ОБЪЕКТИВИЗАЦИЯ ИССЛЕДОВАНИЙ КЛИНИЧЕСКИХ МАТЕРИАЛОВ МЕТОДАМИ ПАТОЛОГИЧЕСКОЙ АНАТОМИИ
, ., ,
Казахский Национальный медицинский университет им.
Больница скорой неотложной помощи г. Алматы
В статье представлены диагностические возможности морфологических исследований тканей аутопсийных и биопсийных материалов гистологическими, гистохимическими, иммуноморфологическими и цитологическими методами.
Ключевые слова: патоморфология, патогистология, гистохимические, цитологические и иммуноморфологические методы исследования.
Возможности патологической анатомии (патоморфологии) на современном этапе развития значительно обогатились благодаря современным методам исследования, что позволяет диагностировать патологические процессы макро-и микроскопически, получать новые научные факты, выявлять структурные основы общепатологических и частных процессов на различных уровнях: органном, тканевом, клеточном и субклеточном.
Актуально применение в морфологических исследованиях, кроме гистологического метода с использованием световой микроскопии, гистохимического, электронно-микроскопического, иммуноморфологического, цитологического и иммуногистохимического методов.
Топохимия нормальных и патологически измененных клеток и тканей, развивающаяся на основе микроскопической техники, является одним из прогрессивных направлений современной морфологии.
Особое значение в современной медицине имеет прижизненная морфологическая диагностика, которая хорошо прослеживается при исследовании биопсий, без которой трудно представить современную практическую и теоретическую медицину.
Постоянно возрастающее число биопсий обусловлено не только нарастающей хирургической активностью, но и совершенствованием методических возможностей морфологии. Широко используется открытая биопсия - инвазивный вид исследования при специальном иссечении кусочков ткани или органа в минимальном объеме с целью постановки диагноза.
В настоящее время современные виды прижизненной морфологической диагностики включают:
- Исследование операционного материала удаленных тканей органа или целого органа Эндоскопические, пункционные, аспирационные биопсии, трепанобиопсии Изучение соскобов эндометрия Цитологический метод с изучением клеточного материала, полученного путем соскоба, отпечатка.
Гистологические методы исследования с использованием световой микроскопии позволяют выявлять в клиническом материале такие общепатологические процессы как воспаление, дистрофия, некроз, расстройства крово - и лимфообращения, реакции регенерации и компенсации, различные типы опухолей, особенности и специфические проявления нозологических форм заболеваний.
Для обзорного и более детального исследования широко используются окраски срезов тканей и гистохимические реакции: окраска гематоксилином и эозином (рис. 1.), пикрофуксином по Ван Гизону, резорцин - фуксином по Вейгерту, суданом III, азур - 2 –эозином по Маллори (рис. 2). Специальными окрасками на нервную ткань являются: окраска толуидиновым синим по Нисслю, аммиачным серебром по Гросс - Бильшовскому и другие.
Особое место в морфологических исследованиях занимает гистохимия.
Методами гистохимического исследования возможно выявление в структурных компонентах клеток и тканей различных веществ и субстратов при многих заболеваниях и патологических процессах. При различных нозологических формах целесообразно применение адекватных окрасок и гистохимических реакций.
Гигантоклеточный метаморфоз Адгезия эритроцитов к интиме стенки артерии
нефроцитов при цитомегалии в легком. Фестончатость базальной мембраны.
Рисунок 1 - Окраска гематоксилином и эозином Рисунок 2 - Окраска по Маллори
Так, судан III выявляет липиды при атеросклерозе, жировой дистрофии органов, липомах, альциановый синий выявляет слизь, что имеет особое диагностическое значение при муковисцидозе, окраска по Бесту выявляет гликоген в почках при сахарном диабете, окраска по Перлсу выявляет соединения железа при гемосидерозе (рис. 3), генциан-виолет выявляет амилоид в органах при туберкулёзе и других хронических процессах, по Вейгерту выявляется фибрин при ДВС-синдроме, орсеин выявляет состояние эластических волокон (рис.4).
Накопление зерен гемосидерина Фрагментация эластических волокон
в легких при митральном стенозе
Рисунок 3 - Окраска по Перлсу Рисунок 4 - Окраска орсеином
на эластические волокна
В настоящее время иммуногистохимические исследования (ИГХ) являются незаменимыми в диагностике многих патологических процессов и заболеваний, в первую очередь, для верификации опухолей. Диагностика опухолей человека с помощью ИГХ основывается на фундаментальных особенностях опухолевого роста, к которым относится сохранение экспрессии функционирующих генов (для ряда белков) в условиях злокачественной трансформации клеток. Это проявляется в сходстве фенотипа опухолевых клеток и их нормальных аналогов.
Для решения диагностических проблем, касающихся функционирования генома клетки и наличия в ней чужеродной ДНК, применяется метод гибридизации in situ (FISH) - метод прямого выявления нуклеиновых кислот в клеточных структурах при сохранении морфологии исследуемых клеток и тканей. При ряде предопухолевых (дисплазия шейки матки, рецидивирующая папиллома гортани) и опухолевых заболеваниях (рак шейки матки, гортани, носоглоточный рак, некоторые виды лимфом) для определения течения заболевания и его прогноза является важным определение наличия ДНК вируса (вируса папилломы человека, вируса Эпштейна-Барр, цитомегаловируса) в клетках.
В иммуноморфологических исследованиях незаменим метод иммунофлюоресценции (прямой и непрямой), который выявляет комплексы антиген-антитело в тканях при аутоиммунных заболеваниях, а также циркулирующие в крови антитела (рис. 5, 6)
Свечение вставочных пластинок Свечение интерстиция миокарда в участках
кардиомиоцитов при аутоиммунном локализации комплексов антиген-антитело
миокардите при аутоиммунном миокардите
Рисунок 5 - Прямой метод Рисунок 6 - Непрямой метод
иммунофлюоресценции иммунофлюоресценции
Цитологический метод позволяет диагностировать патологические изменения при неинвазийном вмешательстве путем микроскопии отпечатков, что особенно актуально в диагностике острых респираторных заболеваний, заболеваний слизистых оболочек полости рта, мочеполового тракта (рис.7.) опухолевых процессах. Особенно важной является возможность экстренного взятия материала, а также неоднократные исследование мазков и отпечатков с выполнением повторных исследований.
Паренхиматозная дистрофия
с фокальным лизисом цитоплазмы уротелиального эпителия
Рисунок 7 - Окраска по Папаниколау (цитология)
Таким образом, многообразие существующих методов патоморфологии и их адекватное и своевременное применение в клинических и экспериментальных исследованиях гарантирует объективность, глубину и достоверность ожидаемых и получаемых результатов.
Литература:
П. Казымбет, М. Рысулы, , и др. Атлас по гистологии, цитологии и эмбриологии. Астана-Москва 2005, 399 с. , , Цитологическая диагностика заболеваний пищевода, желудка и кишки. Москва – Алматы 2011, 234 с. Э. Пирс. Гистохимия (теоретическая и прикладная), перевод с англ. Изд. иностр. лит. Москва 1962 г. 950 с.
ПАТОЛОГИЯЛЫ? АНАТОМИЯ ?ДІСТЕРІ МЕН КЛИНИКАЛЫ? МАТЕРИАЛДАРДЫ ЗЕРТТЕУДІ ТОЛЫ? БА?АЛАУ
, .,
Т?йін: Ма?алада аутопсиялы? ж?не биопсиялы? материалдарды? гистологиялы?, гистохимиялы?, иммунологиялы?, цитологиялы? ?дістер ар?ылы морфологиялы? зерттеу ж?ргізу м?мкіндігі ?арастырыл?ан.
Т?йінді с?здер: патоморфология, патогистология, гистохимия, цитология, иммуноморфология.
OBJECTIFICATION OF STUDIES OF CLINICAL MATERIALS BY PATHOLOGIC ANATOMY METHODS
Ismailova J. S., Shumkova E. N. , Sactaganova M. K
SAMMARY: Article represents diagnostic capabilities of morphological researches of autopsy and biopsy tissues by histological, histothemical, immunomorphological and cytological methods.
Key words: pathologic anatomy, patohistology, histochemistry, cytology, immunology.
