На правах рукописи

УДК 616.12-008.331.1-036.3-07-056.7:575.191

РОЛЬ ПОЛИМОРФИЗМА И УРОВНЯ ЭКСПРЕССИИ ГЕНОВ ЦИТОКИНОВОЙ СЕТИ В ФОРМИРОВАНИИ МОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКИХ ОСНОВ ПРЕДРАСПОЛОЖЕННОСТИ К ЭССЕНЦИАЛЬНОЙ ГИПЕРТЕНЗИИ

14.00.06 - кардиология

03.00.15 - генетика

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени

кандидата медицинских наук

Москва-2008

Работа выполнена в Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Башкирский государственный медицинский университет Росздрава» и в Институте биохимии и генетики Уфимского научного центра Российской академии наук

Научные руководители:

Доктор медицинских наук, профессор Закирова Аляра Нурмухаметовна

Доктор биологических наук, профессор

Официальные оппоненты:

Доктор медицинских наук, профессор

Доктор медицинских наук Зинченко Рена Абульфазовна

Ведущая организация:

Федеральное Государственное Учреждение Государственный научно-исследовательский центр профилактической медицины Федерального агентства по высокотехнологичной медицинской помощи

Защита состоится ___ апреля 2008 г. в ___ часов на заседании диссертационного совета Д208.041.01 при Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Московский государственный медико-стоматологический университет Росздрава» (127473, /1).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГОУ ВПО «Московский государственный медико-стоматологический университет Росздрава» (127206, Москва, ул. Вучетича, д. 10а).

Автореферат разослан ____ марта 2008 года.

НЕ нашли? Не то? Что вы ищете?

Ученый секретарь диссертационного совета,

доктор медицинских наук, профессор


ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. Артериальная гипертензия является одним из основных факторов риска развития тяжелых сердечно-сосудистых осложнений, таких, как инсульт и инфаркт миокарда, – главных причин смертности в современном мире [, 2007].

Эссенциальная, или первичная, гипертензия (ЭГ), или гипертоническая болезнь, представляет собой многофакторное заболевание, в возникновении которого важную роль играет генетическая предрасположенность. Изучение молекулярно-генетических основ ЭГ открывает перспективы для разработки эффективных мер профилактики, адекватной терапии, а также способов прогнозирования воздействия тех или иных факторов среды на развитие заболевания. Общая концепция роли генетических факторов в этиопатогенезе ЭГ достаточно хорошо обоснована, но остается много неясных вопросов относительно вклада конкретных генов. Большая часть исследований посвящена ограниченному набору генов, которые кодируют белки, регулирующие тонус сосудов, функцию эндотелия, минеральный обмен, метаболизм и транспорт липидов в сосудистом русле. Относительно недавно стал изучаться вопрос об участии генов цитокинового каскада в развитии ЭГ.

Цитокины являются ключевыми медиаторами межклеточных взаимодействий, в том числе в процессе воспаления. Воспаление – основной патофизиологический субстрат сердечно-сосудистых заболеваний [Ross R., 1999]. Повышенная экспрессия эндотелием медиаторов воспаления лежит в основе атеросклеротического повреждения сосудистой стенки [Kofler S. et al., 2005]. Дисфункция эндотелия, наряду с нарушением свертываемости крови и гиперхолестеринемией, приводит к нарушению тонуса сосудов. В то же время, известно, что цитокиновая сеть функционирует в тесной связи с ренин-ангиотензиновой системой и эндотелиальными факторами релаксации, в частности, оксидом азота. Особый интерес представляет исследование профиля экспрессии генов цитокиновой сети в лейкоцитах периферической крови больных ЭГ, результаты которого открывают новые возможности для анализа роли транскриптома клеток крови в этиопатогенезе ЭГ.

Цель работы состояла в установлении роли полиморфизма и уровня экспрессии генов цитокинов в детерминации риска эссенциальной гипертензии и оценка их взаимосвязи с показателями внутрисердечной гемодинамики и ремоделирования миокарда левого желудочка у больных эссенциальной гипертензией.

Задачи исследования:

1.  Оценить состояние внутрисердечной гемодинамики и характер ремоделирования миокарда левого желудочка у больных эссенциальной гипертензией в зависимости от наличия осложнений.

2.  Провести анализ ассоциаций с эссенциальной гипертензией аллельных вариантов генов интерлейкина 1 бета (IL1B, -511T/C), фактора некроза опухолей альфа (TNFA, -308A/G), лимфотоксина (LTA,-252A/G), интерлейкина 6 (IL6, -572G/C), интерлейкина 10 (IL10, -627C/A), интерлейкина 12 (IL12B, 1159A/C), антагониста рецептора интерлейкина 1 (IL1RN, VNTR полиморфизм), ангиотензиногена (AGT, -174Т/М), эндотелиальной синтазы оксида азота (NOS3, VNTR полиморфизм в интроне 4).

3.  Установить связь полиморфизма перечисленных генов с факторами риска и сердечно-сосудистыми осложнениями эссенциальной гипертензии.

4.  Провести анализ ассоциаций аллельных вариантов генов-кандидатов с гипертрофией левого желудочка у больных эссенциальной гипертензией.

5.  Оценить степень риска развития эссенциальной гипертензии и сердечно-сосудистых осложненеий в связи с сочетаниями генотипов генов-кандидатов.

6.  Провести сравнительный анализ профилей экспрессии генов цитокинов и цитокиновых рецепторов в клетках периферической крови больных эссенциальной гипертензией и лиц контрольной группы.

Научная новизна исследования. Впервые проведён анализ ассоциаций полиморфизмов генов IL10, IL6, IL12B, IL1B, IL1RN, TNFA, LTA с ЭГ и выявлены маркеры риска ЭГ. Впервые показана связь полиморфизма -511T/C гена IL1B и-627C/A гена IL10 с ЭГ. Впервые изучен профиль экспрессии 84 генов цитокинов и цитокиновых рецепторов в клетках периферической крови больных ЭГ и лиц контрольной группы и обнаружены различия в уровне экспрессии 21 гена. Впервые у больных ЭГ обнаружено повышение транскрипционной активности генов CCL16, CCL17, CCL18, CCL19, CCL23, CCL8, CCR6, CCR8, CX3CR1, CXCL1, CXCL13, ICEBERG, IL13, IL17C, IL1F10, IL1F6, ILF9, SPP1, CD40LG, XCR1 и понижение транскрипционной активности гена CCL2 в клетках периферической крови.

Практическая значимость работы. Результаты работы используются при разработке рекомендаций для медико-генетического консультирования по ЭГ с целью первичной и вторичной профилактики сердечно-сосудистой патологии. Материалы исследования могут быть использованы в учебно-методическом процессе на медицинских и биологических факультетах, а также на курсах последипломного образования кардиологов, терапевтов и врачей общей практики.

Внедрение в практику. Результаты исследования и практические рекомендации внедрены в работу Республиканского кардиологического диспансера (г. Уфа) и используются в учебном процессе на кафедре кардиологии и функциональной диагностики ГОУ ВПО «Башкирский государственный медицинский университет Росздрава»..

Основные положения, выносимые на защиту.

1.  Развитие эссенциальной гипертензии характеризуется формированием концентрических вариантов ремоделирования миокарда левого желудочка. У больных эссенциальной гипертензией, перенесших ИМ, чаще наблюдаются эксцентрическая гипертрофия, в том числе, с дилатацией левого желудочка.

2.  Генетическими маркерами риска эссенциальной гипертензии являются аллельные варианты генов IL1B, IL10, IL1RN, IL12B и AGT.

3.  Риск развития сердечно-сосудистых осложнений эссенциальной гипертензии (инсульта) ассоциирован с полиморфными вариантами генов IL1B, IL-6, IL-10, IL-12B и TNFA.

4.  VNTR-полиморфизм в 4-ом интроне гена эндотелиальной синтазы оксида азота (NOS3) ассоциирован с гипертрофией левого желудочка у больных эссенциальной гипертензией.

5.  В клетках периферической крови больных эссенциальной гипертензией изменена транскрипционная активность ряда генов цитокинов, в особенности хемокинов, по сравнению с контрольной группой.

Личное участие автора в получении результатов, изложенных в диссертации. Все мероприятия по сбору материала для исследования (отбор больных и лиц контрольной группы, анализ медицинской документации, анкетирование, забор крови, выделение ДНК и РНК), генотипирование, анализ экспрессии генов, статистический анализ результатов выполнены автором лично.

Апробация работы. Результаты диссертационной работы были представлены в виде устных и постерных докладов на 17-м Съезде Европейского общества гипертензии (17th European Meeting on Hypertension, Milan, 2007), Европейском конгрессе по генетике человека (European Human Genetics Conference, Amsterdam, 2006; Nice, 2007), 7-м Балканском симпозиуме по генетике человека (7th Balkan Meeting on Human Genetics, Skopje, 2006), XIV Международном симпозиуме по атеросклерозу (XIV International Symposium on Atherosclerosis, Rome, 2006), Российском национальном конгрессе кардиологов (Москва, 2006), II-й Всероссийской научно-практической конференции «Артериальная гипертония в практике врача терапевта, невролога, эндокринолога и кардиолога» (Москва, 2006).

Публикации. По теме диссертации опубликовано 18 печатных работ, из них 3 статьи в журналах, рекомендуемых ВАК РФ.

Структура и объем диссертации. Диссертационная работа включает в себя следующие разделы: введение, обзор литературы, материалы и методы, результаты исследования и обсуждение, выводы, практические рекомендации, библиографический список, приложения. Работа изложена на 150 страницах машинописного текста, содержит 46 таблиц и 10 рисунков. Библиографический список включает 227 ссылок на 15 работ отечественных и 212 работ зарубежных авторов.

Из за большого объема этот материал размещен на нескольких страницах:
1 2 3 4 5