Разработка методов анализа индикаторных компонентов в фиточаях и биологически активных добавках на их основе (стр. 5 )

ОПРЕДЕЛЕНИЕ ИНДИКАТОРНЫХ КОМПОНЕНТОВ В ЗВЕРОБОЕ И ФИТОПРЕПАРАТАХ НА ЕГО ОСНОВЕ

Подготовка проб. БАД и фиточаи на основе травы зверобоя. 1,0 г образца экстрагировали 100 мл 50% водного этанола в течение получаса на водяной бане. БАД на основе экстракта зверобоя около 1,0г растворяли в 250 мл 50% этанола.

Проведение анализа ВЭЖХ. Неподвижная фаза: 250 × 4,6 мм SGE Wakosil II C18 RS, подвижная фаза: раствор А: 0,01М водный раствор ацетата натрия с рН=5,0; раствор В: ацетонитрил: 0 мин – 15%В; 40 мин – 90%В; 60 мин – 90%В. Скорость подвижной фазы 1 мл/мин, объем пробы 10 мкл, температура колонки 35 0С, гиперицин и псевдогиперицин определяют в видимой области спектра при 590 нм, гликозиды флавоноидов определяют при 360 нм и гиперфорин при 280 нм.

Предел обнаружения производных антрацена составил 0,8 мг/л, для флавонолгликозидов 1,0 мг/л, предел количественного определения антраценпроизводных 5,0 мг/л, флавонолгликозидов 6,0 мг/л, линейность наблюдалась при концентрациях от 1,0 до 500мг/л, коэффициент корреляции был близок к единице.

Рис 4. Хроматограмма экстракта зверобоя

Табл 12. Параметры хроматографического разделения ИК зверобоя

Компоненты зверобоя	tR, мин.	K	N	α	R
Рутин	16,93	15,9	14900	1,11 1,19	4,47 7,3
гиперозид	18,72	17,7	23400
псевдогиперицин	28,17	27,1	34800
гиперицин	33,41	32,4	31000
гиперфорин	37,83	36,8	41000

Табл 13.Метрологические характеристики методики (Р=95%, t(Р, f) = 2,78)

Вещество	Х ср	s2	s	∆x ср	ε%
рутин	7,46	0,0048	0,068	0,085	1,15
гиперозид	4,93	0,0074	0,086	0,107	2,17
псевдогиперицин	0,44	0,0001	0,010	0,014	3,22
гиперицин	0,38	0,0001	0,010	0,013	3,43
гиперфорин	0,70	0,0002	0,013	0,017	2,45

Табл 14. Содержание индикаторных компонентов зверобоя в образцах.

Наименование образца	Содержание в образце
Гиперицин	Псевдо-гиперицин	Гиперфорин	Рутин	Гиперозид
Трава зверобоя (водное извл.)	0,23 мг/г	0,67 мг/г	0,02 мг/г	20,1 мг/г	9,93 мг/г
Трава зверобоя (спирт. извл.)	0,38 мг/г	0,44 мг/г	0,70 мг/г	7,46 мг/г	4,93 мг/г
Комплексный «Экстракт здоровье»	0,23 мг/г	0,02 мг/г	0,32 мг/г	3,81 мг/г	3,67 мг/г
БАД к пище «Аринамин»	0,002 мг/10 кап	0,02 мг/10 кап	0,22 мг/10 кап	3,35 мг/10 кап	1,95 мг/10 кап
БАД к пище «Фитомикс»	0,01 мг/г	0,01 мг/г	0,02 мг/г	0,25 мг/г	0,97 мг/г
БАД к пище «Good life»	0,11 мг/10 кап	0,15 мг/10 кап	0,29 мг/10 кап	6,22 мг/10 кап	4,29 мг/10 кап
БАД к пище «Зверобой с витамином С»	0,04 мг/10 таб	0,29 мг/10 кап	0,06 мг/10 кап	14,55 мг/10 кап	8,14 мг/10 кап
БАД к пище «Гипнар-Хитозан»	0,01 мг/10 таб	н/о	0,05 мг/10 таб	0,18 мг/10 таб	0,08 мг/10 таб
БАД к пище «Сироп «Травник 2»	н/о	н/о	0,27 мг/кг	0,09 мг/кг	0,89 мг/кг

Как видно из представленной таблицы, флавонолгликозиды полнее извлекаются водой, а антраценпроизводные и особенно флороглицинол гиперфорин – спиртом. Проанализированные нами образцы БАД содержали различное количество индикаторных компонентов, так, БАД к пище «Сироп «Травник 2», «Фитомикс», «Аринамин», «Зверобой с витамином С», «Гипнар-Хитозан», содержат намного меньше биологически активных веществ, чем водные и спиртовые извлечения зверобоя и не являются добавками содержащими биологически активное вещество в концентрированном виде. Предложенная методика пригодна для селективного определения антраценпроизводных и флавоноидов зверобоя на фоне сложного матрикса БАД и других фитопрепаратов.