Методическая разработка по теме: «Питательные среды» (стр. 1 )

Государственное автономное образовательное учреждение

среднего профессионального образования

ЭНГЕЛЬССКИЙ МЕДИЦИНСКИЙ КОЛЛЕДЖ

Методическая разработка

по теме: «Питательные среды»

Специальность: 060604 «Лабораторная диагностика»

Дисциплина: «Теория и практика лабораторных

микробиологических исследований»

Рассмотрено  Составлена преподавателем

На заседании ЦМК  дисциплины: «Теория и практика

«Лабораторная диагностика»  лабораторных микробиологических

Протокол №_____  исследований»

от «___»  _________2013 г. 

Председатель ЦМК

________

Энгельс 2013 г.

Пояснительная записка

Питательные среды являются основой микробиологической работы, и их качество нередко определяет результаты всего исследования. Среды должны создавать оптимальные (наилучшие) условия для жизнедеятельности микроорганизмов. Питательные среды - это субстраты, используемые для выращивания микроорганизмов в лабораториях или в производственных условиях, их используют для выделения чистых культур микроорганизмов, определения культуральных и биохимических свойств, накопления биомассы.

Цели:

ОК. 2; 4; 6; 8; 9; 13, ПК. 4.1-4.4

1. Учебная: получить знания об типах питания микробной клетки, определения и назначения питательных сред, требования, классификация, этапы приготовления, значение лабораторной посуды для приготовления среды, хранение, контроль качества.

2. Развивающая: развить умения при подготовке питательных сред, определение рН методом Михаэлиса и индикаторными полосками.

3. Воспитательная: приучить к аккуратной работе самостоятельно с соблюдением ТБ при эксплуатации электрических приборов.

После изучения темы студент должен:

Знать:

- организацию делопроизводства;

- состав простых и сложных питательных сред;

- режимы стерилизации.

Уметь:

- вести учетно-отчетную документацию;

- осуществлять подготовку реактивов, лабораторного оборудования и аппаратуры для исследования;

- проводить утилизацию отработанного материала, дезинфекцию и стерилизацию, используемой в лаборатории посуды, инструментария, средств защиты рабочего места и аппаратуры.

Содержание

Стр.

1. Учебная карта работы преподавателя и студента на занятии………………4

2. Общая характеристика питательных сред……………………………………5

3. Классификация питательных сред по физическому состоянию……………6

4. Классификация питательных сред по составу……………………………….6

5. Классификация питательных сред по назначению…………………………..7

6. Требования, предъявляемые к питательным средам………………………...7

7. Универсальные плотные питательные среды………………………………..9

8. Универсальные жидкие питательные среды……………………………….10

9. Элективные питательные среды……………………………………………..12

10. Дифференциально-диагностические (индикаторные) среды…………….20

11. Консервирующие (транспортные) питательные среды…………………..25

12. Тестовый контроль для закрепления материала…………………………..26

13. Индивидуальные дидактические карточки………………………………..33

14. Расчетные задачи……………………………………………………………35

15. Список используемых источников………………………………………...36

Учебная карта работы преподавателя и студента на занятии

№ п/п	Название этапа	Описание деятельности преподавателя	Описание деятельности студента	Время
1.	Организационный момент.	Приветствие, проверка присутствующих, внешний вид студентов, проверка готовности студентов к занятию, заполнение журнала.	Подготовка к занятию: наличие дневников, халата, шапочки, сменной обуви.	3
2.	Вступительное слово преподавателя.	Разбираются основные цели занятия на уровне знаний, умений. Доводится до студентов план занятия, который записывается учащимися в дневник.	Прослушать и записать название темы, её актуальность, цели и план.	5
3.	Фронтальный опрос.	1. Фронтальный опрос по теме. 2. Индивидуальная работа с дидактическими карточками, предложенным заданием. 3. Проверка дневников с целью правильного расчета навески.	Отвечают на вопросы, заполняют дидактические карточки, решают задачи с соответствующими записями в тетради.	20
4.	Работа над изучаемым материалом темы.	1. Демонстрация различных питательных сред. 2. Демонстрация определения рН.	Внимательно слушают и делают соответствующие записи.	20
5.	Самостоятельная работа студентов.	Сообщается задание.	1. Готовят рабочее место. 2. Рассчитывают и готовят простые и сложные питательные среды. 3. Определение рН. 4. Фильтрация. 5. Осветление. 6. Разлив. 7. Стерилизация. 8. Оформляют журнал регистрации.	95
6.	Итоговый контроль по теме.	Раздача тестов, таблиц, объяснение задания.	Решение тестов, заполнение таблиц, схем, составление графиков.	15
7.	Подведение итогов занятия.	Объяснение оценок с комментариями. Подведение итогов занятия.	Внимательно прослушать, сделать соответствующие выводы, принять рекомендации преподавателя.	15
8.	Задание на дом.	Домашнее задание с комментариями.	Запись домашнего задания в дневниках.	7

Общая характеристика питательных сред

Питательная среда должна содержать все вещества необходимые для роста микроорганизмов. Конструктивные и энергетические процессы у микроорганизмов крайне разнообразны, поэтому столь же разнообразны их потребности в питательных веществах. Следует отметить, что универсальных сред одинаково пригодных для роста всех без исключения микроорганизмов, не существует.

Основными компонентами любой питательной среды для культивирования микроорганизмов являются соединения углерода и азота. И именно эти соединения определяют специфичность подавляющего большинства питательных сред.

По потребностям в углероде микроорганизмы принято делить на две группы – автотрофы и гетеротрофы.

Автотрофные микроорганизмы способны в качестве единственного источника углерода использовать углекислоту – соединение, содержащее углерод в наиболее окисленной форме для этого в среду вносят бикарбонат натрия (NaHCO3) или карбонаты – углекислый кальций (CaCO3).

Для гетеротрофов среда должна содержать органическое соединение, такие как кислоты, спирты, углеводы, ароматические соединения.

Вторым основным компонентом питательной среды является источник азота, который входит в состав органических веществ клетки главным образом в восстановленной форме – в виде амино (-NH2) или имино (-NH) групп. Питательные среды для культивирования микроорганизмов, более требовательных к азоту и соответственно обладающих меньшими биосинтетическими способностями, должны включать одну, несколько или полный набор аминокислот, таких как глицин, аланин, пролин, лизин.

Наиболее требовательные микроорганизмы культивируют на питательных средах, содержащих белки или продукты их неполного расщепления – пептоны. Это смесь поли - и олигопептидов, аминокислот, органических азотных оснований.

Некоторые бактерии способны использовать в качестве единственного источника азота молекулярный азот – N2 (азотофиксаторы).

Многие микроорганизмы требуют наличия в среде так называемых факторов роста, к которым относятся витамины, пурины, аминокислоты.

Кроме источников углерода, азота и факторов роста микроорганизмам для построения веществ в клетки необходимы сера, фосфор и ряд других элементов. Все они должны содержаться в питательной среде в доступной для микроорганизмов форме.

Классификация питательных сред по физическому состоянию:

1. Жидкие – широко применяются для накопления биомассы или продуктов обмена, для исследования физиологии и биохимии микроорганизмов, а также для поддержания и сохранения в коллекции культур микроорганизмов плохо развивающихся на плотных средах.

2. Сыпучие – применяются в промышленной микробиологии для культивирования некоторых продуцентов физиологически активных соединений, а также в коллекциях для сохранения культур микроорганизмов (разваренное пшено, отруби, кварцевый песок пропитанный питательным раствором.

3. Плотные – используются для выделения чистых культур в диагностических целях для описания колоний для определения количества микроорганизмов, их антибиотической активности, для хранения культур в коллекциях. Плотной основой служит агар или желатин.

4. Полужидкие – среда Пешкова для изучения характера подвижности колоний микроорганизмов.

Классификация питательных сред по составу:

1. Натуральные (Естественные) - МПБ, солодовое сусло, дрожжевая среда, картофельная среда, почвенный экстракт – состоят из продуктов животного или растительного происхождения (овощные или фруктовые соки, животные ткани, молоко, мясо, кровь, почва) на натуральных средах хорошо развиваются многие микроорганизмы, поскольку такие среды содержат все компоненты необходимые для роста и развития, но есть и минусы. Имеют сложный, непостоянный химический состав и мало пригодны для изучения обмена веществ микроорганизмов, их используют в основном для поддержания роста культур микроорганизмов.

2. Синтетические – в состав среды входят лишь соединения определенного химического состава, взятые в точно указанных количествах. Синтетические среды широко используются при исследовании обмена веществ, физиологии и биохимии микроорганизмов для роста или усиления биосинтеза какого-либо продукта жизнедеятельности.

3. Полусинтетические – главным компонентом этих сред являются соединения известного химического состава – углеводы, соли аммония, нитраты, фосфаты. Однако в их состав всегда включаются вещества неопределенного состава, такие как дрожжевой автолизат, почвенный экстракт или гидролизат казеина, их используют в промышленной микробиологии для получения аминокислот, витаминов, антибиотиков