Официальные Переводы ЕОКЗР международных фитосанитарных текстов (стр. 9 )

Тестирование на специфическую чувствительность обычно выполняется путем анализа биопроб в лабораторных условиях. Большой прогресс в последнее время был достигнут в развитии инструментов молекулярной биологии для определения резистентности к пестицидам для некоторых видов-мишеней. Такие инструменты могут определить, например, частоту индивидуальных генов, ведущих к появлению резистентности в популяции. Однако, эти методы разработаны пока только для ограниченного числа видов вредных организмов.

Метод, используемый в анализе биопроб, должен соответствовать виду вредного организма и типу препарата для защиты растений, особенно в отношении экспозиции и метода обработки. Он должен быть надежен и воспроизводим, чтобы позволить сделать реалистичную оценку присущей популяции изменчивости в ответ на введение тестируемого вещества и гарантировать, что наблюдаемая вариабельность связана с изменениями внутри популяции вредного организма, а не с изменениями, вызванными самим методом. Методы тестирования были опубликованы для множества вредных организмов и типов препаратов для защиты растений (см., например, методы, опубликованные Комитетами действий по резистентности). Для нового типа препаратов для защиты растений или дополнительных видов может не оказаться подходящих опубликованных методов, и необходимы новые методы тестирования. Как правило, если используемый метод не является уже известным и широко принятым, то заявитель должен объяснить потребность в новом методе с комментариями относительно его применимости и надежности для существующей ситуации.

В анализе биопроб тестируемый материал может быть в виде активного вещества или в виде коммерческой препаративной формы. Если препарат существует только в виде препаративной формы смеси, то при исследовании должно использоваться только отдельное активное вещество. Это связано с тем, что в случае использования препаративной формы смеси изменения в диапазоне чувствительности к активному веществу могут быть замаскированы эффективностью примешиваемого активного вещества. В отношении испытаний препаративной формы в полевых опытах - смотри рекомендации, приведённые ниже в этом тексте.

Важно провести тестирование диапазона доз, позволяющих, по возможности, проверить полный диапазон чувствительности в популяции. Кроме того, в данные о чувствительности может быть полезно включить данные, полученные, по крайней мере, в течение двух сезонов или лет, чтобы охватить изменчивость во времени.

Представление данных о чувствительности

Профиль чувствительности должен представить распределение значений чувствительности согласно установленному критерию. Это могут быть, например, значения ЭК (эффективной концентрации) 50 (или ЛК (летальной концентрации) 50) или ЭК90 (или ЛК90) или значения MПК (минимальной подавляющей концентрации) для тестируемой(ых) популяции(й). Профиль может быть представлен в виде простой кривой (или гистограммы), показывающей долю популяции, соответствующую, например, ЭК50 в рамках определенного класса, или в виде кривой распределения совокупных частот.

Данные о чувствительности используются как точка отсчёта, с которой сравниваются последующие оценки чувствительности, чтобы установить, изменились или нет значения чувствительности. Это может быть сделано путём визуального сравнения графических представлений распределений чувствительности. Подходящие статистические методы также могут быть использованы для описания прямолинейных или криволинейных зависимостей, или распределения совокупных частот, что позволяет провести сравнения.

Форма кривой распределения чувствительности может иногда давать указания в отношении риска возникновения резистентности. Если, например, ещё перед выпуском препарата на рынок, имеются большие различия между чувствительностью проверенных популяций, или если есть прерывистое или бимодальное распределение, то это может указывать на то, что есть четко различающиеся чувствительные и менее чувствительные (резистентные) части в природной популяции (например, наличие перекрестной резистентности или существование рас с различной чувствительностью).

Может быть возможным определить "пороговую дозу" исходя из распределения чувствительности таким образом, чтобы особи популяции, контролируемые дозами препарата ниже этой дозы, считались "чувствительными" и чтобы рост, развитие или выживание организма при этой дозе были объектом дополнительных исследований. Использование пороговой дозы может уменьшить количество работы, необходимой для проведения широкомасштабного мониторинга после выпуска препарата на рынок, но эта доза должна быть выбрана с осторожностью. Если она установлена слишком высокой, то есть опасность не заметить низкие уровни резистентности, тогда как, если доза слишком занижена, то будет много ложных положительных результатов об обнаружении резистентности.

Необходимое количество образцов

Для любой популяции данные о чувствительности должны представить адекватную меру изменчивости популяции в ответ на воздействие тестируемого вещества, и поэтому должны быть получены с помощью образцов адекватного размера. Однако, невозможно предписать количество наблюдений, которые потребуются для всех возможных ситуаций. Чем более варьирует отклик, тем большее количество наблюдений будет требоваться, чтобы установить статистически достоверную кривую соотношения доза/отклик. Изменчивость отклика может зависеть не только от генетической изменчивости в популяции, но и от характеристик тестируемого препарата и используемого метода. Как правило, чтобы определить объём исследований, требуемый для достижения поставленной цели, необходимо суждение эксперта.

Источники данных

Признано, что научно не обосновано представление общего профиля чувствительности, базирующегося на образцах, полученных только из ограниченной зоны (например, с одного поля), поскольку все образцы могут тогда происходить из одной достаточно гомогенной популяции. Предпочтительно построить профиль чувствительности на основе анализа образцов, полученных из разнообразных популяций и из различных местностей, чтобы добиться более широкого представления о генетическом составе вида, определить изменчивость откликов в зависимости от места и избежать сосредоточения на изолированных или нерепрезентативных расах. Места отбора образцов должны включать различные географические зоны в пределах одной или нескольких стран.

В принципе, происхождение образцов должно охватить главные зоны предполагаемого использования вещества, а также главные зоны распространения вредного организма-мишени. Тем не менее, также полезно иметь наблюдения из регионов с низкой интенсивностью использования препарата. Такие данные могут предоставить информацию относительно того, существуют ли изменения чувствительности вследствие факторов, не связанных с использованием препарата (например, климата), или имеются ли различия в чувствительности прежде, чем препарат начал использоваться на рынке (например, метаболическая резистентность).

Точно так же данные о чувствительности могут быть получены исключительно для популяций, происходящих из одной страны, если важность этого вида здесь больше, чем в любой другой стране, и, в особенности, если он показал дифференцированные реакции на существующие препараты для защиты растений в прошлом. Когда образцы прибывают из разных местностей в пределах одной страны, то полученные данные должны быть, по возможности, действительными для соседних стран. Если это заявляется, то заявитель должен предоставить обоснованные аргументы, чтобы поддержать это заявление.

Популяция, используемая для тестирования, должна, как правило, происходить с культуры, на которой препарат будет использоваться, поскольку могут быть различия между расами, развивающимися на разных культурах. Однако, возможно также, что профиль чувствительности, полученный для конкретного вредного организма на одной культуре, может быть действителен для того же организма на другой культуре. Это имеет особое значение для регистрации маломасштабных культур, когда данные о чувствительности могут происходить из опытов на основной культуре. Всякий раз, когда данные о чувствительности получены для культуры, отличной от той, на которой предполагается использовать препарат, заявитель должен предоставить аргументы в поддержку их применимости.

Образцы должны быть отобраны в течение более чем одного сезона выращивания культуры. Метод осуществления отбора образцов должен быть описан в заявке на регистрацию и, по возможности, соответствовать существующим руководствам.

Использование данных об эффективности

Как было упомянуто ранее, для целей регистрации предпочтительны специфические данные о чувствительности (полученные путём анализа биопроб). Однако, имеются проблемы в получении таких данных, могут быть использованы полевые данные об эффективности, чтобы продемонстрировать чувствительность популяций вредного(ых) организма(ов)-мишени(ей). Эти данные могут происходить из опытов по оценке эффективности, проведенных в полевых условиях во время разработки препарата (и, поэтому, могут быть данными об эффективности, представленными как часть регистрационной заявки) прежде, чем резистентность могла повлиять на эффективность. Если данные об эффективности, полученные на современных полевых популяциях, представлены для регистрации, то они должны происходить из зоны, где препарат имеет адекватную эффективность (указывая, таким образом, что резистентность в поле отсутствует или низка).

Данные об эффективности для препаративных форм, содержащих несколько активных веществ, должны быть получены только в отношении коммерческой препаративной формы, поскольку именно действие препарата в том виде, в каком он продается, будет первым индикатором недостатка эффективности и, соответственно, возможной проблемы, связанной с резистентностью. Чтобы определить, является ли резистентность истинной причиной недостаточной эффективности в поле, заявителю будет полезно предоставить исходные данные, полученные в теплице или поле, чтобы продемонстрировать эффективность того компонента, который представляет риск возникновения резистентности, если используется один. Такие данные могут быть использованы, в последствии, в качестве справочной точки отсчёта, в случае изучения оповещений о неудачах в поле.

Ссылки

ЕС (1991) Директива Совета 91/414/EEC от 15 июля 1991 относительно поступления препаратов для защиты растений на рынок. Официальный Бюллетень европейских Сообществ L 230, стр. 1-32.

Heap IM (1997) Возникновение у сорняков резистентности к гербицидам в мире. Наука о Пестицидах 51, 235-243 (обновленный интернет сайт http: // www. ).

ЕОКЗР (1988) Резистентность к фунгицидам: определения и использование терминов. Бюллетень ЕОКЗР 18, 569-574.

ЕОКЗР (1993) Стандарты ЕОКЗР РР2/1 Принципы хорошей практики защиты растений. Бюллетень ЕОКЗР 24, 233-240.

ЕОКЗР (2001) Стандарты ЕОКЗР РР2/2-26. Хорошая Практика Защиты Растений, ЕОКЗР, Париж (Франция).

Tomlin C (1998) Комитет действий по резистентности к инсектицидам (КДРИ). Руководство по Пестицидам, 11th edn. стр. xxxiv–xli. BCPC, Farnham (GB).

Van Gemerden JF, De Goey JWFM и Rotteveel AJW (1999) Руководство по оценке риска резистентности. Бюллетень ЕОКЗР 29, 111-116.