Материалы по токсико–гигиенической оценке биологически активной добавки к пище эпоэкстрин (стр. 3 )

Эпотек обладает антигипоксической активностью во всех исследуемых дозах. Эффект носит дозозависимый нелинейный характер. Отмечено два пика максимальной антигипоксической активности: в дозах 32 и 80 мг/кг. При этом длительность жизни возрастает по сравнению с контролем в 3,8 и в 4,0 раза соответственно. Выживаемость животных, получавших Эпотек в этих дозах, составляет 60%.

Таким образом, исследуемый объект превосходит препарат сравнения Гипоксен, как по влиянию на выживаемость экспериментальных животных, так и по влиянию на продолжительность жизни, и является перспективным антигипоксантом.

Острая гистотоксическая гипоксия

Эксперименты поставлены на 50 белых беспородных мышах самцах массой г. Субстанцию Эпотек вводили однократно перорально в дозах от 1/1000 ЛД50 до 1/50 ЛД50 , препарат сравнения Гипоксен – в дозе 31,5 мг/кг. Введение осуществляли за 60 минут до введения водного раствора натрия нитропруссида (20 мг/кг). Результаты экспериментов представлены в табл. 3.

Таблица 3

Влияние субстанции Эпотек на переносимость мышами самцами ОГТГ (n= 10 в каждой группе )

Препарат	Доза мг/кг	Начало развития	Продолжительность жизни
		судорог, мин.	абс. М ± m, мин	% к контролю	Прирост продолжит. жизни
Контроль	2 мл/кг	9,02±1,2	15,27±3,2	100	-
Гипоксен	31,5	5,05±0,3	14,09±2,1	92,27	-7,73
Эпотек	1,6	9,25±1,4	24,41±4,1	159,90	+60,0
Эпотек	3,2	16.3±2,1	18,16±2,3	118,92	+19,0
Эпотек	32	8,35±1,1	14,43±2,5	94,50	-5,50

Антигипоксический эффект наблюдали при введении субстанции в дозах 1,6 и 3,2 мг/кг, при этом в дозе 1,6 мг/кг он был максимальным. При использовании Эпотека в дозе 32 мг/кг антигипоксический эффект отсутствует. Прирост продолжительности жизни животных, после введения ингибитора тканевого дыхания, составляет 60% при введении Эпотека в дозе 1,6 мг/кг, 19 – при введении субстанции в дозе 3,2 мг/кг. Результаты проведенных исследований показывают, что субстанция Эпотек обладает выраженным антигипоксическим эффектом на этой модели гипоксии в отличие от препарата сравнения Гипоксен.

Острая гемическая гипоксия

Изучение противогипоксической активности исследуемых средств на модели гемической гипоксии проводили на 50 белых беспородных мышах самцах массой г. Субстанцию Эпотек вводили в дозах от 1/1000 ЛД50 до 1/50 ЛД50 , препарат сравнения Гипоксен – в дозе 31,5 мг/кг. Исследуемые объекты вводили перорально однократно за 60 минут до введения водного раствора натрия нитрита (300 мг/кг). Результаты экспериментов представлены в табл. 4.

Таблица 4

Влияние субстанции Эпотек на переносимость мышами самцами ОГГ (n=10 в группе)

Препарат	Доза, мг/кг	Начало развития судорог, мин	Продолжительность жизни
М ± m, мин	% к контролю	Прирост продолжи-тельности жизни	Выжи-ваемость
Контроль	2 мл/кг	15,0±1,7	19,1±2,3	100	-	-
Гипоксен	31,5	10,3±1,1	14,3±1,5	74,9	-25,0	0
Эпотек	1,6	15,6±1,9	26,5±3,1	138,3	38,3	50
Эпотек	3,2	8,4±0,7	18,1±1,7	94,8	-5,2	0
Эпотек	32	11,2±1,3	17,4±1,9	90,7	-9,3	0

Установлено, что антигипоксический эффект у препарата сравнения отсутствует, тогда как исследуемая субстанция Эпотек проявляет противогипоксический эффект на данной модели гипоксии. Максимальный эффект отмечен при использовании субстанции в дозе 1,6 мг/кг, обеспечившей выживание 50% животных, получавших летальную дозу натрия нитрита. При этом длительность жизни животных возрастала по сравнению с контролем в 1,4 раза.

2.4.Исследование актопротекторных свойств

Исследования актопротекторных свойств субстанции Эпотек проводили в условиях “плавательного теста”. Опыты были поставлены на 60 крысах самцах массой –170 г. Оценивали эффективность субстанции и препарата сравнения – настойки листьев женьшеня Фолигин. Эпотек и препарат сравнения вводили в течение 7 дней. Результаты представлены в табл.5.

Таблица 5

Влияние субстанции Эпотек на физическую выносливость крыс самцов (n=10 в каждой группе, введение 7 дней)

Группа, препарат	Доза, мг/кг	Время плавания, М ± m, мин	Прирост времени плавания по отношению к контрольным данным, %
Контроль (вода очищенная)	2мл/кг	9,80±0,46	-
Гипоксен	31,5	12,54±1,64	28
Фолигин	2 мл/кг	20,50±4,90	109
Эпотек	1,6	9,94±2,35	1,5
Эпотек	3,2	10,60±3,72	9
Эпотек	32	14,75±4,12	51

Установлено, что максимальную актопротекторную активность оказывает настойка листьев женьшеня Фолигин в дозе 2 мл/кг (продолжительность плавания животных увеличивается на 109% по сравнению с контролем). При введении другого препарата сравнения Гипоксен также имеет место увеличение времени плавания экспериментальных животных по сравнению с контролем. Однако по влиянию на актопротекторную активность Гипоксен более чем в 2,5 раза уступает настойке листьев женьшеня.

Введение субстанции Эпотек в дозах 1/1000 – 1/50 от ЛД50 (1,6; 16 и 32 мг/кг) приводит к увеличению продолжительности плавания у подопытных животных по сравнению с контролем (1,5; 9 и 51% соответственно). По степени влияния на актопротекторную активность животных введение субстанции Эпотек уступает влиянию препарата сравнения Фолигин, но в дозе 32 мг/кг превосходит другой препарат сравнения Гипоксен.

2.5. Исследование антиоксидантной активности

Эксперименты выполнены на 50 крысах самцах. Субстанцию Эпотек исследовали в диапазоне доз от 1,6 до 32 мг/кг. Препаратом сравнения служил препарат Гипоксен в дозе 31,5 мг/кг. Об антиоксидантой активности субстанции судили по количеству СОД и МДА в плазме крови. Полученные результаты сведены в табл.6.

Таблица 6

Влияние субстанции Эпотек на уровень активности СОД и содержание МДА в плазме крови крыс самцов (n= 10)

Препарат	Доза мг/кг	СОД ( в % ингибирования окисления кверцетина)	МДА индуцированный
		М±m,%	M±m, мкм/л
Контроль	2 мл/кг	67,9±3,12	6,4±0,92
Гипоксен	31,5	64,5±2,3	4,5±0,15
Эпотек	1,6	59,9±2,85	6,2±0,74
Эпотек	3,2	62,8±7,4	5,2±0,6
Эпотек	32	63,6±2,7	4,8±0,5

Таким образом, ежедневное пероральное введение крысам самцам в течение 7 дней, не приводит к статистически значимому изменению содержания продуктов перекисной природы в плазме крови опытных животных по сравнению с животными контрольной группы. Препарат сравнения Гипоксен обладал более выраженной антиоксидантная активностью, которая проявлялась в снижении содержания МДА в плазме крови на 30%.

2.2. Субхроническая токсичность субстанции Эпотек

При оценке субхронической токсичности субстанции Эпотек изучали ее влияние при пероральном длительном (14 дней) введении на состояние и поведение лабораторных животных. Контрольные животные получали воду очищенную. Субстанцию Эпотек вводили в дозах – 1,58 мг/кг, 32 мг/кг и 158 мг/кг. Доза 32 мг/кг входит в диапазон терапевтических доз для крыс. Для исследования каждой дозы препарата использовали группы по 10 животных.

На протяжении всего опыта животные находились под ежедневным наблюдением на стандартном кормовом рационе при свободном доступе к воде. Регистрировали поведение крыс, состояние волосяного покрова и слизистых оболочек. Исследовали функциональное состояние сердечно-сосудистой, мочевыделительной систем, морфологические показатели крови. Все показатели измерялись за неделю до начала введения субстанции Эпотек, еженедельно на протяжении опыта и спустя две недели после окончания введения исследуемых объектов. По окончании эксперимента животных умервщляли путем дислокации шейных позвонков, изымали и взвешивали внутренние органы, готовили препараты для патоморфологического исследования.

Результаты измерений массы тела подопытных животных на протяжении опыта представлены в табл. 7. Динамика массы тела животных, получавших перорально субстанцию Эпотек в разных дозах, не отличалась от группы контроля.

Таблица 7

Влияние длительного перорального введения субстанции Эпотек на динамику массы тела крыс

(n=10 в группе)

Группа животных, препарат, доза, мг/кг	Время взвешивания от начала опыта, нед.	Масса тела, г
Контроль вода очищенная	Исходно 1 2 4*	168,3+12,1 175,2+8,4 186,5+10,1 188,1+ 9,5
Эпотек 15,8	Исходно 1 2 4*	169,2+9,7 175,4+7,6 181,0+8,6 185,5+9,1
Эпотек 32	Исходно 1 2 4*	170,2+9,3 176,7+10,1 175,3+8,9 181,0+8,6
Эпотек 158	Исходно 1 2 4*	171,2+9,5 178,4+8,3 182,2+8,1 186,1+ 9,0

Примечание - * - через 2 недели после окончания введения субстанции Эпотек