Автореферат Микробиологические свойства потенциальных патогенов человека рода Leptotrichia (стр. 1 )

На правах рукописи

       

МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА ПОТЕНЦИАЛЬНЫХ

ПАТОГЕНОВ ЧЕЛОВЕКА

РОДА LEPTOTRICHIA

03.02.03 – микробиология

       

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени

кандидата медицинских наук

Владивосток – 2010

Работа выполнена в Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Дальневосточный государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию» (ГОУ ВПО «ДВГМУ Росздрава»)

Научный руководитель: 

кандидат медицинских наук, доцент 

Научный консультант: 

доктор медицинских наук, профессор 

Официальные оппоненты: 

доктор медицинских наук, профессор   

руководитель лаборатории молекулярных основ патогенности бактерий ФГУН НИИ эпидемиологии и микробиологии СО РАМН

кандидат медицинских наук, доцент 

доцент кафедры микробиологии, вирусологии и иммунологии ГОУ ВПО «Владивостокский государственный медицинский университет Росздрава», главный бактериолог Приморского края, г. Владивосток

Ведущая организация:  Федеральное государственное учреждение науки  Санкт-Петербургский НИИ эпидемиологии и микробиологии им. Пастера Роспотребнадзора

Защита состоится  « 01 »  июля  2010 года  10 00 часов

на заседании диссертационного совета ДМ. 208.007.02 при Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Владивостокский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию Российской Федерации» (ГОУ ВПО «ВГМУ Росздрава») г. Владивосток, ГСП, пр. Острякова, 2.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке  ГОУ ВПО «ВГМУ Росздрава» г. Владивосток, пр. Острякова, 2 (корпус 3).

Автореферат разослан  « ___  »  мая  2010 года. 

Ученый секретарь диссертационного совета,

доктор медицинских наук, доцент  //

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность исследования. Микрофлора полости рта является высокочувствительной индикаторной системой и нарушение биологического равновесия между макроорганизмом и микроорганизмами нормальной микрофлоры может приводить к развитию патологических процессов. (, 2009; , , 2002; , 1996; , , 1987). Одной из актуальных проблем современной стоматологии продолжают оставаться воспалительные заболевания слизистых оболочек полости рта (, 2001; Engelkirk P. G. et al 1992).  Этиологическими агентами этих процессов являются условно-патогенные микроорганизмы, большинство которых – представители нормальной микрофлоры организма человека (, 1994;  и соавт. 1988 г.; и соавт., 1989). Микроорганизмы полости рта становятся источником потенциально патогенных возбудителей кариеса, гингивита, стоматита, острых воспалительных заболеваний слизистых полости рта (, 2007; , , 1987). Патогенные и условно-патогенные микроорганизмы могут способствовать изменению защитных сил организма и приводить к возникновению воспалительных заболеваний полости рта ( 2006; 2004; , 2002; 2001).

Актуальность настоящей работы определяется распространием в регионе Хабаровского края РФ воспалительных заболеваний слизистых оболочек полости рта /СОПР/, вызванных Leptotrichia buccalis и недостаточной изученностью этих микроорганизмов. Рост числа больных, длительность  заболевания, устойчивость к терапии, требуют детального изучения биологических особенностей бактерий рода Leptotrichia, подтверждения их этиологической значимости в развитии лептотрихиозов как локальной Leptotrichia-инфекции. Анализ литературы показал, что отсутствуют данные о частоте выделения возбудителя лептотрихиоза, нет четкого критерия, указывающего на диагноз лептотрихиоз слизистых оболочек полости рта. В практических лабораториях края не ведутся бактериологические исследования лептотрихиозов в связи с отсутствием алгоритма диагностики заболевания. Биологические особенности рода  Leptotrichia  в регионе изучены мало, данных о колонизации полости рта, факторах патогенности микроорганизмов, изучение чувствительности к антибиотикам и антисептикам не обнаружено.

Данные об иммунобиологических изменениях при лептотрихиозе слизистых оболочек полости рта /ЛСОПР/ противоречивы.

Из вышесказанного следует, что исследование проблемы лептотрихиоза в нашем регионе, состояния иммунного статуса больных ЛСОПР, и, прежде всего, биологических характеристик Leptotrichia buccalis, является высоко значимым и актуальным. Поэтому мы сочли целесообразным исследовать штаммы Leptotrichia buccalis, циркулирующие в регионе Хабаровского края.

Цель исследования состояла в углублённом изучении биологических особенностей потенциальных патогенов рода Leptotrichia, выявлении их этиологической значимости в патологии полости рта.

       Для достижения поставленной цели были определены следующие задачи.

Задачи исследования:

Выявить роль представителей рода Leptotrichia в патологии полости рта с учётом их естественного ресурса и таксономии. Исследовать частоту встречаемости лептотрихиозов слизистых оболочек полости рта, выяснить взаимосвязь Leptotrichia buccalis со степенью активности кариеса зубов у детей и патологией желудочно-кишечного такта. Изучить этапы колонизации анаэробами слизистых оболочек полости рта у детей, распространённость Leptotrichia buccalis среди населения региона, разработать способ культивирования Leptotrichia. Исследовать роль иммунной системы в реализации механизмов колонизации и распространённости Leptotrichia в биотопе полости рта. Определить фенотипический профиль Leptotrichia buccalis, факторы патогенности, персистентности, чувствительность к антимикробным химиопрепаратам.

Научная новизна работы

1. Впервые формально обосновано употребление термина «лептотрихиоз» слизистых оболочек полости рта для определения локальных Leptotrichia-инфекций.

2. Исследованы этапы заселения Leptotrichia и другими анаэробами полости рта новорожденных и детей в регионе, впервые изучена и доказана всеобщая распространённость Leptotrichia buccalis среди населения Хабаровского края.

3. Разработан новый способ культивирования Leptotrichia buccalis на искусственной питательной среде «Уриселект».

4. Выделены региональные штаммы Leptotrichia buccalis, изучены их факторы персистенции, адгезивный потенциал, исследована продукция ими в-лактамаз. Определена региональная антибиотикограмма лептотрихий. Показано, что высокая биологическая пластичность микроорганизмов, колонизирующих слизистые оболочки, и высокая чувствительность слизистых к воздействию микроорганизмов позволяют использовать изменения в их состоянии как критерий оценки риска заболевания лептотрихиозом.

5. Выявлена взаимосвязь Leptotrichia buccalis с риском развития суб/декомпенсированной степеней активности кариеса зубов у детей и повышением риска развития патологии желудочно-кишечного тракта: гастродуоденита, язвенной болезни желудка и 12-ти перстной кишки.

6. Проведено сравнительное изучение факторов патогенности (адгезивной, антилизоцимной, антикомплементарной, антиинтерфероновой активности) у штаммов Leptotrichia buccalis, выделенных в виде монокультур и ассоциаций, при исследовании микробиоценоза полости рта у больных ЛСОПР.

7. Выявленные изменения иммунного статуса у больных лептотрихиозами позволяют оценить реализацию механизмов колонизации и распространённости лептотрихий в биотопе полости рта, обосновать критерии развития лептотрихиоза, прогнозирования рецидивирующих форм заболевания.

Практическая значимость:

Результаты исследований позволили обосновать необходимость микробиологического исследования микрофлоры полости рта для выявления ранних нарушений микробиоценоза организма в условиях развития лептотрихиоза. В ходе проведенных исследований от больных лептотрихиозами слизистых оболочек полости рта выделены региональные изоляты бактерий Leptotrichia buccalis, изучены их морфологические, культуральные, колонизационные свойства, дана оценка чувствительности к антибактериальным химиопрепаратам.

- Доказана этиологическая роль бактерий Leptotrichia buccalis как возбудителей локальных Leptotrichia-инфекций - лептотрихиозов СОПР.

- Обосновано использование и внедрены в работу учреждений Министерства здравоохранения края термин Leptotrichia buccalis v. s. Leptothrix buccalis и термин «лептотрихиоз» v. s. «лептотрихоз».

- Изучение биологических свойств Leptotrichia buccalis можно использовать для обнаружения ранних признаков изменения защитных сил организма, оценки степени тяжести поражения слизистых при лептотрихиозах, риска перехода ЛСОПР в хроническую форму и коррекции выявленных нарушений у больных.

- Дана комплексная оценка изменения показателей иммунного статуса  при острых и хронических формах лептотрихиозов СОПР. Полученные результаты являются основанием для включения иммунобиологических критериев в прогнозирование хронизации инфекционного процесса и/или развития лептотрихиозов у иммунокомпрометированных лиц.

- Разработаны методические рекомендации по оценке адгезивной активности лептотрихий, которые внедрены в работу ГУЗ Хабаровского края и помогают в диагностике лептотрихиозов СОПР.

- Зарегистрированы 2 заявки на изобретение в ФИПС: «Способ лечения хронических рецидивирующих воспалительных заболеваний, вызванных лептотрихиями», № 000/14 (045691) от 01.01.2001 г. и ««Способ культивирования Leptotrichia на искусственной питательной среде «Уриселект», № 000 (014610) от 01.01.2001 года, 7 рационализаторских предложений.

- Результаты научно-исследовательской работы внедрены в работу 8 государственных учреждений Министерства здравоохранения Хабаровского края, Военного госпиталя МВД РФ г. Хабаровска, ХФ ДНЦ ФПД СО РАМН НИИ Охраны материнства и детства.