Пациентам основной группы (30 человек) с целью улучшения внешнего вида рубцов проводили трансплантацию аутологичных фибробластов в рубцовую зону. В условиях асептики, без предварительной анестезии клеточный препарат вводился в область рубцов интрадермально, инъекционным способом, с помощью шприца. Использовалась папульная техника введения, по методике мезотерапии. Курс лечения состоял из 3-х процедур с интервалом введения 1 месяц.

Общее лечение в обеих группах было одинаковым и заключалось в назначении комплекса витаминов и микроэлементов необходимых для синтеза коллагена и нормальной регенерации кожи: К, Mg, Zn, Cu, Se, витамины: А, Е, С. Препараты назначались per os в период всего лечения рубцов.

Для объективизации процесса лечения и оценки состояния рубцовой ткани применялся метод двухмерного ультразвукового сканирования кожи. При ультразвуковом дермосканировании кожи в области рубцов постакне отмечалось истончение эпидермиса, в дермальном слое визуализировались гипоэхогенные участки.

Полученные результаты и их обсуждение

Результаты экспериментальных исследований

При морфологическом исследовании рубцов кожи лабораторных крыс до и после трансплантации дермальных фибробластов были выявлены следующие изменения.

Экспериментальный рубец на 28-е сутки имеет линейную форму, широкий, располагается несколько ниже уровня нормальной кожи, розового цвета, не спаян с подлежащими тканями. В этой зоне волосяной покров отсутствует. При исследовании гистологических препаратов мы отметили сглаженность и истончение эпидермиса в зоне экспериментального рубца:19,25 ± 1,30 мкм; при норме 40,83±2,35 мкм (р<0,05). В нем удается четко дифференцировать только базальный и роговой слои. При окраске орсеином наблюдаем нечетко контурирующую базальную мембрану, резкую сглаженность и уплощение сосочков дермы. При окраске пикрофуксином по ван Гизон видно, что коллагеновые волокна дермы тоньше, чем в норме. Они располагаются параллельно базальной мембране в прилежащих к рубцу областях, а в центре рубца как перпендикулярно базальной мембране, так и неупорядоченно, хаотично. Дерма в области рубца отечна, что выражается увеличением ее толщины: 1018,00±98,20 мкм; при норме 604,30±58,43 мкм (р<0,05) и наличием многочисленных полостей между волокнами и в интерстициальном пространстве. В самом рубце кожные дериваты отсутствуют. В сосочковом слое дермы отмечается интенсивная клеточная инфильтрация нейтрофилами, моноцитами и макрофагами. Подкожно-жировая клетчатка истончена и атрофична, ее толщина составляет 102,00±11,23 мкм; при норме – 558,40±42,53 мкм (р<0,05).

НЕ нашли? Не то? Что вы ищете?

В середине эксперимента, на 63-и сутки рубец без лечения макроскопически имеет линейную форму, располагается ниже уровня нормальной кожи, достаточно широкий, розового цвета, не спаян с подлежащими тканями. Волосяной покров на самом рубце - отсутствует. Микроскопически сохраняется истончение эпидермиса (23,81±2,01 мкм; р< 0,05), по-прежнему наиболее выражены базальный и роговой слои. Сосочки дермы сглажены. В дерме клеточная инфильтрация, представленная как макрофагами, так и молодыми фибробластами, выражена меньше и в целом толщина дермы снижается и составляет 813,00±81,50 мкм (р<0,05). Отмечается более активное по сравнению с предыдущим сроком формирование кожных придатков – идет образование волосяных луковиц с зачатками волос, но этот процесс представлен в основном на ранних стадиях. Общая плотность волосяных фолликулов снижена и составляет 1,61±0,32%; при норме 3,31±0,31% (р<0,05). Молодые коллагеновые волокна в области послеоперационного рубца неупорядочены, расположены хаотично. Кровеносных сосудов в дерме и гиподерме обычное количество, их просвет не расширен. Подкожно-жировая клетчатка по-прежнему истончена и атрофична (105,70±9,70 мкм; р<0,05).

Рубец на 63-и сутки, после введения аутофибробластов (7-е сутки после 3-ей трансплантации). Макроскопически имеет линейную форму, располагается на уровне здоровой кожи, имеет вид тонкой линии, розового цвета, не спаян с подлежащими тканями. Микроскопически на данном сроке лечения отмечается бурная регенерация всех слоев кожи. Характерно восстановление толщины всех слоев эпидермиса и возрастание его общей толщины до нормы 39,15±2,69 мкм. Толщина дермы снижается за счет полного исчезновения явлений посттравматического отёка и составляет 932,60±98,00 мкм (р<0,05). Архитектоника сосочков дермы восстанавливается, они незначительно вдаются в базальную мембрану, благодаря чему её рельеф становится извилистым. В сосочковом слое в зоне рубца определяются очаги повышенной клеточности за счет скопления молодых фибробластов. Во всех слоях дермы видно большое количество новообразованных кожных дериватов на разных стадиях развития – характерен активный рост формирующихся волос к поверхности кожи. Их плотность возрастает до 21,16 ± 1,21% (р< 0,05), что подтверждает мощное стимулирующее влияние имплантированных фибробластов на регенерацию волосяных фолликулов. Молодые коллагеновые волокна имеют несколько неупорядоченное направление в зоне регенерата, и упорядоченное – в окружающих регенерат зонах. Идет активная регенерация мышечных волокон с восстановлением мышечного слоя. В подкожно-жировой клетчатке большое количество активно пролиферирующих фибробластов и молодых коллагеновых волокон. Толщина гиподермы снижена и составляет 251,18±21,69 мкм (р< 0,05). Кровеносных сосудов умеренное количество, их просвет не расширен.

Рубец на 63-и сутки, после введения аллофибробластов (7-е сутки после 3-ей трансплантации). Макроскопически имеет линейную форму, располагается ниже уровня здоровой кожи, имеет вид тонкой линии, розового цвета, не спаян с подлежащими тканями. На гистологических микропрепаратах также отмечается активная регенерация всех слоев кожи. Эпидермис имеет меньшую толщину, чем в норме (29,99±2,8 мкм; р<0,05), но количество его слоёв восстанавливается. Рельеф базальной мембраны начинает восстанавливаться за счет формирования дермальных сосочков, но они по-прежнему сглажены по сравнению с нормой. Толщина дермы приближается к интактной и составляет 694,00±66,08 мкм. Общая морфологическая картина схожа с регенерацией леченного рубца того же срока с введением аутофибробластов, но формирующиеся придатки кожи находятся в основном на более ранних сроках развития – в зоне регенерата нет волос, достигших поверхности кожи. Однако плотность волосяных фолликулов также значительно выше нормы и составляет 15,75±1,42% (р<0,05). Регенерация мышечных и коллагеновых волокон идет аналогично лечению с использованием аутофиброластов. Толщина слоя подкожно-жировой клетчатки возрастает, но не достигает нормы (245,00±18,22 мкм; р<0,05).

В конце эксперимента, на 102-е сутки рубец без лечения имеет вид широкой линии, лежащей на уровне поверхности кожи, белого цвета, незначительно отличающегося от цвета окружающей нормальной кожи. Отмечается отсутствие волосяного покрова на самом рубце.

В эпидермисе четко визуализируются все четыре слоя, но число клеточных рядов в них по-прежнему уменьшено, поэтому общая толщина эпидермиса остается ниже нормы и составляет 30,84±1,47 мкм (р<0,05).

Регенерация коллагеновых и мышечных волокон продолжается в виде процессов перестройки направления их хода и пространственной ориентировки. Тем не менее, в зоне рубца по-прежнему многие коллагеновые волокна так и не достигают хода, параллельного поверхности кожи, и располагаются неупорядоченно, хаотично. Общая толщина дермы снижается по сравнению с предыдущими сроками и составляет 787,00±74,80 мкм (р<0,05). Дериваты кожи на данном сроке продолжают свое развитие и созревание – плотность волосяных фолликулов сохраняется ниже нормы и составляет 1,82 ± 0,50 % (р<0,05). Выявляются также единичные случаи волосяных луковиц и желез на ранних стадиях развития, что соответствует уже не репаративной, а текущей физиологической регенерации. Подкожно-жировая клетчатка слабо выражена, ее толщина составляет 201,10±18,05 мкм (р<0,05). Мышечные волокна нормальных размеров и структуры. Отмечается разрастание соединительно-тканных прослоек, в которых встречающиеся в небольшом количестве сосуды имеют нормальный просвет.

Рубец на 102-е сутки, после введения аутофибробластов (56-е сутки после 3-ей трансплантации). Рубец имеет вид очень тонкой, едва различимой линии, находящейся на одном уровне и имеющей одинаковый цвет с окружающей интактной кожей. Отмечается полное восстановление волосяного покрова в месте операционного вмешательства.

Микроскопическая картина кожи в зоне рубца приближается к норме. В области рубца выражены все слои эпидермиса, его толщина соответствует нормальным значениям и составляет 39,37±3,36 мкм.

Толщина дермы по-прежнему превышает норму за счет активно идущих регенераторных процессов и формирования новых клеточных элементов и равна 943,00±97,50 мкм (р<0,05). Сосочки дермы хорошо выражены, вдаются в эпидермис. Базальная мембрана по структуре соответствует интактной. В дерме полностью завершается созревание волосяных фолликулов и сальных желез, волосы выходят на поверхность кожи. Общая плотность волосяных фолликулов по-прежнему превышает норму и составляет 22,85±1,81% (р<0,05), что говорит о сохраняющемся высоком уровне регенераторных процессов. Коллагеновые волокна – зрелые, извитые, нормальной толщины, имеют упорядоченное направление и ход. Кровеносные сосуды имеют размеры и форму, соответствующие интактным, просвет не расширен, их количество идентично здоровой коже. Морфологическая структура подкожно-жировой клетчатки и адипоцитов соответствует норме, но ее толщина снижена и составляет 281,30±25,57 мкм (р<0,05). Характерным является продолжение регенераторных процессов, в которых активная репаративная регенерация сосуществует с не менее активной физиологической, что подтверждается наличием наряду со зрелыми кожными дериватами большого количества молодых, формирующихся придатков кожи.

Рубец на 102-е сутки, после введения аллофибробластов (56-е сутки после 3-ей трансплантации). Рубец имеет вид тонкой, но более заметной (чем при введении аутофибробластов) линии, находящейся на одном уровне и имеющей одинаковый цвет с окружающей интактной кожей. Наблюдается полное восстановление волосяного покрова в месте операционного вмешательства.

Из за большого объема этот материал размещен на нескольких страницах:
1 2 3 4