Ревматоидный артрит с ревматоидными узелками: клинико-иммунологические особенности (стр. 5 )

Примечание: * - р<0,05 по сравнению со здоровыми; ** - р<0,01 по сравнению со здоровыми; *** - р< 0,005 по сравнению со здоровыми; **** - р <0,0001 по сравнению со здоровыми

Таблица 11.

Группа	CD3	CD19	CD4	CD8	CD2	HLA-DR	CD25	CD10	Лф
РА с РУ n=25	¢ * 691,2 ±63,5	275 ±41,9	638,8 ±68,7	246,0 ±29,3	750,0 ±77,4	406,9 ±61,9	* 309,8 ±32,4	*** 270,8 ±43,0	¢¢ 1132 ±97,1
РА без РУ n=25	961,2 ±82,5	** 405,0 ±44,1	¢ * 811,8 ±72,6	358,6 ±53,2	971,2 ±86,9	*** 601,2 ±73,6	* 394,4 ±50,7	*** 389,2 ±62,0	1608 ±121
Здоро вые n=25	858,5 ±50,6	232,2 ±16,6	602,5 ±36,8	314,8 ±29,1	931,2 ±60,7	286,5 ±24,8	220,2 ±23,3	40,8 ±9,7	1365 ±82,2

CD-маркеры лимфоцитов больных РА в абсолютных значениях.

Примечание: *- р<0,05 по сравнению со здоровыми; ** - р<0,005 по сравнению со здоровыми; ***- р<0,0001 по сравнению со здоровыми; ¢ - р<0,05 по сравнению с другой группой больных РА; ¢¢ - р<0,005 по сравнению с РА без РУ

Экспрессия маркеров созревания Т - и В - лимфоцитов: в обеих группах больных РА отмечалось достоверное многократное повышение содержания клеток CD10+ по сравнению со здоровыми лицами (р=0,0001) (табл. 10 и 11). Т-лимфоциты CD10+ являются незрелыми и в норме не покидают тимус.

Экспрессию маркеров активации изучали по содержанию лимфоцитов, несущих CD25+ - (цепь рецептора к интерлейкину-2). Уровень клеток CD25+ в обеих группах больных РА достоверно превышал контроль как в процентном соотношении, так и в абсолютных значениях, группы больных РА между собой отличались недостоверно (табл. 10 и 11).

В обеих группах РА, но с заметным преобладанием в группе без РУ отмечался рост клеток HLA-DR+. У больных РА без РУ значения НLА-DR+ превышали контроль как в процентном соотношении (р<0,01), так и в абсолютных значениях (р<0,0001) (табл. 10 и 11), а у больных РА без РУ статистически достоверные отличия от здоровых лиц имело только процентное содержание клеток НLА-DR+ (р<0,001).

Таким образом, в обеих группах больных РА отмечалось достоверное повышение уровня лимфоцитов, несущих рецепторы активации (CD25, HLA-DR) и многократное повышение уровня лимфоцитов, несущих рецепторы созревания (CD10+) по сравнению с контролем. Циркуляция в периферической крови клеток CD10+ ранее описана лишь при некоторых формах лейкозов. Нельзя исключить, что преждевременно вышедшие из тимуса незрелые лимфоциты, циркулирующие в крови больных РА, при взаимодействии с элементами микроокружения активируются, проявляют повышенную адгезивную способность, участвуют в развитии аутоиммуноагрессии.

Адгезия лимфоцитов больных РА к эпителиальным клеткам в культуре in vitro. У больных РА с наличием РУ и РА без РУ исследована адгезивная способность лимфоцитов периферической крови при их инкубации в культуре in vitro с клетками эпителия тимуса (ТЭК), легких и кожи. Клетки эпителия тимуса были выбраны нами в связи с выявлением в крови больных РА с наличием и без РУ лимфоцитов, несущих рецептор CD10, свойственный незрелым тимоцитам. Контролем служила реакция взаимодействия ТЭК с тимоцитами человека и с лимфоцитами крови здоровых лиц. В контрольном эксперименте при взаимодействии ТЭК с тимоцитами адгезия составляла 65-80%, при взаимодействии ТЭК с лимфоцитами здоровых лиц розетки образовывали всего в 12,7±2,9% клеток. Лимфоциты обеих групп больных РА имели значительную тропность к ТЭК (разброс результатов от 14 до 45% клеток (табл. 12)).

Таблица 12.

Клетки Группа	ТЭК n (%)	Фибробласты n (%)	Эпителий легких n (%)
РА с наличием РУ	17 (28,12%)	12 (15,6%)	13 (28,4%)
РА без РУ	18 (27,30%)	5 (20,0%)	9 (22,9%)
Здоровые лица	8 (10,75%)	5 (4,6%)	5 (5,8%)

Результаты реакции розеткообразования.

Так как СD2 является одной из основных адгезивных молекул, то с целью оценки его участия в реакции адгезии, у ряда больных (5 больных РА с наличием РУ и 2 больных РА без РУ) мы предварительно инкубировали лимфоциты периферической крови с антителами к рецептору СD2. Степень адгезии заметно ослабевала, ее значения приближались к результатам в группе контроля. Изложенное позволяет отнести лимфоциты, участвующие в реакции с ТЭК, к Т-клеткам.

Показатели адгезии в обеих группах больных РА были значительно выше, чем у здоровых лиц (р<0,05 в обоих случаях), однако, не имели достоверных различий между группами больных РА. Адгезия лимфоцитов больных РА обеих групп к ТЭК была несколько выше, чем к эпителию легких и фибробластам. Однако и в этих случаях результаты больных РА кратно превосходят контрольные значения. Дальнейшее изучение адгезивной способности лимфоцитов периферической крови больных РА с наличием РУ при их сокультивировании с клетками макрофагально-гистиоцитаного происхождения и изучение, наряду с CD2, роли других молекул адгезии, которые опосредуют межклеточные взаимодействия (рецепторы группы интегринов), позволит расширить представления о патогенезе и роли РУ.

Выводы:

1.  У больных РА с ревматоидными узелками преобладают внесуставные проявления, обусловленные экспансией лимфоцитов в тканях: лимфаденопатия, иридоциклит, узловатая эритема, кожный васкулит; тогда как у больных РА без ревматоидных узелков преобладают лихорадка, потеря массы тела, анемия, развитие которых преимущественно связано с неспецифическим воспалением и общей интоксикацией.

2.  У больных РА с ревматоидными узелками выявлено достоверное снижение количества Т-лимфоцитов, несущих основной дифференцировочный маркер CD3, как по сравнению с больными РА без ревматоидных узелков, так и со здоровыми лицами. У больных РА с множественными ревматоидными узелками количество CD3 достоверно ниже, чем с единичными ревматоидными узелками.

3.  Серопозитивность по РФ установлена у 94,1% больных РА с ревматоидными узелками и у 88,6% больных РА без ревматоидных узелков. Количество больных с титрами РФ 1:640 и выше преобладало в группе РА с ревматоидными узелками. В этой же группе отмечался достоверно более низкий уровень IgG по сравнению с группой РА без ревматоидных узелков.

4.  На лимфоцитах периферической крови больных РА без ревматоидных узелков выявлена повышенная в 10 раз по сравнению со здоровыми лицами экспрессия рецептора незрелых лимфоцитов CD10. У больных РА с ревматоидными узелками уровень экспрессии CD10 был повышен в 7 раз по сравнению со здоровыми.

5.  Лимфоциты периферической крови больных РА, независимо от наличия ревматоидных узелков, имеют свойство образовывать клеточные ассоциации в виде розеток с эпителиальными клетками тимуса, легких и фибробластами, что свидетельствует о наличии на их поверхности адгезивных рецепторов, участвующих в патогенезе ревматоидного синовита и в формировании ревматоидной гранулемы.

Практические рекомендации:

1. При анализе иммунограмм больных РА целесообразно одновременно определять уровень экспрессии рецепторов дифференцировки, активации, созревания и адгезии, так как у больных РА, как правило, имеется одновременное нарушение всех этих процессов. У больных РА с наличием РУ целесообразно проводить комплексную оценку экспрессии дифференцировочных маркеров (CD3, CD4, CD8), так как изолированное снижение CD3+ у больных с ревматоидными узелками является не свидетельством иммунодефицита, а следствием миграции клеток из крови в ткани на фоне активности РА.

2. Снижение экспрессии CD3 на лимфоцитах периферической крови больных РА может служить предиктором формирования множественных ревматоидных узелков.

3. Реакция адгезии лимфоцитов периферической крови больных РА к культурам эпителиальных клеток, может быть рекомендована в качестве дополнительного метода для подтверждения диагноза у больных ранним РА.

Список научных работ по теме диссертации:

1. , , Тимофеев лимфоцитов при ревматоидном артрите и саркоидозе.//Научно-практическая ревматология, приложение к №2, материалы Конгресса ревматологов Росиии, г. Саратов, 2003 г., с. 18.

2. , , Головизнин – ключ к выбору терапии ревматодного артрита с учетом клинических вариантов течения.//Материалы конгресса «Человек и лекарство», Москва, 19-23 апреля 2004 г., с. 98

3. , , Шарова уровня и свойств незрелых Т-лимфоцитов крови у больных системными аутоиммунными заболеваниями как потенциальный метод контроля иммунокорригирующей терапии.//Эфферентная, иммунокорригирующая и интенсивная терапия в клинической практике. В сборнике научных трудов Всероссийской научно-практической конференции с международным участием, 2004 г., Ижевск, с. 54-55.

4. , , Головизнин как стандарт обследования и основа для выбора терапии больных ревматоидным артритом.//Материалы конгресса «Человек и лекарство», Москва, 18-22 апреля 2005 г., с. 74

5. Головизнин Н. И., , Р, , Т-лимфоциты с атипичным «незрелым» фенотипом у больных системными заболеваниями соединительной ткани.//Сборник трудов Всероссийской научно-практической конференции «Контроль инфекций», Москва, 2005, с.12

6. Goloviznin M. V., Timofeev V. T., Buldakova Y. R., Sharova N. I. The level and properties of peripheral blood immature T-lymphocytes in patients with systemic autoimmune diseases (Уровень и особенности незрелых Т-лимфо-цитов периферической крови пациентов с системными аутоиммунными заболеваниями).//Ann Rheum Dis 2005; 64, Suppl III, 129.

7. Goloviznin M., Buldakova Y., Timofeev V., Shmidt E., Sharova N., Lachonina mon autoimmune features of peripheral blood lymphocytes in sarcoidosis and rheumatoid arthritis. (Лимфоциты периферической крови больных саркоидозом и ревматоидным артритом: общие признаки аутоиммунизации)//XIV Congreso Latinoamericano de Alergia, Asma e Inmunología, XIX Congreso Nacional de Alergia e Inmunología. XXX Jornadas Anuales de la AAAelC, 18/08/06 Quinquela, Volumen 37, Supl. 2, 2006, р. 67.

8. , , Тимофеев артрит: клинико-иммунологические показатели больных с ревматоидными узелками.//Материалы Третьей научно-практической конференции «Про-блемы современной ревматологии». ГКГ МВД России, Москва, 2006, с. 50.

9. , , Алиханов и ревматоидный артрит: CD-фенотип лимфоцитов.// Матери-алы конгресса «Человек и лекарство», Москва, 3-7 апреля 2006 г., с. 79.

10. , , Алиханов артрит: клинико-иммунологическая характеристика больных с внесуставными проявлениями.//Вестник Российского государственного медицинского университета, 2006, №1, с. 10-14.

11. , , Лахонина артрит и саркоидоз: сходство и различие клинико-иммунологических показателей»//Материалы Четвертой научно-практической конференции «Проблемы современной ревматологии». ГКГ МВД России, Москва, 2007 г., с. 14

12. , , Р, , Ярилин подход к анализу иммунного статуса больных ревматоидным артритом с учетом нарушения созревания и селекции Т-лимфоцитов.//Материалы Четвертой научно-практической конференции «Проблемы современной ревматологии». ГКГ МВД России, Москва, 2007, с. 38.

13. , , Ярилин созревания Т-лимфоцитов как один из факторов патогенеза системных аутоиммунных заболеваний// Материалы Пятой научно-практической конференции «Проблемы современной ревматологии». ГКГ МВД России, Москва, 2008 г., с. 58.

14. Goloviznin M., Buldakova Y., Timofeev V., Stryuk R., Lachonina N. //Immunological basis of compatibility of extraarticular manifestations in patients with nodular variant of rheumatoid arthritis. Иммунологическая основа развития экстраартикулярных проявлений РА у больных с ревматоидными узелками.//The 13th Congress of Asia Pacific League of Associations for Rheumatology, International Journal of Rheumatic Diseases, 2008, II (Suppl. I), р. 92.

15. M. Goloviznin N., Lachonina N., Timofeev V., Stryuk R., Buldakova Y.. The study of T-cell positive selection in systemic autoimmune diseases. Исследование положительной Т-клеточной селекции при системных аутоиммунных заболеваниях.//Тhe 13th Congress of Asia Pacific League of Associations for Rheumatology, International Journal of Rheumatic Diseases, 2008, II (Suppl. I), р. 336.