Разработка методов анализа индикаторных компонентов в фиточаях и биологически активных добавках на их основе (стр. 3 )

ОПРЕДЕЛЕНИЕ АРБУТИНА И ГИДРОХИНОНА В ЛИСТЬЯХ ТОЛОКНЯНКИ, БРУСНИКИ, КОРНЕВИЩАХ БАДАНА И ФИТОПРЕПАРАТАХ НА ИХ ОСНОВЕ

Подготовка проб для анализа. БАД и фиточаи на основе сырья толокнянки, брусники и бадана. 1,0 г образца экстрагируют 100 мл 25% водного этанола и нагревают на водяной бане в течение 20 минут. БАД и препараты на основе экстракта толокнянки, брусники и бадана 1,0 г растворяют в 250 мл 25% этанола.

Проведение анализа ВЭЖХ. Колонка: Phenomenex Luna 5u C18(2), 5m, 4,6×250, подвижная фаза: метанол-вода (15:85 % об.)., скорость подачи подвижной фазы: 1,0 мл/мин, детектирование: флуорометрическое λex=280нм и λem=320нм, объем вводимой пробы 10 мкл.

рис.2. хроматограмма БАД «Фиторен»

Табл 5. Параметры хроматографического разделения арбутина и гидрохинона.

Стандарт	tR	k’	N	As	α	R
Арбутин	3,95	0,88	10200	1,0	2,05	5,3
Гидрохинон	5,90	1,81	9740	1,1

Предел обнаружения составил 0,01 мг/л, предел количественного определения 0,05 мг/мл, линейность наблюдалась при концентрациях от 0,05 до 300 мг/л, коэффициент корреляции был близок к единице.

Табл 6.Метрологические характеристики методики (Р=95%, t(Р, f) = 2,78).

Индикаторный ком.	Х ср	s2	s	∆x ср	ε%
Арбутин	94,33	5,856	2,41	3,00	3,18
Гидрохинон	2,29	0,004	0,06	0,08	3,43

Табл 7. Содержание арбутина и гидрохинона в растительном сырье.

Образец	Содержание мг/г
арбутин	гидрохинон
Листья брусники, , пачки	57,5	0,8
Листья брусники, , ф/п	50,2	1,47
Листья толокнянки, , пач.	90,0	1,8
Листья толокнянки, , ф/п	83,5	2,4
Корневище бадана	54,3	27,1
Экстракт бадана «реликт»	94,7	18,9
Экстракт бадана,	148,5	74,3

Арбутин и гидрохинон, являясь доминирующими фенольными соединениями брусники, толокнянки и бадана (5-9% от сухой массы), могут рассматриваться как индикаторные. Во всех исследованных образцах растительного сырья были обнаружены значительные концентрации индикаторных фенольных соединений, что позволяет рассматривать их как источник арбутина и гидрохинона. Сниженное содержание арбутина может свидетельствовать о низком качестве исходных субстанций, также как значительное преобладание гидрохинона может свидетельствовать о недоброкачественности продукта, вследствие несоблюдения условий заготовки и сушки растительного сырья. Этот вывод подтверждается увеличением содержания гидрохинона в почерневших листьях, являющихся нормируемой примесью брусники и толокнянки.

Табл 8. Содержание арбутина и гидрохинона в БАДах.

Название образца	Содержание арбутина	Содержание гидрохинона
1. БАД «Гербафлю»	10,6мг/фп	0,02мг/фп
2. БАД «Нефроклинз»	4,6мг/капс	0,05мг/капс
3. БАД «Фиторен»	17,0мг/капс	0,06 мг/капс
4. БАД «Ренсепт»	7,28мг/таб	0,05 мг/таб
5. БАД «Эроктон»	15,5мг/таб	0,15 мг/таб
6. БАД «Травы для сердца»	6,1мг/таб	0,03 мг/таб
7. БАД «Гербамарин общеукрепляющий»	0,034мг/мл	менее предела обнаружения
8. БАД «Уринорм»	1,26мг/г	0,02 мг/г
9. БАД «Тигровый глаз артро»	3,51мг/таб	0,18 мг/таб
10. БАД «Нутрилон-хром»	0,12мг/г	0,02 мг/г
11. БАД «Гемовизин»	2,95мг/капс	0,03 мг/капс
12. БАД «Метаболайн №2»	1,95мг/капс	0,26 мг/капс
13. БАД «Иозис»	1,52мг/капс	0,01 мг/капс
14. БАД «Взвар клюквенный»	0,48мг/мл	0,03 мг/таб
15. БАД «Грин систем №5»	5,13мг/таб	0,13 мг/таб
16. БАД «Бальзам. Алтайские травы №7»	0,022мг/мл	0,004 мг/мл
17. БАД «Урокам»	5,69мг/г	0,15 мг/г
18. БАД «Лимфовит У»	0,226%.	0,001%
19. БАД «Ортилиус»	2,9 мг/капс	0,08 мг/капс
20. БАД «Фитолюкс – 17»	0,57%	0,02%

В некоторых исследованных БАДах были обнаружены незначительные концентрации индикаторных фенольных соединений, что не позволяет рассматривать их как источник арбутина. В этой связи полученные результаты свидетельствуют о необходимости использования разработанного подхода для достоверной оценки качества препаратов на основе брусники и толокнянки.

ОПРЕДЕЛЕНИЯ ФЛАВОЛИГНАНОВ В БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ДОБАВКАХ К ПИЩЕ И ФИТОЧАЯХ НА ОСНОВЕ РАСТОРОПШИ ПЯТНИСТОЙ

Подготовка проб. БАД и фиточаи на основе сырья расторопши. 1,0 г образца экстрагировали 100 мл 50% водного этанола на водяной бане в течение 1 часа. БАД и препараты на основе экстракта расторопши 1,0 г растворяли в 250 мл 100% этанола. Проведение анализа ВЭЖХ. Колонка: Phenomenex Luna C18(2), 5m, 4,6×250 подвижная фаза: (А) водный раствор трихлоруксусной кислоты, рН 2,5; (В) - метанол: 0 мин – 29%В; 20 мин – 65%В; 40 мин – 65%В. Скорость подвижной фазы: 1,0 мл/мин, температура колонки: 40 0С, детектирование: УФ. λ=288 нм, объем вводимой пробы 10 мкл.

Табл 9. Параметры хроматографического разделения флаволигнанов.

флаволигнаны	tR, мин.	K	N	As	α	R
Изосиликристин	13,26	12,3	30700	1,1	1,04 1,09 1,25 1,03 1,07 1,02	2,1 3,0 6,5 2,5 3,7 1,5
Силикристин	13,86	12,9	62400	1,1
Силидианин	15,13	14,1	34500	1.2
Силибин А	18,66	17,7	105000	1,0
Силибин В	19,18	18,2	92000	1,0
Изосилибин А	20,42	19,4	136000	1,0
Изосилибин В	20,74	19,7	121000	1,1

Предел обнаружения флаволигнанов составил 1,0 мг/л, предел количественного определения 6,5 мг/мл, линейность наблюдалась при концентрациях от 1,0 до 500 мг/л, коэффициент корреляции был близок к единице.