Актуальные вопросы современной науки (стр. 4 )

ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Объектом исследования являются стерильные верхушечные столоны (усы) Fragaria × ananassa (Weston) Duchesne. Были отобраны наиболее востребованные сорта земляники: «ЗенгаЗенгана», «Лорд», «Гигантелла».

Исследования по культивированию в условиях invitroпроводили в соответствии с методическими указаниями по культуре ткани и органов в селекции растений [1, 3, 4]. Обработка экспериментальных данных выполнена на основе методов математической статистики по методикам, опубликованным Доспеховым [2].

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Проведенными исследованиями выявлено, что успех введения в культуру тканей определяется эффективностью стерилизации. Как показал сравнительный анализ действия различных стерилизующих агентов, использование хлорсодержащих веществ обеспечивало достаточную стерильность материала.

Среди изученных агентов пергидроль 10-12 % обладал наименьшим стерилизующим эффектом, в основном грибная инфицированность эксплантов составляла 92 % (рис. 1-3, табл. 2).

Рис 1 – сорт «ЗенгаЗенгана»	Рис 2 – сорт «Гигантелла»	Рис 3 – сорт «Лорд»

Таблица 2

Влияние различных стерилизующих агентов на обеззараживание материала
в условиях invitro

Стерилизующий агент	Концентрация, %	Время обработки, мин	Количество введенныхэксплантов, шт.	Наличие инфекции,%	Неинфицированные растения	Развитие регенерантов в баллах
%
Пергидроль	10-12	10-15	50	92	8	2
20	50	40	60	4
Дезэфект	≈30	5	50	85	15	3
15	50	60	40	3
30	50	35	65	5
60	50	70*	30	2
хлоргексидин	0,1	15-20	50	10	90	5

* - поражение дезинфицирующим агентом слишком большое

Количество стерильных проростков не превышало 8 %. После обработки эксплантов земляники пергидролем с концентрацией 10-12% растения формировались недоразвитыми и уродливыми. Их длина составляла 1-3 мм. Листочки на проростках были скручены и имели светло-зеленый окраску. Корешок растения имел длину 1-2 мм. Оценка состояния проростка по 5 балльной шкале составляла 2 балла. Растения обладали низкой жизнеспособностью, через 10 дней культивирования проростки загнивали и не могли использоваться для дальнейшей работы.

Применение раствора пергидроля с концентрацией примерно 20% обеспечивало больший стерилизующий эффект материала – 60 %. Аномалий в развитии проростков после обработки эксплантов 20%-ым раствором пергидроля не наблюдалось. При этом растения имели хорошо развитую корневую систему с многочисленными боковыми корешками. Длина главного корня составляла 7-8 мм. Утолщенный стебель имел длину 5-6 мм. Проросток был насыщено зеленого цвета. Оценка состояния проростков – 4 баллов.

30%-ый раствор дезэфекта с различным временем экспозиции имел неодинаковый стерилизующий эффект на экспланты. Так было установлено, что наибольшее инфицирование получили пассажи, время обработки которых не превышало 5 мин – 85%. При этом развивающиеся проростки уродливы, листочки не цельные, длина корешков 3-4 мм. Несколько лучше обстоят дела для эксплантов, обрабатывание которых продолжалось 15 мин – 60%, проростки также не жизни способны. После воздействия дезэфекта в течение 60 мин экспланты имели обширные площади повреждения. Даже тщательное удаление поврежденных участков не позволило окончательно от них избавиться и большинство пассажей после посадки на питательную среду очень быстро погибли. Растеньица так же как и в случае с пергидролем не могли использоваться для дальнейшей работы. Наилучшим результат показала стерилизация объектов в течение 30 минут – 35%. При этом растения имели хорошо развитую корневую систему с многочисленными боковыми корешками. Длина главного корня составляла 5-6 мм. Утолщенный стебель имел длину 3-4 мм. Проросток имел насыщенную зеленую окраску. Оценка состояния проростков – 5 баллов

Высокий стерилизующий эффект наблюдался так же после обработки материала 0,1%-ым раствором хлоргексидина – 90 %. При его применении общая зараженность растений составляла 10 %. Использование раствора оказывало положительное действие на жизнеспособность проростков. Так, после двух месяцев культивирования растения выглядели сильными. Длина корешка от 2 до 5 см. Стебелек проростка имел ярко-зеленую окраску, длина составила примерно 0,5-3 см (рис. 4-6). Оценка состояния проростков – 5 балла.

Рис 4 – сорт «ЗенгаЗенгана» через 2 месяца после введения в культуру	Рис 5 – сорт «Гигантелла» через 2 месяца после введения в культуру	Рис 6 – сорт «Лорд» через 2 месяца после введения в культуру

Заключение

Таким образом, оптимальным стерилизующим агентом для обеспечения стерильности и сохранения высокой жизнеспособности вводимого материала в наших исследованиях был раствор хлоргексидина в концентрации 0,1 %.

Литература

1.  Бутенко клеток высших растений invitro и биотехнологии на их основе: учеб. Пособие. – М.: ФБК-ПРЕСС, 199. – 160 с.

2.  Доспехов полевого опыта (с основами статистической обработки результатов исследований). — 5-е изд., доп. и перераб.—М.: Агропромиздат, 1985. — 351 с.

3.  Инновационные технологии возделывания земляники садовой: науч.-практ. изд. – М.: ФГНУ «Росинформагротех», 2010. – 88 с.

4.  , , Сарнацкая микроклонального размножения растений. – Киев: Наукова думка, 1992. – 232 с.

ИЗУЧЕНИЕ СВОЙСТВ КОМПЛЕКСНОГО СПИРТОВОГО ЭКСТРАКТА БАРВИНКА РОЗОВОГО, ЛАВРОВИШНИ ЛЕКАРСТВЕННОЙ И МИРТА ОБЫКНОВЕННОГО. ОПРЕДЕЛЕНИЕ ФИЗИОЛОГИЧЕСКОГО ВЛИЯНИЯ ЭКСТРАКТА НА РЕЦИДИВНЫЙ ПРОЦЕСС У БОЛЬНЫХ ЛИМФОГРАНУЛЕМАТОЗОМ

1, 2, 3

1Факультет Физической культуры и биологии Кубанского государственного университета»,

филиал в г. Славянск-на-Кубани;

2МУЗ «3 городская больница Администрации г. Новороссийска»;

3Кафедра Физической культуры и естественно-биологических дисциплин Кубанского государственного университета, филиал в г. Славянск-на-Кубани.

Г. Славянск-на-Кубани, Россия.

Созданием панацеи от онкологических заболеваний фармацевты заняты с самого начала обнаружения раковых заболеваний.

Данная работа направлена на исследование влияния комплексного экстракта Барвинка розового Лавровишни лекарственной и Мирта обыкновенного в комплексной терапии рецидивного процесса лимфомы Ходжкина. Объектом исследования является поведение рецидивного процесса лимфомыпри применении комплексного экстракта.

Химическое исследование экстракта проводилось по следующим показателям:

Содержания этилового спирта. Определение проводится методом рефрактометрии. Определение кислотности вытяжки. Общую кислотность определяют кислотно-основным титрованием экстракта раствором щелочи.Определение аскорбиновой кислоты. Основано на его реакции с иодом, в присутствии крахмала.Количественное определение глюкозы в экстрактах.Основан метод на измерении объема исследуемого раствора, необходимого для полного восстановления точного объема фелинговой жидкости. Качественное определение витаминовпроводилось на основе качественных реакций. Определялись следующие витамины:А, Е, В2, В6, РР. Определение содержания минеральных веществ. Основано на качественных реакциях на отдельный ион. Определялись следующие минеральные вещества: кальций, медь, железо, алюминий, магний, сера, фтор, хлор.

Исследование проводилось в условиях ГБОУ ВПО «Кубанского государственного университета филиала в г. Славянск – на – Кубани».

Клиническое исследование на рецидив лимфомы Ходжкина.

Количественное применение комплексного экстракта основано на личном самочувствии пациента. Если наблюдалось ухудшение здоровья дозу препарата либо уменьшали, либо прием останавливали. 15 больных лимфогранулематозом принимали экстрактный препарат с 20 капель, и дозу увеличивали каждый день на 5 капель. Эксперимент проводился под наблюдением врача онко-гематолога высшей категории.

Отслеживаются каждые 4 дня общий анализ крови с лейкоформулой и содержанием глюкозы, размеры новообразования. Ежедневно контролировалось физическое состояние организма: артериальное давление, шумы сердца, легочный ритм дыхания и размеры селезенки.

Клиническое исследование экстракта проводилось в условиях МУЗ «Новороссийский онкологический диспансер» на базе гематологического отделения 3 городской больницы г. Новороссийска.

Химическое исследование

Содержание этилового спита (по рефрактометру) 76-77 %. Кислотность экстракта 0,46 %. Содержание аскорбиновой кислоты 0,87 мг/кг. Содержание редуцирующих сахаров в пересчете на глюкозу 20,0 мг/л. Обнаружены витамины: А, Е, В2, В6, РР. Обнаружены ионы: Ca2+, Cu2+, Fe2+, Al3+, Mg2+, S2-, F - и Cl-

Клиническое исследование на рецидив лимфомы Ходжкина

Проводилось в условиях МУЗ «Новороссийский онкологический диспансер» на базе 3 городской больнице города Новороссийска, в гематологическом отделении

Таблица 1

Усредненные данные анализа крови с лейкоформулой пациентов

Дата	Основные показатели крови	Показатели лейкоформулы крови, %
Гемоглобин, г/л	Лейкоциты, тыс./мкл	Тромбоциты, тыс./мкл	Эритроциты, тыс./мкл	СОЭ, мм/час	Глюкоза, ммоль/л	Нейтрофилы палочкоядер.	Нейтрофилы сегментоядер.	Эозинофилы	Базофилы	Моноциты	Лимфоциты
Норма	120-150	4,0-9,0	150-400	380-500	До 17	3,3-5,5	До 5	До 70	До 5	До 1	До 11	До 40
10.12.	136	15,0	320	385	55	6,6	6	84	5	-	3	16
14.12.	130	14,1	311	385	56	6,7	6	82	5	-	3	18
18.12.	127	12,3	316	384	51	5,5	6	79	5	-	2	21
22.12.	127	11,2	300	386	48	5,2	5	76	5	-	3	21
26.12.	124	11,0	298	390	42	5,1	5	75	5	-	4	22
30.12.	121	10,2	288	397	33	5,0	5	72	5	-	5	22
02.01.	120	9,5	281	402	29	4,7	4	71	4	-	7	25
06.01.	117	9,5	274	394	25	4,2	4	68	4	-	6	25
10.01.	112	8,1	255	381	23	4,1	4	68	5	-	7	25
14.01.	110	8,1	231	378	20	3,9	4	63	4	-	7	25
18.01.	110	8,1	209	370	20	3,7	3	63	4	-	7	28
22.01.	108	8,0	200	364	18	3,7	3	63	4	-	7	28
26.01.	104	7,8	198	352	18	3,5	3	62	4	-	8	30
01.02.	104	7,6	191	344	16	3,5	3	62	3	-	8	30
04.02.	104	7,7	185	334	16	3,3	3	60	3	-	8	30
08.02.	100	7,0	176	334	16	3,4	2	60	3	-	8	32
12.02.	96	6,8	179	331	13	3,4	2	58	3	-	8	35

Таблица 2