171929 Методы анализа необходимые для проверки состава косметической продукции (V) (стр. 3 )

3.4.n-Пентан.

3.5.Подвижная фаза: диэтиловый эфир

3.6.Стандартный раствор бензилового спирта: в мерной колбе на 100 мл взвесить 0,1 г бензилового спирта (3.1),  довести до метки этанолом (3.3) и перемешать.

3.7.ТСХ, стекло, 100 мм Ч 200 мм или 200 мм Ч 200 мм, покрытое слоем силикагеля 60 F254, с толщиной 0,25 мм.

3.8.Реагент для окрашивания: кислота 12-молибденовая, 10% (m/v) в этаноле (3.3).

4. ОБОРУДОВАНИЕ

4.1.Стандартное оборудование для ТСХ

4.2.Хроматографическая камера с двумя отделениями, размером примерно 80Ч230Ч240мм

4.3.Хроматографическая бумага: ватман, или эквивалент

4.4.УФ свет с длиной волны 254 nm.

5. ПРОЦЕДУРА

5.1.Приготовление пробы

В мерной колбе на 10 мл взвесить 1,0 г продукта для анализа. Добавить 3 мл хлороформа (3.2) и энергично встряхивать, пока продукт не растворится. Довести до метки  этанолом (3.3) и энергично встряхивать до получения прозрачного или почти прозрачного раствора.

5.2. Тонкослойная хроматография

5.2.1. Хроматографическую камеру (4.2) насытить n-Пентаном (3.4) следующим образом: стенку камеры, прилегающей к задней части, выстлать хроматографической бумагой (4.3) так, чтобы нижний край бумаги находился в желобе. В задний отсек перенести 25 мл n-Пентана (3.4), вылив его на открытую поверхность хроматографической бумаги. Закрыть крышкой и оставить в течение 15 мин.

5.2.2. На соответствующие точки линии старта хроматографической пластины (3.7) нанести 10 µl раствора пробы (5.1) и 10 µl стандартного раствора бензилового спирта (3.6). Дать высохнуть.

5.2.3. В переднюю часть камеры  пипеткой внести 10 мл диэтилового эфира (3.5) и немедленно положить туда пластину. Быстро закрыть крышкой и  развивать хроматограмму  на расстоянии 150 mm от линии старта. Вынуть пластину из хроматографической камеры и сушить при комнатной температуре.

5.2.4. Пластину (5.2.3) изучить при ультрафиолетовом свете и отметить места фиолетовых пятен. Опрыскать пластину проявляющим веществом (3.8), а затем нагревать в течение 15 минут при температуре 120°С. Бензиловый спирт проявляется темно-синим цветом.

5.2.5. Рассчет Rf - значения для стандартного раствора бензилового спирта. Темно-синее пятно с тем же Rf - значением, полученное из раствора пробы, указывает на наличие бензилового спирта.

Предел обнаружения: 0,1 µg бензилового спирта.

В. ОПРЕДЕЛЕНИЕ

1. ПРЕДМЕТ И ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ

Этот метод применяется для определения бензилового спирта в косметических продуктах.

2. ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Количество бензилового спирта определяется с помощью этого метода и выражается в % массы (% m/m).

3. ПРИНЦИП

Проба экстрагируется метанолом и количество бензилового спирта в экстракте определяется методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ).

4. РЕАГЕНТЫ

Все реагенты должны быть аналитической чистоты и подходить для ВЭЖХ.

4.1. Метанол

4.2. 4-этоксифенол

4.3. Бензиловый спирт

4.4. Подвижная фаза: метанол (4,1) / вода = 45: 55 (v/v)

4.5. Исходный раствор бензилового спирта: Взвесить с точностью около 0,1g бензилового спирта (4.3) в мерной колбе на 100 мл. Довести до метки метанолом (4.1) и перемешать.

4.6. Исходный раствор внутреннего стандарта: в мерной колбе на 100 мл взвесить около 0,1 г 4-этоксифенола (4.2). Довести до метки метанолом (4.1) и перемешать.

4.7. Стандартные растворы: в набор мерных колб внести пипеткой по 25 мл исходного раствора бензилового спирта (4.5) и основного раствора внутреннего стандарта (4.6) в соответствии с приведенной ниже таблицей. Довести до метки метанолом (4.1) и перемешать.

Стандартный раствор	Концентрация бензилового спирта	Концентрация 4-этоксифенола
Добавлено мл (4.5)	µg/ мл (3)	Добавлено мл (4.6)	µg/мл(3)
I	0,5	20	2,0	80
II	1,0	40	2,0	80
III	2,0	80	2,0	80
IV	3,0	120	2,0	80
V	5,0	200	2,0	80

5. ОБОРУДОВАНИЕ

5.1. Стандартное лабораторное оборудование

5.2. Хроматограф для жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с УФ-детектором с переменной длиной волны и циклом ввода 10µl.

5.3. Аналитическая колонка: колонка из нержавеющей стали 250 мм Ч 4,6 мм, заполненая Spherisorb ODS 5µm или эквивалент.

5.4. Водяная баня.

5.5. Ультразвуковая баня.

5.6. Центрифуга.

5.7. Центрифужные пробирки  объемом 15 мл.

6. ПРОЦЕДУРА

6.1. Приготовление пробы

6.1.1. В центрифужную пробирку (5.7) внести около 0,1 г (M) образца с точностью до 0,001 г и добавить 5 мл метанола (4.1).

6.1.2. Нагреть в течение 10 минут на водяной бане (5.4) при 50°С, затем поместить пробирку в ультразвуковую баню (5.5), в которой полностью диспергируется проба.

6.1.3. Охладить и затем центрифугировать при 3500 оборотов в минуту в течение 5 минут.

6.1.4. Надосадочную жидкость перенести в мерную колбу на 25 мл.

6.1.5. Для пробы повторно экстрагировать 5 мл метанола (4.1). Экстракты объединить в мерную колбу на 25 мл.

6.1.6. В мерную колбу на 25мл пипеткой внести 2,0 мл исходного раствора внутреннего стандарта (4.6). Довести до метки метанолом (4.1) и перемешать. Этот раствор используется на этапе определения, указанного в пункте 6.4 настоящей главы.

6.2. Хроматография

6.2.1.Жидкостный хроматограф (5.2) готовится к работе в обычном порядке. Регулируется поток подвижной фазы (4.4) до 2,0 мл / мин.

6.2.2. Длина волны УФ-детектора (5.2) на 210 nm.

6.3. Эталонирование

6.3.1. Впрыснуть по 10 µl каждого из стандартных растворов бензилового спирта (4.7) и измерить площадь пиков бензилового спирта и 4-этоксифенола.

6.3.2. Для каждого из стандартных растворов бензилового спирта (4.7) рассчитать соотношение площадей пиков бензилового спирта и 4-этоксифенола с построением стандартной кривой и использованием данных коэффициентов по оси ординат и соответствующих концентраций бензилового спирта в µg на 1мл на оси абсцис.

6.4. Определение

6.4.1. Вколоть 10 µl раствора образца (6.1.6) и измерить  величину пиков бензилового спирта и 4-этоксифенола. Рассчитать соотношение между площадями пиков бензилового спирта и 4-этоксифенола. Эту процедуру повторить с другими аликвотами по 10 µl раствора пробы до получения  устойчивых результатов.

6.4.2. Из эталонной кривой (6.3.2) рассчитать концентрацию бензилового спирта, соответствующую соотношению общей площади пиков бензилового спирта и 4-этоксифенола.

7. РАСЧЕТ

Содержание бензилового спирта в пробе, % (m/m), вычисляется по следующей формуле:

%(m/m)бензиловый спирт=,

где:

m - масса в граммах пробы, отобранной для анализа (6.1.1);

с - концентрация бензилового спирта в растворе пробы (6.1.6) из эталонной кривой, в µg на 1мл.

8. ПОВТОРЯЕМОСТЬ(1)

При содержании бензилового спирта,1% (м/м) разница между двумя параллельными определениями одной и той же пробы не должна превышать 0,10%.

IV. ИДЕНТИФИКАЦИЯ ЦИРКОНИЯ И ОПРЕДЕЛЕНИЕ ЦИРКОНИЯ, АЛЮМИНИЯ И ХЛОРА В НЕАЭРОЗОЛЬНЫХ АНТИПЕРСПИРАНТАХ

Способ включает пять этапов:

А. Идентификация циркония.

В. Определение циркония.

С. Определение алюминия.

D. Определение хлора.

Е.  Расчет соотношения атомов алюминия к атомам циркония и соотношения атомов алюминия и атомов циркония к атомам хлора.

А. ОПРЕДЕЛЕНИЕ ЦИРКОНИЯ

1. ПРЕДМЕТ И ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ

Этот метод описывает идентификацию циркония в неаэрозольных антиперспирантах. Не существует описанных методов для идентификации комплекса гидроксида алюминия и циркония хлорида [АlXZr (OH)YClZ· nH2O].

2. ПРИНЦИП

Цирконий идентифицируется характерным красно-фиолетовым осадком, полученным с ализариновым красным S в сильно кислых условиях.

3. РЕАГЕНТЫ

Все реагенты должны быть аналитической чистоты.

3.1.Концентрированная соляная кислота (d20= 1,18 г/мл)

3.2.Раствор ализариновый красный S (Cl 58005): 2% (m/v) сульфонат ализарина на водном растворе гидрокарбоната натрия.

4. ОБОРУДОВАНИЕ

4.1.Стандартное лабораторное оборудование

5. ПРОЦЕДУРА

5.1. В пробирку на 1 г пробы добавить 2 мл воды. Закрыть пробкой и встряхнуть.

5.2. Добавить три капли ализаринового красного S (3.2), а затем 2 мл концентрированной соляной кислоты (3.1).Закрыть пробкой и встряхнуть.

5.3. Дать постоять в течение 2 минут.

5.4. Красно-фиолетовый окрашенный раствор супранатант и осадок указывают на присутствие циркония.

B. ОПРЕДЕЛЕНИЕ ЦИРКОНИЯ

1. ПРЕДМЕТ И ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ

Этот метод пригоден для определения циркония в циркониевых комплексах гидроксидахлорида алюминия и циркония до максимальной концентрации циркония в неаэрозольных антиперспирантах 7,5 % (m/m).

2. ПРИНЦИП

Цирконий эксмтрагируется из продукта в кислых условиях и определяется атомно-абсорбционной спектрометией в пламени.

3. РЕАГЕНТЫ

Все реагенты должны быть аналитической чистоты.

3.1. Концентрированная соляная кислота  (d20= 1,18 г/мл)

3.2. Раствор соляной кислоты, 10% (v/v): в химический стакан внести 500 мл воды и 100 мл концентрированной соляной кислоты (3.1) при постоянном перемешивании. Этот раствор перенести в мерную колбу на 1 л и довести до метки водой.

3.3. Исходный стандартный раствор циркония: 1 000 µg /мл в 0,5 М растворе хлористоводородной кислоты ("SpectrosoL" или эквивалент).

3.4. Раствор хлорида алюминия (гидратированный) (AlCl3· 6H2O): 22,6 г гексагидрата хлорида алюминия растворить в 250 мл 10% (v/v) раствора соляной кислоты (3.2).

3.5. Раствор хлорида аммония: 5,0 г хлорида аммония растворить в 250 мл 10% (v/v) раствора соляной кислоты (3.2).

4. ОБОРУДОВАНИЕ

4.1. Стандартное лабораторное оборудование

4.2. Нагреватель с магнитной мешалкой