Экология растений и фотосинтез (стр. 8 )

К растертому растительному материалу прибавляют немного растворителя и материал продолжают растирать вместе с раствори­телем.

В колбе Бунзена в отверстии пробки закрепляют стеклянный фильтр
№ 2 или № 3 (диаметр фильтра должен соответствовать количеству исследуемого материала). Колбу соединяют с насосом и производят отсасывание жидкости. Жидкость из ступки слива­ют по стеклянной палочке в воронку-фильтр, предварительно сма­зав вазелином снаружи носик ступки. В ступку приливают 4-5 мл растворителя и вновь растирают в течение минуты, затем опять сливают в воронку. Эту манипуляцию повторяют 2-3 раза, затем переносят на фильтр всю растертую массу, уплотняют ее палочкой и отсасывают. Ступку ополаскивают несколько раз растворителем, выливая его на уплотненный материал в воронку, где ему дают по­стоять 2-3 минуты, после чего отсасывают. Промывание ведут до тех пор, пока стекающий раствор не станет бесцветным. Затем эк­стракт переносят в мерную колбу на 50 мл, ополаскивая несколько раз Бунзеновскую колбу и выливая в мерную. Вытяжку доводят до черты растворителем.

Колориметрирование раствора производят на фотоэлектроколориметре с красным светофильтром. Если жидкость окрашена в интенсивно зеленый цвет, ее необходимо разбавить, так как при больших концентрациях величины на ФЭКе могут выходить за пре­делы разрешающей способности прибора.

Для пересчета хлорофилла на стандартные величины использу­ют раствор Гетри, который готовится следующим образом: 1) 1 %-ый раствор CuSO4 • 5Н2О (берут только синие кристаллы), 2) 2 %-ый раствор К2Сr2О7, 3) 7 %-ый раствор аммиака (на 7 мл 18 %-го ам­миака надо взять 11 мл воды).

Для изготовления стандарта в мерную колбу емкостью 100 мл точ­но отмеривают растворы (CuSO4 • 5Н2О – 28,5 мл, К2Сr2О7 – 50 мл, NH4ОH – 10 мл), доводят дистиллированной водой до метки и пере­мешивают.

Раствор Гетри по окраске колориметрически эквивалентен ра­створу кристаллического хлорофилла по содержанию последнего 85 г в литре.

Методом разбавления стандартного раствора строят калибровоч­ную кривую, где по оси абсцисс откладывают содержание хлорофил­ла (мг/л), а по оси ординат – оптическую плотность. Калибровочную кривую строят от концентрации 0,085 мг/л (1 мл исходного раство­ра и 99 мл воды) до 7,65 мг/л
(90 мл исходного раствора и 10 мл воды).

Измерения на ФЭКе производят несколько раз, затем вычисляют среднее. По полученным данным определяют концентрации хлоро­филла в опытных образцах по калибровочной кривой. Затем вычис­ляют количество хлорофилла в мг/г листа (по сырой или сухой массе). В насаждениях сосны оно колеблется от 0,08 до 0,14 мг/г. Можно так­же выразить количество хлорофилла в процентах (0,3-1,3 % абсолют­но сухой массы листа).

Схема записи результатов анализов

Опыт	Навес­ка, мг	Объем вытяж­ки, мл	Показа­ния ФЭКа	Количество хлорофилла по калибровочной кривой мг/50 мл	Содержание хлорофилла в листьях
					мг/г	%

Литература

1.  Практикум по физиологии растений / Под ред. . – М.: Колос, 1972.

2.  , Клейн исследования растений. – М.: Колос, 1974.

3.  И. и др. Практикум по экологии и охраны окружающей среды. – М.: Гуманит. изд. центр Владос, 2001.

4.  Биохимические методы. – М.: Наука, 1980.

Содержание

Введение ……………………………………………………………..	3
Работа № 1. Определение образования органического вещества в листьях растений в процессе фотосинтеза (по содержанию углерода) …………………………………………………………….	4
Работа № 2. Определение накопления органического вещества в биомассе растений и в почве ………………………………………..	7
Работа № 3. Определение расхода органического вещества растениями при дыхании ……………………………………………	10
Работа № 4. Определение устойчивости растений к высоким температурам ………………………………………………………...	13
Работа № 5. Определение температурного порога коагуляции белков цитоплазмы клеток разных растений ………………………	14
Работа № 6. Определение устойчивости клеток различных растений к обезвоживанию ………………………………………….	16
Работа № 7. Влияние низких температур на коагуляцию белков у растений ………………………………………………………………	17
Работа № 8. Определение устойчивости растений к засолению почвы и воздуха ……………………………………………………	19
Работа № 9. Определение устойчивости растений к сернистому газу (А), хлору (Б) и аммиаку (В). Выявление биоиндикаторов …	22
Работа № 10. Влияние солей тяжелых металлов на плазмолиз протоплазмы растительной клетки …………………………………	24
Работа № 11. Влияние солей тяжелых металлов на коагуляцию растительных белков ………………………………………………..	25
Работа № 12. Загрязнение пищевых продуктов нитратами и их определение в различных овощных культурах в зависимости от вида, сорта, органа, ткани …………………………………………..	27
Работа №13. Уменьшение содержания хлорофилла в листьях растений – биоиндикационный признак неблагоприятных ус­ло­вий среды. Определение хлорофилла фотометрически …………..	32
Литература …………………………………………………………...	36

УЧЕБНОЕ ИЗДАНИЕ

Слонов Людин Хачимович

ЭКОЛОГИЯ РАСТЕНИЙ

И ФОТОСИНТЕЗ

Методические указания

к лабораторным занятиям

Для специальности 020201 – Биология

Редактор

Компьютерная верстка

Корректор

В печать 20.05.2009. Формат 60х84 1/16.

Печать трафаретная. Бумага офсетная. 2.32 усл. п.л. 2.0 уч.-изд. л.

Тираж 100 экз. Заказ №

Кабардино-Балкарский государственный университет.

360004, 73

Полиграфический участок ИПЦ КБГУ

360004, 73.