкг/мл и 2,5 мкг /мл обладают сопоставимой способностью индуцировать ранний апоптоз. Вместе с тем, статистически значимых различий не было выявлено (р>0,05). При увеличении времени облучения ФДТ сенсибилизированного опухолевого очага происходит более быстрый переход опухолевых клеток в позднюю фазу апоптоза (р<0,05).

Анализ динамики иммунологических показателей у больных

меланомой кожи, получавших хирургическое лечение с или без ФДТ

У больных 1-й группы, хирургическое вмешательство не приводило к повышению абсолютного содержания никаких иммунологических показателей, субпопуляционный состав Т-лимфоцитов, Т-клеток ( CD3+CD19- , активированных Т-хелперов (CD3+CD4+HLADR+), Т-эффекторов (CD3+ CD8+), CD3-CD16+ CD56+ и число В-лимфоцитов (CD19+CD3-) не претерпело статистически значимых изменений (р>0,05).

При добавлении к хирургическому лечению неоадъювантной или интраоперационной ФДТ (2-я гр. больных) выявлено статистически значимое повышение содержание CD3+CD19- (р=0,019), CD3+ CD8+ Т-эффекторов (р=0,026), активированных CD3+ CD4+HLADR+ Т-хелперов (р=0,05), CD3-CD16+ CD56+ (р=0,002) В-лимфоцитов CD19+CD3- (р=0,021), что свидетельствует об активации Т - и В-клеточного звена иммунной системы.

Оценка общей и безрецидивной выживаемости больных меланомой

кожи после хирургического и комбинированного лечения

(ФДТ+операция)

Статистически достоверно имеют наилучшие показатели общей выживаемости пациентов во 2-ой группе (р=0,001). Медиана общей выживаемости больных, составила 30 месяцев. Трехлетняя общая выживаемость больных, составила в 1-ой группе 50%, а в группе пролеченных радикально с использование ФДТ – 92 %.

Статистически достоверно (р=0,0001) имеют лучшие показатели безрецидивной выживаемости пациенты, получившие хирургическое лечение с ФДТ. Показатели трехлетней безрецидивной выживаемости во второй группе равняются 82 %, тогда как в первой группе пациенты имели рецидив в 53 %.

Выводы

1.  Увеличение концентрации фотодитазина не приводит к увеличению количества клеток на стадии раннего апоптоза (р>0,05).

2.  Удлинение времени экспозиции приводит к увеличению доли поздних форм апоптоза (p<0,05).

3.  Изучен субпопуляционный состав иммунокомпетентных клеток у больных меланомой кожи.

4.  ФДТ помимо фотохимического воздействия на опухолевые клетки меланомы кожи может служить триггером формирования протективного иммунного ответа.

5.  Использование ФДТ с фотодитазином в дозе 50,0 мг с последующим облучением (662 нм, 400 Дж) способствует активации Т - и В-клеточного звена иммунной системы (р<0,05).

6.  Общая и безрецидивная выживаемость больных меланомой кожи после хирургического лечения с ФДТ статистически имеют лучшие показатели, по сравнению с только прооперированными пациентами.

7.  Использование ФДТ в хирургическом лечении первичных и рецидивных меланом кожи улучшают результаты лечения.

ОЦЕНКА ЭФФЕКТА ДОКСОРУБИЦИНА В СОЧЕТАНИИ С РАЗЛИЧНЫМИ СПОСОБАМИ ВВЕДЕНИЯ МЕЛАТОНИНА НА МОДЕЛИ ПЕРЕВИВАЕМОЙ ОПУХОЛИ ЭРЛИХА

У САМОК МЫШЕЙ SHR

Врач-онколог амбулаторно-консультативного отделения

ГБУЗ «Санкт-Петербургский научно-практический центр специализированных видов медицинской помощи (онкологический)»

Санкт-Петербург

Мелатонин (М) это индольное соединение, секретируемое в основном шишковидной железой из аминокислоты триптофана в течение темного времени суток, был открыт А. Лернером в 1958 г. На сегодняшний момент доказано, что функция М не ограничивается регулированием цикла сон – бодрствование, а рецепторы к нему есть в сетчатке, головном мозге, супрахиазматических ядрах, яичниках, мозговых и периферических артериях, почках, поджелудочной железе, иммунных клетках и адипоцитах. Мелатонин обладает антиоксидантными, антипролиферативными, иммуномодулирующими и гормон – модулирующими свойствами. Часть из исследований показали положительные результаты противоопухолевого действия М. Более того, мелатонин при использовании его в клинике в комбинации со стандартными методами лечения может увеличить их терапевтический эффект и снизить побочные явления. Он также обладает антиоксидантной активностью, снижая концентрацию активных форм кислорода, что приводит к уменьшению повреждения ДНК. Антипролиферативное действие М реализуется посредством подавления активности теломеразы, фермента, ответственного за бессмертие клеток, как in vitro и in vivo, а также опосредовано связыванием с одним из мембранных рецепторов, ML1 и / или ML2, что приводит к снижению поглощения клеткой линолевой кислоты. Антиметастатический эффект М связан с действием его на поверхностные молекулы клеточной адгезии, такие как E-кадгерин и β1-интегрин. Наиболее изученным является антиэстрогенное действие гормона. Системно М влияет на гипоталамо-гипофизарно-яичниковую ось, что приводит к снижению уровня циркулирующих эстрогенов и прогестерона. Противоопухолевое действие М у животных является дозозависимым.