Флавононолы отличаются от флавонола отсутствием двойной связи между углеродами во 2-м и 3-м положениях. ОН-группа, как и у флавонола, находится в 3-м положении. Скелет флавонола составляет гликозид аромадендрин, содержащийся в листьях эвкалипта.
К флавоноидам относятся производные халкона, катехины, антоцианидины, ауроны. Катехины относятся к полифенолам, входят в состав конденсированных дубильных веществ. Катехины представляют собой наиболее восстановленные флавоноидные соединения. Многие красные и синие окраски цветков с различными оттенками обусловлены присутствием антоцианидинов. В зависимости от рН среды окраска цветков меняется. В кислотной среде они образуют розовую, красную окраску, в щелочной среде – от голубой до синей с разными оттенками. Ауроны имеют разнообразную структуру. Они встречаются в растениях семейства астровых. В растениях присутствуют в форме гликозидов.
Изофлавоноиды в растениях встречаются как производные изофлавона.
Генистеин – 5,7,4-триокси-изофлавон и даидзеин – 5,7,3,4-тетраокси-изофлавон содержатся в створках фасоли и др. растений сем. Бобовых.
Формононетин – 7,4-метокси-изофлавон и его 7-глюкозид-ононин содержатся в корнях стальника.
формононетин
Другие классы флавоноидов
1. Ксантоны.
Алпизарин и его 6-С-гликозид – мангиферин содержатся в траве золототысячника и копеечника альпийского.
2. Флаволигнаны – силибин, силимарин содержатся в плодах расторопши пятнистой (остро-пестро).
Физические свойства
Катехины, лейкоантоцианидины, флаванонолы, изофлавоны – бесцветные; флаваноны, флавоны, флавонолы – желтые; халконы и ауроны – оранжевые; антоцианидины в зависимости от реакции среды красные, синие или фиолетовые аморфные или кристаллические вещества, без запаха, горького вкуса, с определенной температурой плавления (гликозиды – 100-180°С, агликоны до 300°С).
Растворимость. Гликозиды, катехины и лейкоантоцианидины хорошо растворимы в воде, этаноле и метаноле различной концентрации, не растворимы в органических растворителях (диэтиловом эфире, хлороформе, ацетоне). Свободные агликоны, за исключением катехинов и лейкоантоцианидинов, не растворимы в воде, но хорошо растворимы в этаноле, метаноле и других органических растворителях (диэтиловом эфире, хлороформе, ацетоне). Все флавоноиды хорошо растворимы в пиридине, диметилформамиде и щелочах.
Все флавониды оптически активны, способны флюоресцировать в УФ-свете, имеют характерные УФ-спектры, характеризующиеся наличием 2-х максимумов поглощения, ИК-спектры.
Химические свойства
Химические свойства обусловлены особенностью строения флавоноидов: наличием ароматического и пиранового колец, функциональных групп.
1. Гликозиды подвергаются ферментативному и кислотному гидролизу до агликонов и cахаров. O-гликозиды гидролизуются легко, С-гликозиды – только в жестких условиях смесью Килиани (смесь концентрированных хлористоводородной и уксусной кислот).
2. Благодаря кольцам А и В флавоноиды способны:
– образовывать комплексные соединения с солями металлов (железа, алюминия, циркония). С солями железа в зависимости от количества гидроксильных групп образуются соли от зеленой, синей до коричневой окраски, с солями алюминия – желтой, с желто-зеленой флюоресценцией;
– вступать в реакцию азосочетания с солями диазония с образованием азокрасителя.
3. Флавоноиды, содержащие пирановый цикл (флавоны и флавонолы) способны:
– восстанавливаться атомарным (свободным) водородом в кислой среде, полученным по реакции взаимодействия кислоты с металлическим магнием или цинком, до антоцианидинов (проба Синода или цианидиновая проба);
– растворяться в щелочах с образованием растворимых в воде фенолятов.
4. Флавоноиды, содержащие пирановый цикл (катехины, лейкоантоцианидины), способны легко окисляться до производных флавона и флавонола.
5. Флавоноиды при сплавлении в жестких условиях со щелочью распадаются на составные части, что используется для установления структуры.
Физические и химические свойства используются в анализе сырья на подлинность и доброкачественность.
АНАЛИЗ ЛЕКАРСТВЕННОГО РАСТИТЕЛЬНОГО СЫРЬЯ, СОДЕРЖАЩЕГО ФЛАВОНОИДЫ
Учитывая растворимость агликонов и гликозидов флавоноидов в спирте, проводят экстракцию флавоноидов из сырья метанолом или этанолом. Спиртовое извлечение упаривают и разбавляют водой, после охлаждения неполярные вещества (белки, жирные масла, стерины, хлорофилл) выпадают в осадок, который отделяют. Часто для удаления сопутствующих веществ сырье сначала обрабатывают хлороформом, т. е. "обезжиривают", а затем уже экстрагируют спиртом различной концентрации. Спиртовое извлечение исследуют. Проводят качественный и количественный анализ.
Качественный анализ
Для установления подлинности используют в анализе качественные реакции и хроматографическое исследование.
Качественные реакции
1. Проба Синода (цианидиновая проба). Реакция основана на способности окисленных форм флавоноидов восстанавливаться водородом в момент выделения до антоцианидинов. В кислой среде образуются оксониевые соли, окраска которых зависит от структуры флавоноида (, 2002).
Флавоны дают оранжево-красные, флавонолы от розовой до малиновой окраски соли.
Антоцианидины, халконы и ауроны в кислой среде сразу дают окрашенные оксониевые соли.
Эта реакция приводится в ГФ Х1 изд. (2 том, 1990) для установления подлинности цветков бессмертника песчаного.
2. Проба Брианта. Проводится в случае положительной цианидиновой пробы.
Эта реакция дает возможность сделать заключение о присутствии в сырье гликозидов и агликонов.
В пробирку, где проводилась проба Синода добавляют октанол и встряхивают, если:
– окраска перешла в октанол, то в сырье содержатся только агликоны, которые растворимы в октаноле;
– окраска осталась в водной фазе – в сырье только гликозиды;
– окрасились оба слоя – в сырье присутствуют флавоноиды как в виде гликозидов, так и в виде агликонов.
3. Реакция с солями железа (хлоридом окисного железа), образуются комплексные соединения окрашенные в черно-синий цвет, если флавоноиды – триоксипроизводные и в зеленый, если диоксипроизводные.
4. Реакция с 2-5%-ным спиртовым раствором алюминия хлорида. Образуются хелатные комплексы за счет водородных связей, возникающих между карбонильной и оксигруппой, желтого цвета с желто-зеленой флюоресценцией.
Эта реакция приведена в ГФ Х1 изд. (2 том, 1990) для подтверждения подлинности сырья зверобоя, горца перечного и птичьего. Аналогично образуются комплексы с солями циркония.
5. Реакция с 1%-ным раствором основного ацетата свинца. Антоцианидины дают синий аморфный осадок. Флавоны, халконы и ауроны – осадки ярко-желтого цвета.
6. Реакция с 10%-ным спиртовым раствором щелочи с образованием фенолятов желтого цвета на флавоны и флавонолы. Антоцианидины образуют со щелочами соли от синего до оливково-зеленого цвета.
7. Реакция азосочетания с диазосоединениями. Образуется азокраситель оранжевого, красного или вишнево-красного цвета.
8. Борно-лимонная реакция с реактивом Вильсона (по 0,5 г борной и лимонной кислот в метаноле).
Реакция отличия флавоноидов от фуранохромонов. Флавоноиды дают комплексы с борной кислотой желтой окраски с ярко-желтой флюоресценцией, которые не разрушаются лимонной кислотой.
Хроматографическое исследование
Для идентификации и разделения флавоноидов используют метод бумажной (БХ), колоночной хроматографии и хроматографии в тонком слое сорбента (ТСХ). Флавоноиды идеально подходят для хроматографического анализа благодаря их различной растворимости, сорбционной способности, а также характерным окраскам самих веществ в видимом и фильтрованном ультрафиолетовом свете до и после проявления различными хромогенными реагентами.
Используют различные системы растворителей:
– БХ чаще всего БУВ (бутанол - уксусная кислота - вода) 4:1:5; 4:1:2
– ТСХ – хлороформ-метанол 8:3; 8:2
Идентифицируют флавоноиды по характерному свечению на хроматограммах в УФ-свете и после проявления хромогенными реактивами.
Катехины и лейкоантоцианидины не флюоресцируют. Гликозиды флавонов и изофлавонов флюоресцируют голубым или синим светом, флавонолов – темно-коричневым или черным, агликоны флавонов – коричневым, флавонолов – желтым, халконы и ауроны имеют желтую или оранжевую флюоресценцию.
Для проявления флавоноидов на хроматограммах используют:
1. Пары аммиака 25%-ного. Происходит усиление окраски пятен в УФ-свете или изменение окраски до желтой.
2. 2-5%-ный спиртовый раствор алюминия хлорида – желто-зеленая флюоресценция в УФ-свете, в видимом свете – желтое окрашивание.
|
Из за большого объема этот материал размещен на нескольких страницах:
1 2 3 4 5 6 7 8 9 |
