Иммуномодулирующее действие стоматологических материалов (стр. 3 )

Так, через 2 недели после первичной иммунизации, когда сплавы были имплантированы за 1 неделю и через 1 неделю после иммунизации содержание анти-ОА IgG повышалось, и наибольшее увеличение наблюдалось при имплантации сплавов «НС» и «Бюгодент». Подобное увеличение анти-ОА IgG определялось через 1 неделю после третичной иммунизации. В случае имплантации сплавов одновременно с иммунизацией ОА наибольшее увеличение анти-ОА IgG имелось только на «НС» в разные сроки третичной иммунизации. Имплантация сплавов «Супер КМ» и «Суперпал» либо приводила к падению количества анти-ОА IgG, либо не вызывала существенных изменений в развитии защитных реакций против чужеродного компонента. Таким образом, как показали эксперименты по модуляции иммунного ответа, не все испытанные сплавы металлов, используемых в ортопедической стоматологии, ведут себя одинаково. Сплавы «Бюгодент», «Супер-КМ» и «Суперпал» снижают, а образцы «НС», наоборот, усиливают анти-ОА IgE и анти-ОА IgG антителообразование, то есть нахождение сплава «НС» в полости рта, вероятно, может способствовать сенсибилизации к другим аллергенам.

По нашим данным, подкожная имплантация образцов реставрационных СМ (рис. 4) за неделю до иммунизации выявила подавление анти-ОА IgE и анти-ОА IgG антителообразование в случае вторичной и третичной иммунизации. Наиболее выраженным иммуносупрессивным действием обладали образцы реставрационного СМ «Призмафил». При подкожной имплантации этих же образцов реставрационного СМ через неделю после иммунизации на этих сроках эксперимента происходило увеличение анти - ОА IgE ответа на материал «Филтек», а иммуносупрессивное действие образцов реставрационного СМ «Призмафил» не определялось. Имплантация образцов «Призмафил», «Геркулайт» и «Филтек» за 1 неделю до иммунизации ОА приводила к заметному угнетению анти-ОА IgG ответа по сравнению с контролем (иммунизация только ОА на всех сроках наблюдения).

IgЕ за 1 неделю до иммунизации ОА IgG
Сроки забора крови	Сроки забора крови
IgЕ через 1 неделю после иммунизации ОА IgG
Сроки забора крови	Сроки забора крови

Рис.4. Анти-ОА IgЕ и IgG ответ в крови мышей с имплантацией образцов РСМ. Условные обозначения: 1 – 2 нед. после первичной иммунизации; 2 – 1 нед. после вторичной иммунизации; 3 – 3 нед. после вторичной иммунизации; 4 – 1 нед. после третичной иммунизации; 5 – 3 нед. после третичной иммунизации; – Призмафил; – Филтек; – Геркулайт; – контроль ОА

В то же время имплантация образцов этих реставрационных СМ после иммунизации ОА несколько усиливала анти-ОА IgG антителообразование по сравнению с контролем, особенно на фоне третичной иммунизации и наибольшим действием обладали образцы реставрационного СМ «Геркулайт». Таким образом, введение мышам реставрационных стоматологических материалов после стандартной иммунизации ОА слабее изменяет величину анти - IgG-ответа по сравнению с IgE-ответом к аллергену.

Как показали наши исследования иммуномодулирующий эффект паст для пломбирования корневых каналов в значительной степени зависит от времени их имплантации под кожу (рис.5 и 6). Заметное торможение IgE-антителообразования отмечалось при имплантации под кожу животным всех 3-х материалов до начала иммунизации ОА, и наиболее выраженным иммуносупрессивным действием обладали образцы корневой пасты «Эндометазон» при её имплантации одновременно с иммунизацией ОА и на поздних сроках третичной иммунизации. Антителообразующий эффект образцов СМ «Эндометазон», «Цинкоксидэвгенол» и «Сеалит Регуляр» в случае их имплантации под кожу мышам через 1 неделю после первичной иммунизации полностью отсутствовал. Образцы корневых паст «Эндометазон», имплантированные до или одновременно с началом иммунизации ОА также вызывали подавление IgG-антителообразования. На фоне уже развившейся сенсибилизации организма ОА иммуномодулирующее действие всех образцов корневых паст не проявлялось.

Таким образом, экстраполируя полученные экспериментальные данные на клинику, можно сделать заключение о том, что следует внимательнее подходить к выбору корневых паст, которые могут подавлять как IgE-, так и IgG-антителообразование к антигену, индуцируя возможный иммунодефицит.

А

Сроки забора крови

Б

Сроки забора крови

В

Сроки забора крови

Рис.5. Анти-ОА IgЕ ответ в крови мышей с имплантацией образцов паст для пломбировки корней зубов: А - за неделю до иммунизации; Б – одновременно с иммунизацией; В – через неделю после иммунизации. Условн

ые обозначения: 1 – 2 нед. после первичной иммунизации; 2 – 1 нед. после вторичной иммунизации; 3 – 3 нед. после вторичной иммунизации; 4 – 1 нед. после третичной иммунизации; 5 – 3 нед. после третичной иммунизации;

– Эндометазон; – Цинкоксидэвгенол; – Сеалит Регуляр; – контроль ОА

А

Сроки забора крови

Б

Сроки забора крови

В

Сроки забора крови

Рис.6. Анти-ОА IgG ответ в крови мышей с имплантацией образцов паст для пломбировки корней зубов: А - за неделю до иммунизации; Б – одновременно с иммунизацией; В – через неделю после иммунизации. Условные обозначения: 1 – 2 нед. после первичной иммунизации; 2 – 1 нед. после вторичной иммунизации; 3 – 3 нед. после вторичной иммунизации; 4 – 1 нед. после третичной иммунизации; 5 – 3 нед. после третичной иммунизации;

– Эндометазон; – Цинкоксидэвгенол; – Сеалит Регуляр; – контроль ОА

В группе животных, которым вызывали экспериментальную бронхиальную астму (ЭБА), путём внутрибрюшинного введения и интраназальных аппликаций ОА количество анти-ОА IgE антител в сыворотке крови возрастало в 10-16 раз по сравнению с контролем. Имплантация под кожу образцов «Этакрил»-ВБ приводила к некоторому увеличению анти-ОА IgE антител по сравнению с животными, у которых вызывали только ЭБА. Менее выраженное подобное действие оказывали имплантированные образцы базисной пластмассы «Этакрил»-СВЧ.

Проведённое макроскопическое и микроскопическое исследование животных на фоне сенсибилизации ОА и имплантации под кожу образцов базисных акриловых пластмасс «Фторакс»-ВБ, «Фторакс»-СВЧ и «Стомакрил»-ВБ, «Стомакрил»-СВЧ, «Этакрил»-ВБ, «Этакрил»-СВЧ показало, что все имплантированные акриловые пластмассы, за исключением «Этакрил»-ВБ, были окружены плотной, минимально выраженной соединительнотканной капсулой без инфильтратов и признаков воспаления. При имплантации сплавов металлов «Бюгодент», «Суперпал» и «Супер КМ» животным с модельной аллергией наблюдалось торможение капсулообразования с небольшим числом полибластов и инфильтрата из микро - и макрофагов в периимплантационной зоне, которое было наиболее выражено при имплантации образцов сплава «НС».

Вокруг имплантированных образцов реставрационного СМ «Призмафил» развивалась воспалительная реакция в прилежащих тканях и торможение процессов капсулообразования, а при имплантации образцов реставрационных СМ «Филтек» и «Геркулайт» имелось выраженное образование капсулы вокруг зоны имплантатов с наличием незначительного хронического воспаления.

Мы установили ярко выраженную токсичность СМ «Форедент». Его имплантация приводила к гибели 50% мышей уже на 3-5 сутки. Корневые пасты «Цинкоксидэвгенол», «Сеалит Регуляр» вызывали слабо выраженную воспалительную реакцию, в то время как при имплантации образцов СМ «Эндометазон» воспалительная реакция полностью отсутствовала.

Результаты клинических исследований

Изучение амбулаторных карт больных с атопической аллергией за период 2005 – 2009 годы выявило, что за стоматологической помощью в Центр стоматологии и челюстно-лицевой хирургии МГМСУ обратились 170 женщин и 80 мужчин. Средний возраст всех обследованных составил 46,3±17,8 и варьировал от 16 до 83 лет. По данным анамнеза, 100% пациентов с АА, обратившиеся за стоматологической помощью (65% женщин и 35% мужчин) имели осложнённый аллергостатус, проявлявшийся в большей степени на медикаменты (42%). Анализ карт показал, что в лечении кариеса нуждалось 33,3% от всех обратившихся. Помощь в лечении воспаления пульпы и периодонта получили 23,6% пациентов, в лечении заболеваний слизистой оболочки полости рта – 26,7% и пародонта – 16,7% пациентов с АА. Обращаемость в хирургическое отделение у пациентов с АА в большинстве случаев была связана с неотложной хирургической помощью, а именно: удалением зубов по причине оперкулита, периостита, хронического периодонтита и нагноения кист челюстей (34,9%). Нуждаемость пациентов с АА в ортопедическом лечении составила 100%, из которых 58,4% человек имели зубные протезы, но нуждались в дополнительном или повторном протезировании, а 41,6% ранее не протезировались.

На основании проведённого эпидемиологического и клинического обследования пациентов с АА был предложен алгоритм диагностики, который позволяет достоверно оценить состояние пациентов с осложнённым аллергостатусом и предложить стоматологическое лечение с учетом индивидуальной переносимости СМ.

Результаты исследований in vitro и in vivo реакции пациентов с атопической аллергией на стоматологические материалы.

Исследование гистаминолиберации показало, что инкубация образцов сплавов металлов «НС», «Бюгодент», «Суперпал», «Супер КМ» с кровью пациентов без аллергии и страдающих атопической аллергией не приводила к достоверным изменениям в освобождении гистамина в обеих группах. Данные представлены в таблице 1. Вместе с тем, инкубация супернатантов базисных акриловых пластмасс с клетками крови здоровых доноров приводила к гистаминолиберации, сходной с таковой при инкубации с кровью атопических больных. Высокий уровень высвобождения гистамина давали образцы пластмассы «Этакрил»-ВБ. Образцы «Фторакс»-СВЧ давал слабую гистаминолиберацию, тогда как «Этакрил»-СВЧ и «Стомакрил»-СВЧ не вызывали высвобождение гистамина.

Изучение гистаминолиберации из базофилов крови больных АА под воздействием РСМ показало значительное высвобождение гистамина только в случае инкубации «супернатантов», полученных из образца «Филтек».

При анализе результатов высвобождения гистамина из базофилов плазмы крови под воздействием супернатантов паст для пломбировки каналов корней зубов выявлено, что высокой уровень гистаминолиберации как у больных с АА, так и здоровых доноров продемонстрировал образец корневой пасты «Форедент», а наиболее низкий уровень образец пасты «Эндометазон». Во всех остальных случаях высвобождение гистамина из базофилов крови было на уровне значений контроля (инкубация с PIPES-буфером).

Мы исследовали реакцию В-лимфоцитов на местноанестезирующие препараты, ионы металлов и акрилат. Всего было исследовано 3695 образцов сыворотки крови на наличие специфических IgE и IgG антител у пациентов обоего пола (1346 образцов крови у мужчин и 2349 образцов крови у женщин). Было проведено 2052 теста на определение специфических IgE антител и 1643 теста на определение специфических IgG антител в сыворотке крови.

Таблица 1

Высвобождение гистамина (нг/мл) из базофилов крови пациентов после её инкубации с различными стоматологическими материалами (М±m)

Образцы СМ	Группы пациентов
Атопическая аллергия	Здоровые доноры
n=125	Р	n=30	Р
«НС»	1,6±0,39	>0,1 р1>0,5	1,9±0,25	>0,1
«Бюгодент»	2,0±0,32	>0,1 р1>0,1	2,1±0,15	>0,1
«Супер КМ»	2,4±0,23	>0,05 р1>0,05	3,1±0,40	>0,05
«Суперпал»	2,6±0,50	>0,05 р1>0,1	2,5±0,77	>0,1
PIPES (контроль)	1,60±0,41	1,92±0,47
«Этакрил»-ВБ	52,0±0,81	<0,001 р1>0,5	49,8±0,66	<0,001
«Этакрил»-СВЧ	3,2±1,51	>0,1 р1>0,1	2,9±0,81	>0,1
«Фторакс»-ВБ	2,2±1,04	>0,1 р1>0,1	2,2±0,47	>0,1
«Фторакс»-СВЧ	11,2±0,43	<0,001 р1<0,05	9,2±0,58	<0,001
«Стомакрил»-ВБ	1,7±0,91	>0,1 р1>0,1	1,5±0,57	>0,1
«Стомакрил»-СВЧ	2,7±1,13	>0,1 р1>0,1	2,4±0,73	>0,1
PIPES (контроль)	2,32±0,45	1,98±0,22
«Филтек»	16,5±1,30	<0,001 р1>0,1	17,1±1,25	<0,001
«Призмафил»	6,1±1,33	>0,1 р1>0,1	5,5±0,95	>0,1
«Геркулайт»	4,3±1,20	>0,5 р1>0,1	4,1±0,55	>0,1
PIPES (контроль)	3,70±0,50	3,75±0,45
«Эндометазон»	12,9±1,88	<0,001 р1>0,1	11,9±1,99	<0,001
«Цинкоксидэвгенол»	2,8±0,38	>0,1 р1>0,5	2,6±0,49	>0,1
«Форедент»	39,5±6,27	<0,001 р1>0,05	35,9±7,15	<0,001
«Сеалит регуляр»	4,0±1,28	>0,1 р1>0,5	4,6±0,91	>0,1
PIPES (контроль)	3,4±0,42	3,1±0,40

Примечание: р – по сравнению с контролем (инкубация только с PIPES-буфером); р1 - между здоровыми пациентами и с атопической аллергией..