Лабораторная работа №4
ВИТАМИНЫ. КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ ВИТАМИНА С
2,6-ДИХЛОРФЕНОЛИНДОФЕНОЛОМ (ПО ТИЛЬМАНСУ)
Недостаточность аскорбиновой кислоты в пище вызывает у человека заболевание, известное под названием скорбута, или цинги. Клинические симптомы недостаточности сначала проявляются быстрой утомляемостью, анемией, головокружением, затем появляется кровоточивость десен, склонность к кровоизлияниям в подкожную клетчатку, признаки нарушения сердечной деятельности, а также резкое снижение сопротивляемости организма инфекциям,
 |
Аскорбиновая кислота является лактоном ненасыщенной гексоновой кислоты. Наличие в ее молекуле двойной С2—С3 связи делает подвижными протоны гидроксильных групп у тех же атомов, что обусловливает кислый характер соединения с резко выраженной редуцирующей способностью. При окислении аскорбиновая кислота переходит в дегидроаскорбиновую кислоту:
В чистом виде аскорбиновая кислота представляет собой бесцветные кристаллы без запаха, кислого вкуса, хорошо растворимые в воде и спирте и нерастворимые в большинстве органических растворителей. В кристаллическом виде аскорбиновая кислота устойчива, но в присутствии окислителей легко разрушается в водных и особенно щелочных растворах, образуя щавелевую и треоновую кислоты.
 |
Работа 1. Количественное определение витамина С
2,6-дихлорфенолиндофенолом (по Тильмансу)
Метод количественного определения аскорбиновой кислоты основан на ее способности восстанавливать 2,6-дихлорфенолиндофенол, которым титруют исследуемый раствор в кислой среде, предохраняющей аскорбиновую кислоту от разрушения.
Оборудование и реактивы: весы, фарфоровая ступка, пестик, мерные колбы на 50 мл, воронка, фильтр, стеклянная палочка, конические колы, бюретка, 2% раствор соляной кислоты, дистиллированная вода, 0,001 н. раствор 2,6-дихлорфенолиндофенола
Материалы: различный растительный материал (хвоя, шиповник, капуста, клубни картофеля, яблоки и др.)
Ход работы
1. Приготовление фильтрата. Точную навеску растительного материала (сухих ягод шиповника – 1 г, хвои – 1 г, капусты – 5 г, картофеля – 5 г и т. д.) тщательно растирают в фарфоровой ступке с 4 мл 2% раствора соляной кислоты, добавив немного измельченного стекла. Затем без потерь переносят содержимое ступки в мерную колбу емкостью 50 мл, несколько раз смывая ступку водой и сливая ее по стеклянной палочке в ту же колбу, и доводят объем раствора дистиллированной водой до метки. Полученную смесь оставляют на 5-10 мин. Содержимое колбы тщательно перемешивают, фильтруют через бумажный фильтр и фильтрат используют для определения витамина С. Экстракт, полученный из картофеля, не фильтруют.
2. Титрование. Для титрования в конические колбочки отмеривают определенный объем фильтрата: шиповника - 1 мл, хвои – 5 мл, капусты – 5 мл. картофеля – всю полученную смесь без фильтрации. В каждую колбочку добавляют по 4 мл 2% раствора соляной кислоты и титруют из бюретки 0,001 н. 2,6-дихлорфенолиндофенолом до появления розового окрашивания, не исчезающего около 30 с.
Одновременно проводят контрольное титрование смеси реактивов. Число миллилитров раствора краски, пошедших на контрольное титрование, вычитают из числа миллилитров, пошедших на титрование вытяжки.
3. Обработка результатов. Результаты работы занесите в таблицу:
№ п/п | Растительный материал | Масса образца, г | Разведение | Количество вытяжки, взятое для титрования, мл | Количество раствора 2,6-дихлорфенолиндофенола, пошедшее на титрование, мл | Содержание аскорбиновой кислоты (мг%) |
1. | ||||||
2. | ||||||
3. т. д. |
Содержание витамина C рассчитывают по формуле:
Х = (0,088. А. L . 100) / B. D = (мг%),
где, Х – содержание аскорбиновой кислоты в миллиграмм-процентах, мг%;
0,088 – количество аскорбиновой кислоты в мг, эквивалентное 1 мл 0,001 н раствора 2,6-дихлорфенолиндофенола.
А – количество раствора 2,6-дихлорфенолиндофенола (в мл), пошедшее на титрование;
L – разведение анализируемого вещества;
В - количество сухого вещества в г, взятое для анализа;
D – количество вытяжки в мл, взятое для титрования.
Если, например, на титрование 1 мл вытяжки из шиповника пошло 1,25 мл 0,001 н. 2,6-дихлорфенолиндофенола, а для приготовления 50 мл вытяжки был использован 1 г шиповника, следовательно: Х = (0,088*1,25*50*100)/1*1= 550 мг%
Вывод.
Контрольные вопросы
1. Что такое витамины?
2. На чем основана классификация витаминов? Приведите примеры.
3. Что такое гипо-, гипер - и авитаминоз?
4. Какое заболевание связано с недостаточностью аскорбиновой кислоты в пище? Каковы его клинические симптомы?
5. На чем основан метод количественного определения аскорбиновой кислоты по Тильмансу?
Содержание аскорбиновой кислоты в зеленых культурах
(справочное значение)
Культура | Содержание аскорбиновой кислоты, мг/100 г |
Редис | 25 |
Редька | 20 |
Кресс салат | 108 |
Сельдерей § лист § корнеплод | 80 20 |
Томат | 20 |
Укроп зелень | 100 |
Щавель | 70 |
Кориандр | 60 |
Чабер | 40 |
Базилик | 37 |
Капуста § белокочанная § краснокочанная § цветная § брюссельская § кольраби | 29 60 69 96 40 |
Баклажан | 7 |
Лук репчатый § луковица § лист | 7 22 |
Морковь | 6 |
Огурец | 12 |
Перец сладкий § техническая зрелость § биологическая зрелость | 102 155 |
Петрушка § лист § корнеплод | 200 40 |
