Лабораторная работа 9
Витамин A (антиксерофтальмический)
Витамин A – это группа веществ с общим биологическим действием: ретинол, дегидроретинол, ретиналь, ретиноевая кислота. Витамин А, а также его синтетические и природные аналоги являются обязательными участниками процессов светового и цветового восприятиия, пролиферации и дифференцировки клеток, а также эмбрионального морфогенеза.
Витамин А – это один из основных природных жирорастворимых антиоксидантов. Участвует в процессах размножения, роста и дифференцировки эпителиальной и костной тканей, синтезе стероидных гормонов (включая прогестерон), сперматогенезе, является антагонистом тироксина. Ретинол участвует в реакциях синтеза зрительных пигментов сетчатки, оказывает гипохолестеролемический и антиатеросклеротический эффекты. Ретиноевая кислота обладает лишь частичной активностью витамина А: она не участвует в процессах размножения клеток и фоторецепции, однако в процессах клеточной дифференцировки активность ретиноевой кислоты может в 10 раз превышать активность ретинола.
Каротиноиды – это природные предшественники витамина А, вместе с тем некоторые из них обладают собственной биологической активностью. В частности, лютеин и зеаксантин являются компонентами антиоксидантной системы сетчатки, защищают глаза от повреждающего действия ультрафиолетового света, компьютерного излучения, предупреждают развитие катаракты, снижают риск дегенерации желтого пятна.
Оценка обеспеченности организма витамином А
Определение концентрации ретинола и каротина в сыворотке крови (норма 0,4-0,5 мг/л и 0,6-1,6 мг/л, соответственно). Снижение концентрации ретинола до 0,2-0,3 мг/л обычно сопровождается развитием фолликулярного гиперкератоза, а снижение до 0,05-0,2 мг/л приводит к ухудшению темновой адаптации и патологическому изменению электроретинограммы. Поскольку запасы витамина А в печени способны в течение довольно длительного времени поддерживать концентрацию ретинола в сыворотке крови в пределах нормы, то при недостаточном поступлении витамина А с пищей определение концентрации ретинола в сыворотке является ненадежным показателем адекватного потребления его с пищей. Поэтому при необходимости оценки этого показателя следует использовать методы прямого исследования фактического рациона.
Повышена потребность в витамине А при дефиците цинка, инфекционных заболеваниях; работе, связанной с воздействием химических раздражителей на кожу и слизистые, а также связанной со значительным зрительным напряжением – шоферы, летчики, снайперы, пользователи компьютеров.
Качественные реакции на витамин A
Материалы, посуда, реактивы:
33% раствор треххлористой сурьмы в хлороформе (хранят в склянке из темного стекла, пригоден к употреблению через 6-8 часов после приготовления; срок годности – две недели);
концентрированная серная кислота;
ледяная уксусная кислота, насыщенная сульфатом железа (II);
уксусный ангидрид;
рыбий жир, медицинский; употребляют только свежий препарат, т. к. старый или прокипяченный рыбий жир практически лишены витамина А; или масляный раствор витамина А;
серная кислота, концентрированная (ρ 20= 1,836);
хлороформ;
пипетки;
сухие пробирки.
а) Реакция с треххлористой сурьмой
В сухую пробирку вносят 2-3 капли свежего рыбьего жира или масляного раствора витамина А и добавляют 1 мл раствора треххлористой сурьмы в хлороформе, перемешивают. Появляется синее окрашивание. В связи с тем, что развитию окраски мешает присутствие воды, рекомендуется в реакционную смесь добавить несколько капель уксусного ангидрида.
б) Реакция с сульфатом железа
В пробирку вносят 1-2 капли рыбьего жира или масляного раствора витамина А, добавляют 5-10 капель ледяной уксусной кислоты, насыщенной сульфатом железа. Появляется голубое окрашивание, переходящее в розово-красное.
в) Реакция с серной кислотой
Под воздействием концентрированной серной кислоты растворы витамина А приобретают сине-фиолетовую окраску, возникновение которой связано с водоотнимающим действием реактива. Окраска является нестойкой и быстро сменяется буроватой, вследствие образования липохрома.
1 каплю рыбьего жира растворяют в 20-25 каплях хлороформа, к раствору добавляют 1 каплю концентрированной серной кислоты и встряхивают. Появляется сине-фиолетовое окрашивание, которое вскоре переходит в красновато-бурое и бурое.
