Сравнительная характеристика эффективности применения имунофана и магнитоинфракрасной лазерной терапии в комплексном лечении детей с хроническим пиелонефритом (стр. 2 )

СОДЕРЖАНИЕ ДИССЕРТАЦИОННОГО ИССЛЕДОВАНИЯ

Материалы и методы исследования

Для решения поставленных задач были проведены клинические наблюдения и исследования с применением общеклинических, инструментальных, клинико-лабораторных и биохимических методов, выполненных в отделениях и лабораториях Кировской областной детской клинической больницы (гл. врач – ёхин), являющейся клинической базой кафедры педиатрии (зав. – профессор д. м.н. ), кафедры детской хирургии (зав. – доцент д. м.н. ) и кафедры педиатрии института последипломного образования ГБОУ ВПО Кировской ГМА Минздравсоцразвития России (зав. – д. м.н. ). Иммунологические исследования были выполнены в лаборатории иммуногематологии (рук. – профессор д. м.н. ) ФГУ «Кировский НИИ гематологии и переливания крови ФМБА России».

Под нашим наблюдением в период с 2006 по 2010 г. находилось 148 детей (83 мальчика и 65 девочек) в возрасте 8-15 лет с различными формами ВОУ (112 больных с врожденным гидронефрозом (ВГ), 24 ребенка с первичным пузырно-мочеточниковым рефлюксом (ПМР), 12 больных с врожденным обструктивным уретерогидронефрозом (ВОУГ). Во всех случаях у наблюдаемых нами детей ВОУ были осложнены течением вторичного хронического обструктивного пиелонефрита с сохранной функцией почек. Все дети проживали в г. Кирове и Кировской области. Критерии включения в исследование: в клиническое исследование включались дети славянских национальностей от 8 до 15 лет, больные вторичным хроническим обструктивным пиелонефритом с сохранной функцией почек. Группы наблюдаемых нами больных были сопоставимы по возрасту и полу, выраженности клинических проявлений заболевания, месту фактического проживания. Число больных ОП было достаточным для сравнения предлагаемых программ лечения. Критерии исключения из исследования: в клиническое исследование не включались больные острым, необструктивным и калькулезным пиелонефритом; дети с 3б стадией гидронефроза по ; больные с двусторонней локализацией обструкции мочевой системы; больные с артериальной гипертензией и ХПН.

У наблюдаемых больных изучали данные анамнеза и общеклинические показатели, проводили инструментальные исследования: сонографию почек, мочеточников и мочевого пузыря, экскреторную урографию, микционную уретроцистографию, и по показаниям ретроградную пиелографию и цистоскопию. Общепринятыми методами измеряли суточный диурез и относительную плотность мочи, определяли содержание белка в моче и проводили микроскопическое исследование осадка мочи, посевы мочи на микрофлору, определяли содержание белка и белковых фракций, мочевины в сыворотке крови, креатинина в сыворотке и в моче, клиренс эндогенного креатинина, канальцевую реабсорбцию воды, бактериурию, исследовали показатели периферической крови, определяли скорость клубочковой фильтрации (СКФ) по формуле:

СКФ (мл/мин/1,73 м2) = [0,0484 х рост(см)]

креатинин крови(моль/л)

У мальчиков старше 13 лет вместо коэффициента 0,0484 используется коэффициент 0,0616. Контрольную группу в этих исследованиях составили 193 практически здоровых ребенка того же возраста, проживающих в г. Кирове и Кировской области.

Специальные методы исследования

В динамике изучались показатели клеточного и гуморального иммунитета, неспецифической резистентности организма, показатели цитокинового статуса. Для этого у всех 148 детей с вторичным хроническим обструктивным пиелонефритом исследовали при поступлении в стационар и перед выпиской из стационара содержание CD3- и CD20-лимфоцитов, CD4- и CD8-лимфоцитов, CD16-клеток в крови, вычисляли индексы CD3/CD20 и CD4/CD8, определяли концентрацию иммуноглобулинов G, A, M и ЦИК в сыворотке крови, фагоцитарную активность нейтрофилов, фагоцитарный индекс и НСТ-тест. Исследовались уровни цитокинов в сыворотке крови: интерлейкин-1β, интерферон-α, фактор некроза опухоли-α. Из этой группы больных 35 детям (группа 1) через 1 год после радикальной коррекции основной патологии (реконструктивные органосохраняющие операции) вкупе с общепринятой терапией (антибиотики, уросептики, спазмолитики миотропного действия, фитотерапия [отвары брусничного листа, толокнянки, кукурузных рыльцев],витаминотерапия) проводился курс магнитоинфракрасной лазерной терапии аппаратом «РИКТА-02/1» (М1) с использованием 50% уровня мощности лазерного и инфракрасного излучения. За основу были приняты «Методические рекомендации по применению магнитоинфракрасного лазерного аппарата «РИКТА» (под ред. , Москва, 2004). Оценка показателей иммунитета, неспецифической резистентности и цитокинового профиля у детей данной группы (№1) также осуществлялась трехкратно (перед выпиской из стационара, через 3 месяца и через 1 год после проведения стационарного лечения).

Кроме того, 35 больным (группа 2) проводился курс иммуномодулирующей терапии препаратом «имунофан» в раннем послеоперационном периоде на стационарном этапе лечения. Оценка показателей иммунитета, неспецифической резистентности и цитокинового статуса у них также осуществлялась трехкратно. Взятие крови для определения показателей иммунологической реактивности осуществлялось в одинаковых условиях в одно и тоже время суток (натощак, утром), что является важным в связи с наличием биоритмов в функционировании иммунной системы [ и соавт., 1994; Bioиiж M. и соавт., 2002]. Контрольную группу в этих исследованиях составили 532 здоровых ребенка той же популяционной группы.

Состояние клеточного иммунитета у наблюдаемых больных оценивали по изменениям количества популяций и субпопуляций CD3-лимфоцитов в крови. Содержание CD3-клеток в периферической крови определяли при помощи метода непрямой иммунофлюоресценции с помощью моноклональных антител, выпускаемых Нижегородским «Препарат»; CD16-лимфоцитов (проточная цитометрия); результаты выражали в процентах и абсолютных числах. Индекс CD3-лимфоциты/CD20-лимфоциты представлял собой отношение процентного содержания этих клеток в крови. Кроме того, у больных определяли количество субпопуляций CD3-клеток (CD4- и CD8-лимфоциты) методом непрямой иммунофлюоресценции с помощью моноклональных антител (ЛТ-4 и ЛТ-8), результаты выражали в процентах и абсолютных числах. Индекс CD4/CD8 представлял собой процентное отношение указанных клеток.

Состояние общего гуморального иммунитета у больных оценивали по изменению содержания CD20-лимфоцитов в периферической крови. Определение проводилось при помощи метода непрямой иммунофлюоресценции с помощью моноклональных антител (ЛТ-20), выпускаемых Нижегородским «Препарат»; результаты выражали в процентах и в абсолютных числах. Содержание иммуноглобулинов G, A, M в сыворотке определяли общепринятым методом радиальной иммунодиффузии по Mancini с соавт. с использованием моноспецифических антисывороток, выпускаемых Нижегородским предприятием по производству бактерийных препаратов; результаты выражали в г/л. Концентрацию ЦИК в сыворотке крови определяли методом преципитации с ПЭГ-600 (БелокриницкийД. В.); результаты выражали в единицах оптической плотности (ед. опт. пл.).

Неспецифическую резистентность организма наблюдаемых больных оценивали по изменениям фагоцитарной активности нейтрофилов, фагоцитарного индекса и теста восстановления в цитоплазме нейтрофилов нитросинеготетразолия до диформазана (НСТ-тест). ФАН определяли, используя в качестве фагоцитируемого объекта частицы латекса, по методу с соавт.; результаты выражали в процентах. ФИ рассчитывали, как среднее количество частиц латекса, поглощенное одним фагоцитом. При постановке НСТ-теста подсчитывали количество клеток, образующих гран2); результаты выражали в процентах. Цитокиновый профиль определяли, выявляя в динамике уровни ИЛ-1β (интерлейкина-1β), ИФН-α (интерферона-α), ФНО-α (фактора некроза опухоли-α) методом иммуноферментного анализа (ИФА) с применением реагентов, -Бест» (г. Новосибирск). Результаты выражали в пкг/мл.

Статистические методы исследования

Цифровой материал, полученный при исследовании клинико-лабораторных, биохимических и иммунологических показателей у детей с врожденными обструктивными уропатиями, осложненными вторичным хроническим пиелонефритом, обрабатывали на персональном компьютере Intel(R) Core(TM) 2 DuoCPUE6750 @ 2.66GHz 2,67 ГГц, 2,0 ГБ ОЗУ с определением среднеарифметической величины (М) и среднеквадратической ошибки (m). Статистическую достоверность различий (p) между сравниваемыми показателями у больных и здоровых детей определяли методом вариационной статистики (, , 1974) по таблице Стъюдента-Фишера. За статистически значимые различия принимался уровень значимости р<0,05. Сравнительную характеристику иммунологических показателей при статистически значимых результатах в группе 1 и группе 2 проводили с помощью корреляционного анализа с двухвыборочным критерием Манна-Уитни. Следует отметить, что имеющиеся в литературе данные по показателям парциальных функций почек, периферической крови, клеточного, гуморального и неспецифического иммунитета, цитокинового статуса у здоровых детей несколько отличаются друг от друга, что может быть обусловлено влиянием расовых, региональных, климатогеографических, экологических и социально-бытовых факторов. Поэтому в качестве контроля нами были использованы результаты исследования указанных показателей у детей в возрасте 8-15 лет I-II групп здоровья той же популяционной группы.

ОБЪЕКТ ИССЛЕДОВАНИЯ (148 детей в возрасте от 8 до 15 лет с хроническим пиелонефритом)

 

 

Оптимизация лечебных мероприятий у детей с хроническим пиелонефритом

Рис.1. Дизайн исследования

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Для достижения цели и решения задач, поставленных в работе нами было обследовано и пролечено 148 детей (83 мальчика и 65 девочек) в возрасте 8-15 лет с вторичным хроническим обструктивным пиелонефритом с сохранной функцией почек. Применялись общеклинические, клинико-лабораторные, биохимические, бактериологические, инструментальные и иммунологические методы.