Возможности фармакологической коррекции иммунной адаптации новорожденных различного гестационного возраста (стр. 2 )

Работа апробирована 7 июня 2006 года на межкафедральном заседании КГМУ.

Публикации

По материалам диссертации опубликовано 10 печатных работ, в том числе 1 статья в журнале, рекомендуемом ВАК.

Структура и объем диссертации

Диссертация изложена на 131 странице. Состоит из введения, обзора литературы, описания объема клинических наблюдений и методов исследования, 3 глав результатов собственных наблюдений и их обсуждения, выводов, практических рекомендаций и библиографического указателя литературы, включающего 146 работ отечественных и 50 работ зарубежных авторов.

Диссертация иллюстрирована 27 таблицами, 5 рисунками.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Структура проведенного исследования

Для определения наличия показаний к назначению фармакологической иммунокоррекции была проведена оценка клинико-лабораторных показателей и особенностей основных звеньев иммунной системы у 150 новорожденных различного гестационного возраста. Распределение детей на группы осуществлялось следующим образом (таблица 1).

I группа - 50 здоровых доношенных новорожденных детей с физиологическим течением периода адаптации были разделены на 2 подгруппы, из которых 25 детей без риска по развитию неонатальных инфекций (I А) и у 25 детей в анамнезе были факторы риска (I Б).

II группа - 50 недоношенных новорожденных, гестационного возраста 34-38 недель также разделили на 2 подгруппы: из них: – 25 детей с наличием факторов риска развития внутриутробного инфицирования, но без ее клинических проявлений (II А). И 25 детей с выявленными признаками внутриутробной инфекции в виде локально протекающих процессов (II Б).

III группа - 25 недоношенных детей, гестационного возраста 30-34.

Таблица 1

Распределение детей на группы в зависимости от гестационного возраста и наличия признаков инфицирования

группа	гестационный возраст	масса тела при рождении (М±σ)	факторы риска ВУИ	признаки ВУИ	признаки постнатальной инфекции	количество детей
I A	38-41 нед.	3384,0 ± 61,63 (3030,0/3830,0)	-	-	-	25
I Б	38-41 нед.	3290,0 ± 47,80 (2980,0/3600,0)	+	-	-	25
II A	34-38 нед.	2475,0 ± 34,66 (2250,0/2700,0)	+	-	-	25
II Б	34-38 нед.	2450,0 ± 38,52 (2200,0/2700,0)	+	+	+	25
III	30-34 нед.	1835,0 ± 40,83 (1570,0/2100,0)	+	+	+	25
IV	28-30 нед.	1275,0 ± 34,66 (1050,0/1500,0)	+	+	+	25

Примечание: Здесь и в последующих таблицах указаны средние арифметические показатели (М) ± среднеквадратичное отклонение (σ).

IV группа – 25 недоношенных детей гестационного возраста 28-30 недель. У всех матерей из групп III и IV встречались осложнения в течение беременности и у всех детей при рождении были выявлены признаки внутриутробной и постнатальной инфекционной патологии.

На следующем этапе работы при оценке сравнительной эффективности традиционной антибактериальной терапии и ее комбинации с иммуномодулирующими средствами различного механизма действия у недоношенных детей нами применялся препарат ликопид, являющийся синтетическим химическим налогом фрагмента клеточной стенки большинства бактерий – глюкозаминил-мурамилдипептида, обладающий индукторным действием на иммунный ответ и средство заместительного действия – пентаглобин (иммуноглобулин для внутривенного введения). Ликопид применяли в дозе 0,5 мг (1/2 таблетки) 2 раза в день в течение 7-10 дней, пентаглобин - 3-5 мг/кг массы тела внутривенно капельно 3 дня подряд.

В исследование было включено 90 детей гестационного возраста 28-30 и 30-34 недель по 45 детей соответственно с осложнением ранней адаптации в виде бактериальных инфекций стафилококковой, стрептококковой, клебсиеллезной, энтерококковой этиологии. Структура инфекционной патологии у детей представлена в таблице 2.

Таблица 2

Структура инфекционной патологии у детей

признаки инфицирования	II Б	III	IV
абс.	%	абс.	%	абс.	%
гнойный конъюнктивит	10	40	5	20	6	24
везикулопустулез	6	24	2	8	1	4
омфалит	7	28	4	16	5	20
пузырчатка новорожденных	5	20	3	12	4	16
пневмонии	-	-	18	72	25	100
сочетанная бактериальная инфекция	12	48	22	88	25	100

В каждой возрастной группе в качестве контроля использовали по 15 детей, получавших традиционную терапию, которая включала антибиотики широкого спектра действия аминогликозиды (амикацин) и цефалоспорины (цефтриаксон, клафоран, фортум, медоцеф), инфузию глюкозо-солевых растворов, витамины в течение 15 дней.

В основной группе каждой возрастной категории на фоне аналогичной контролю традиционной терапии назначался пентаглобин или ликопид (по 15 детей 28-30 и 30-34 недель гестации). Включение детей в основную и контрольную группы происходило случайным образом. Оценка эффективности проводилась по клиническим и лабораторным данным до начала терапии и по окончании ее проведения.

При обследовании проводили: сбор соматического и акушерско-гинекологического анамнеза матерей с оценкой факторов риска развития осложнений в раннем периоде адаптации, а так же динамическое общеклиническое наблюдение за новорожденными детьми с оценкой общего состояния и основных патологических симптомов.

Лабораторное и инструментальной обследование

Объектом обследования была пуповинная и периферическая кровь на 7 сутки жизни и в возрасте 1 месяца. Проводился контроль общего анализа крови с подсчетом лейкоцитарного индекса интоксикации и индекса сдвига лейкоцитов (, , 1983; , 1983).

Фенотипирование субпопуляций лимфоцитов пуповинной и периферической крови проводилось непрямым иммунопероксидазным методом с использованием в качестве первых антител – моноклональные антитела (ТОО «Сорбент», г. Москва) к кластерам дифференцировки СD3 (общие Т-лимфоциты), CD4 (Т-хелперы), CD8 (цитотоксические клетки), CD20 (В-лимфоциты) методом непрямой мембранной иммунофлуоресценции, для регистрации пероксидазной активности использовали диаминобензидиновый метод (, 1999).

Антитела класса IgG, IgM и IgA в пуповинной и периферической крови у новорожденных различного гестационного возраста определяли методом радиальной иммунодиффузии по Y. Mancini (1965).

С целью определения функциональной активности нейтрофилов изучали показатели фагоцитоза суспензии латекса (фагоцитарный показатель, фагоцитарное число) по методу описанным , (1972), а так же в спонтанной и стимулированной зимозаном реакциях восстановления нитросинего тетразолия (НСТ-тест) по проценту активных фагоцитов. Фагоцитарный резерв нейтрофилов оценивали по разности между значениями стимулированного и спонтанного НСТ-теста (, 1986). При определении индекса активации нейтрофилов (ИАН) анализировали интенсивность реакции каждого нейтрофила.

Статистическая обработка полученных результатов проводилась путем вычисления средней арифметической и среднего квадратичного отклонения с помощью программного комплекса «Microsoft® Office 2003». Достоверность различий сравниваемых показателей определяли с помощью критерия Стьюдента (, 1974).

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

При оценке анамнестических данных среди 10 наиболее часто встречающихся факторов нами были выделены 4 наиболее значимых: гестозы, хроническая фетоплацентарная недостаточность, хроническая внутриутробная гипоксия плода и угрозы прерывания беременности (рисунок 1). При этом выявлено, что у недоношенных детей (группы II А, II Б, III, IV) частота встречаемости этих факторов растет с уменьшением гестационного возраста, и в группе глубоко недоношенных детей (группа IV) в 4 раза превышает показатели частоты встречаемости этих факторов по сравнению с доношенными детьми (группа I Б).

Эти данные позволяют рекомендовать выделение групп повышенного риска рождения детей низкого гестационного возраста с осложненным течением постнатальной адаптации, особенно при наличии в анамнезе сочетания всех 4 факторов для своевременной выработки адекватной тактики профилактических и лечебных мероприятий.

Рисунок 1. Структура анамнестических факторов риска.

Примечание: На этом рисунке «*» обозначает достоверность различий величин по отношению к контрольной группе IБ (р‹0,05).

После рождения ребенка наиболее доступным критерием оценки нарушений процесса адаптации является общеклинический анализ крови, отражающий реакцию на все патологические процессы организма (, 1997). Поэтому при оценке особенностей адаптации новорожденных различного гестационного возраста нами прежде всего изучались основные гематологические показатели в динамике.