Биологическая индикация радиационного воздействия на организм человека с использованием цитогенетических методов (стр. 3 )

Пунктирными линиями указан 95% доверительный интервал для линии регрессии. Для каждой дозовой точки приведено наблюдаемое значение частоты с 95% доверительным интервалом.

Соответствующая регрессионная зависимость имеет вид:

,

где y - частота аберраций на одну клетку, x - доза облучения (Гр). Это уравнение получено методом наименьших квадратов с использованием в качестве весов величин N/y , где N - число метафаз, просмотренных при данной дозе. Значимость модели высокая: Р = 6*10-14. График этой зависимости приведен на рисунке 1. При реконструкции дозы по частоте аберраций необходимо произвести обратную операцию согласно уравнению:

Ошибка прогноза дозы складывается из ошибки регрессионной кривой и ошибки определения частоты аберраций у пациента:

Дисперсия оценки частоты аберраций у пациента зависит от числа просмотренных метафаз (N):

Дисперсия, связанная с регрессией зависит только от частоты аберраций у пациента (y) имеет вид:

В диапазоне доз 0,1 – 1,4 Гр величина слабо зависит от прогнозируемой дозы и равна примерно 0,014 Гр, что соответствует дисперсии 0,0002 Гр2. Таким образом, суммарная ошибка прогноза определяется в основном дисперсией частоты дицентриков у пациента , которая как минимум на порядок больше, чем .

В реальной ситуации для оценки дозы по частоте дицентриков вполне достаточно приближения

,

где y – частота аберраций у пациента при анализе N клеток, D - доза в Гр.

Для практических нужд можно использовать таблицу 5, в которой приведены оценки доз облучения с 95% доверительным интервалом, соответствующие различным количествам дицентриков и числу просмотренных клеток.

Таблица 5. Оценка дозы с 95% доверительным интервалом (Гр), определенная по частоте дицентриков при различных количествах посчитанных клеток

Количество выявленных дицентриков	Посчитано клеток
100	200	300	500	1000
2	0,44 (0,06 – 0,83)	0,28 (0 – 0,55)	0,20 (0 – 0,43)	0,13 (0 – 0,31)	0,06 (0 – 0,18)
3	0,57 (0,18 – 0,95)	0,37 (0,09 – 0,64)	0,28 (0,05 – 0,50)	0,19 (0,01 – 0,36)	0,10 (0 – 0,22)
4	0,68 (0,29 – 1,06)	0,44 (0,17 – 0,72)	0,34 (0,11 – 0,57)	0,24 (0,06 – 0,41)	0,13 (0 – 0,26)
5	0,77 (0,39 – 1,15)	0,51 (0,24 – 0,78)	0,39 (0,17 – 0,62)	0,28 (0,10 – 0,45)	0,16 (0,03 – 0,29)
6	0,85 (0,48 – 1,23)	0,57 (0,30 – 0,84)	0,44 (0,22 – 0,67)	0,32 (0,14 – 0,49)	0,19 (0,06 – 0,31)
7	0,93 (0,56 – 1,31)	0,62 (0,35 – 0,90)	0,49 (0,26 – 0,71)	0,35 (0,18 – 0,53)	0,21 (0,09 – 0,34)
8	1,01 (0,63 – 1,38)	0,68 (0,40 – 0,95)	0,53 (0,31 – 0,75)	0,38 (0,21 – 0,56)	0,24 (0,11 – 0,36)
9	1,07 (0,70 – 1,45)	0,72 (0,45 – 1,00)	0,57 (0,35 – 0,79)	0,41 (0,24 – 0,59)	0,26 (0,13 – 0,38)
10	1,14 (0,77 – 1,51)	0,77 (0,50 – 1,02)	0,61 (0,38 – 0,83)	0,44 (0,27 – 0,62)	0,28 (0,15 - 0,40)

·  Оценка уровня облучения пациентов по частоте транслокаций в лимфоцитах периферической крови

При построении калибровочной кривой учитывали как «полные», так и «неполные» транслокации. В таблице 6 представлены данные по частоте транслокаций с участием хромосом 1, 4 и 12, полученные при разных дозах облучения крови in vitro. На основании этих данных было получено уравнение регрессии, которое имеет следующий вид:

y = 0,00236 + 0,00698 x +0,00144 x2,

где y - частота транслокаций с участием хромосом 1, 4 и 12 на одну клетку, x - доза облучения (Гр). График этой зависимости представлен на рисунке 2. При реконструкции дозы по частоте аберраций необходимо произвести обратную операцию согласно уравнению (вычисление x по y):

Ошибка прогноза дозы будет складываться из ошибки регрессионной кривой и ошибки определения частоты транслокаций у пациента:

Дисперсия оценки частоты аберраций у пациента зависит от числа просмотренных метафаз (N):

Как и в случае дицентриков, ошибка, определяемая вариабельностью калибровочной регрессии () в диапазоне прогнозируемых доз 0.1¸1.8 Гр, слабо зависит от величины дозы. По нашим вычислениям Гр2.

Для оценки дозы облучения по частоте транслокаций можно использовать таблицу 7 и 8. Таблицу 7 можно применять в случае использования ДНК проб для хромосом 1, 4 и 12. При использовании другого набора ДНК-проб следует применять таблицу 8, для этого необходимо вычислить количество посчитанных клеток-эквивалентов Neq согласно формуле, приведенной выше.

Таблица 6.Частота транслокаций после g-облучения 60Со цельной крови in vitro

Доза, Гр	Количество посчитанных клеток	Количество транслокаций	Частота транслокаций на 100 клеток (М ± m)
0	7090	16	0,23±0,06
0,30	6147	45	0,73±0,11
0,50	5221	40	0,77±0,12
0,75	1378	20	1,45±0,32
1,00	1333	37	2,78±0,45
2,00	2309	203	8,79±0,59
3,00	1145	131	11,44±0,94
4,00	776	241	31,06±1,66

Таблица 7. Оценка дозы с 95% доверительным интервалом (Гр), определенная по частоте транслокаций, выявленных при использовании ДНК-проб для 1, 4 и 12 хромосом, при различных количествах посчитанных клеток

Количество транслокаций	Посчитано клеток
250	500	1000	1500	2000
2	0,43 (0 – 1,03)	н. д.	н. д.	н. д.	н. д.
3	0,61 (0,03 – 1,20)	0,32 (0 – 0,78)	н. д.	н. д.	н. д.
4	0,76 (0,19 – 1,33)	0,43 (0 – 0,87)	н. д.	н. д.	н. д.
5	0,89 (0,32 – 1,46)	0,53 (0,09 – 0,97)	0,25 (0 – 0,61)	н. д.	н. д.
6	1,01 (0,44 – 1,57)	0,61 (0,18 – 1,05)	0,32 (0– 0,67)	0,17 (0 – 0,50	н. д.
7	1,11 (0,55 – 1,68)	0,69 (0,26 – 1,12)	0,37 (0,03 – 0,72)	0,23( 0 – 0,54)	0,13 (0 – 0,45)
8	1,21 (0,66 – 1,77)	0,82 (0,40 – 1,26)	0,43 (0,09 – 0,77)	0,27 (0– 0,58)	0,17 (0 – 0,47)
9	1,31 (0,75 – 1,86)	0,78 (0,43 – 1,12)	0,48 (0,14 – 0,82)	0,32 (0,01 – 0,62)	0,21 (0 – 0,42)
10	1,39 (0,84 – 1,95)	0,89 (0,46 – 1,32)	0,53 (0,18 – 0,86)	0,36 (0,05 – 0,66)	0,25 (0 – 0,53)
11	1,48 (0,92 – 2,03)	0,95 (0,53 – 1,38)	0,57 (0,23 – 0,91)	0,39 (0,09 – 0,69)	0,28 (0– 0,56)
12	1,56 (1,00 – 2,11)	1,01 (0,59 – 1,43)	0,61 (0,27 – 0,95)	0,43 (0,13 – 0,73)	0,31 (0,04 – 0,59)
13	1,63 (1,08 – 2,18)	1,06(0,64 – 1,48)	0,65 (0,31 – 0,99)	0,46 (0,16 – 0,76)	0,35 (0,07 – 0,62)
14	1,70 (1,11 –2,25)	1,11 (0,69 – 1,53)	0,69 (0,35 – 1,02)	0,49 (0,19 – 0,79)	0,37 (0,10 – 0,65)
15	1,74 (1,23 – 2,32)	1,16 (0,75 – 1,58)	0,72 (0,39 – 1,06)	0,52 (0,23 – 0,82)	0,40 (0,13 – 0,68)

н. д. – выявленная частота транслокаций не отличается достоверно от контрольного значения, p<0.05 (точный критерий Фишера)