Диагностика и лечение гиперпролиферативных процессов эндометрия у больных с микросателлитной нестабильностью и метилированием гена ESR (стр. 1 )

Диагностика и лечение гиперпролиферативных процессов эндометрия у больных с микросателлитной нестабильностью и метилированием гена ESR

ХАРЬКОВСКИЙ НАЦИОНАЛЬНЫЙ
МЕДИЦИНСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ

_________________________________________

На правах рукописи

Карташова

Марина Александровна

ДИАГНОСТИКА И ЛЕЧЕНИЕ ГИПЕРПРОЛИФЕРАТИВНЫХ ПРОЦЕССОВ ЭНДОМЕТРИЯ У БОЛЬНЫХ С МИКРОСАТЕЛЛИТНОЙ НЕСТАБИЛЬНОСТьЮ И МЕТИЛИРОВАНИЕМ гена ESR

14.01.01 – акушерство и гинекология

УДК 618.145-007.61-07-08

Диссертация

на соискание ученой степени

кандидата медицинских наук

Научный руководитель:

д. м.н., профессор

Харьков– 2015

СОДЕРЖАНИЕ

СПИСОК УСЛОВНЫХ СОКРАЩЕНИЙ ………………………………………3

ВВЕДЕНИЕ………………………………………………………………………..4

РАЗДЕЛ 1. Современный взгляд на проблему гиперпластических процессов эндометрия

1.1. Гиперпластические процессы эндометрия: патогенез, диагностика и лечение с учетом морфологических критериев и возраста ………………...11

1.2. Генетические исследования как биологическая основа патологических процессов в эндометрии...........................................................27

Микросателлитная нестабильность генома как генетический аспект при гиперплазии и раке эндометрия………………………..……….29 Метилирование гена ESR как эпигенетический аспект гиперпролиферативных процессов и рака эндометрия ……………….32

РАЗДЕЛ 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ 

2.1. Материалы исследования …………………………………………...38

2.2. Методы исследования ……………………………………………….50

РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

РАЗДЕЛ 3. ОПРЕДЕЛЕНИЕ НАЛИЧИЯ МИКРОСАТЕЛЛИТНОЙ НЕСТАБИЛЬНОСТИ ГЕНОМА, МЕТИЛИРОВАНИЯ ГЕНА ESR И ФЕНОТИПИЧЕСКИХ ОСОБЕННОСТЕЙ У БОЛЬНЫХ С ПОЛИПАМИ И  ГИПЕРПЛАЗИЕЙ ЭНДОМЕТРИЯ…………………………………….............62

РАЗДЕЛ 4. Изучение эффективности разных методов лечения больных с полипами и гиперплазией эндометрия в зависимости от наличия микросателлитной нестабильности генома и метилирования гена ESR…….88

РАЗДЕЛ 5. АНАЛИЗ И ОБОБЩЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЯ….116

ВЫВОДЫ ………………………………………………………………………140

Алгоритмы лечения больных с гиперпролиферативными процессами эндометрия ……………………………………………………………………..144

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ ИСТОЧНИКОВ ………………………….149

СПИСОК УСЛОВНЫХ СОКРАЩЕНИЙ

АГЭ                – атипическая гиперплазия эндометрия

ВМС-Л        – внутриматочная система с левоноргестрелом

ГЭ                – гиперплазия эндометрия

ГнРГ                – гонадотропин - рилизинг гормон

ЗГТ                – заместительная гормональная терапия

ЖГЭ                – железистая гиперплазия эндометрия

ИМТ                – индекс массы тела

КОК                – комбинированные оральные контрацептивы

МИ                – митотический индекс

МС-ПЦР        – метилспецифическая полимеразная цепная реакция

ПААГ        – полиакриламидный гель

ПЦР                – полимеразная цепная реакция

ПМ                – патологические митозы

РЭ                – рак эндометрия

УЗИ                – ультразвуковое исследование

ХОКОЦ        – Харьковский областной клинический онкологический центр

ХОКПЦ        – Харьковский областной клинический перинатальный центр

ЭМК                – эндометриально-маточный коэффициент

EIN                – эндометриальная интраэпителиальная неоплазия

МSI (МСН)        – микросателлитная нестабильность генома

ESR                – ген рецептора эстрогена

RE                – рецепторы эстрогена

RР                – рецепторы прогестерона

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность темы. Гиперпластические процессы эндометрия играют ведущую роль в структуре заболеваемости женского населения не только Украины, но и всего мира [8, 96, 154, 226]. Проблема диагностики и лечения гиперплазии эндометрия (ГЭ) обоснованно вызывает повышенный научный и практический интерес, который обусловлен не только высокой частотой, но и риском малигнизации, поскольку в 30–70% случаев рак эндометрия (РЭ) в пери - и постменопаузе развивается на фоне гиперпластических процессов [86, 124, 134, 219].

Длительное снижение индекса здоровья населения, ухудшение экологической ситуации, увеличение психологических нагрузок существенно влияют на состояние здоровья женщин, приводя к нарушению овуляции с дефицитом прогестерона и относительной гиперэстрогенией, что в свою очередь, приводит к росту числа женщин с ГЭ, предраком и раком эндометрия в перименопаузальном периоде [32, 71, 170, 211].

С ростом в женской популяции ожирения, снижением детородной функции (ановуляции, эндокринное бесплодие), увеличением частоты поздней менопаузы, а также сахарного диабета, которые относятся к факторам риска возникновения РЭ, создаются условия, которые влияют на высокую частоту гормонально зависимой патологии женской репродуктивной системы [8, 15, 191, 225].

Для диагностики патологических процессов в эндометрии, выбора метода лечения и определения дальнейшего прогноза сейчас используется в основном ультразвуковой, эндоскопический и гистологический методы исследования. Однако расхождения мнений морфологов при оценке атипической ГЭ и РЭ составляет 11–25% случаев. В связи с этим, поиски более достоверных диагностических критериев продолжаются [2, 22, 161, 203]. Одной из задач современной науки является поиск генетических маркеров онкологических заболеваний, которые позволят не только распознавать опухолевый процесс, но и выявлять пациенток, предрасположенных к возникновению злокачественных новообразований [36, 46, 58, 117, 213].

Перспективным и все еще малоизученным направлением в исследовании патологии эндометрия на молекулярном уровне является определение наличия метилирования гена ESR и микросателлитной нестабильности (microsatellite instability – MSI) различных локусов генома [16, 38, 96, 185]. Определение метилирования гена ESR и MSI позволит определить факторы риска развития у женщин с определенным фенотипом различной патологии эндометрия (гиперплазия, полипы и др.). Наличие или отсутствие таких прогностических факторов, как метилирования гена ESR и MSI позволит индивидуализировать подходы к методам лечения (гормонотерапия, абляция эндометрия, гистерэктомия и др.), выработать новые алгоритмы лечения больных с патологией эндометрия, оценить эффективность и целесообразность различных методов терапии, а также определить вероятность малигнизации процесса [38, 95, 213, 226].

Таким образом, изучение молекулярно-генетических механизмов гиперпластических процессов эндометрия актуальны, поскольку позволят научно обосновать факторы риска развития патологических процессов эндометрия, уточнить риск малигнизации и индивидуализировать подходы к формированию лечебной тактики и профилактики заболевания.

Связь работы с научными программами, планами, темами

Выбранное направление исследования связано с научной деятельностью и входит в тематический план Харьковского национального медицинского университета как фрагмент научно-исследовательской работы кафедры акушерства и гинекологии № 1 ''Современные аспекты репродуктивного здоровья женщины в разные возрастные периоды жизни''
(№ гос. регистрации: 0111U001391).

Цель работы

Повышение эффективности лечения больных с гиперпролифера­тивными процессами эндометрия путем определения диагностической и прогностической ценности микросателлитной нестабильности генома (МSI) и метилирования гена ESR.

Для достижения цели были поставлены следующие задачи:

Изучить патогенетическое значение наличия метилирования гена ESR и микросателлитной нестабильности генома (МSI) у больных с гиперпролиферативной патологией эндометрия. Установить зависимость между эпигенетическими нарушениями гена ЕSR, микросателлитной нестабильностью генома (МSI) и фенотипическими особенностями у больных с патологическими процессами эндометрия. Оценить эффективность лечения больных с неатипической ГЭ с учетом возрастного периода при отсутствии МSI и метилирования гена ESR. Установить зависимость между наличием метилирования гена ESR, микросателлитной нестабильности генома и эффективностью использования органосохраняющих методов лечения у больных с атипической ГЭ. Разработать алгоритмы применения диагностических и лечебных методов и определить эффективность их внедрения у больных с ГЭ, с учетом микросателлитной нестабильности генома (МSI) и/или метилирования гена ESR.

Объект исследования: гиперпролиферативные процессы эндометрия.

Предмет исследования: метилирование гена ESR, микросателлитная нестабильность генома, особенности фенотипа у женщин с гиперпролифера­тивными процессами эндометрия, морфологические особенности структуры эндометрия, эффективность разных методов лечения больных с ГЭ.

Методы исследования: клинические, цитологические, гистологические, гистероскопия, молекулярно-биологический метод (ПЦР) определения наличия или отсутствия метилирования гена ESR и микросателлитной нестабильности генома (MSI) в ткани эндометрия, ультразвуковые исследования, компьютерная томография, математические (статистическая обработка).

Научная новизна полученных результатов

Проведена комплексная оценка молекулярно-биологических факторов и фенотипических особенностей у больных с полипами и гиперплазией эндометрия, позволяющая прогнозировать течение, риск рецидива или прогрессии заболевания.

Расширены научные понятия о влиянии метилирования гена ESR и микросателлитной нестабильности генома (МSI) на развитие гиперпролиферативных процессов эндометрия и определено диагностическое и прогностическое значение данных нарушений.