Глава IV. Механизмы формирования патологии (стр. 4 )

Результаты. Обнаружено, что у больных ИБС различных ФК агрегация тромбоцитов с различными индукторами не изменена по сравнению с контрольной группой, хотя имеется тенденция к повышению спонтанной агрегации. Отмечается повышение уровня фактора Виллебранда у больных с II и III ФК. Более выраженные изменения в системе свертывания крови у больных ИБС обнаружены при исследовании состояния плазменного гемостаза. Так, у больных со II и IV ФК стенокардии АЧТВ имеет тенденцию к укорочению. С увеличением ФК стенокардии выявляется тенденция повышения концентрации фибриногена в плазме крови. У больных ИБС со II ФК стенокардии содержание фибриногена повышено на 40,9%, при III ФК – на 63,6%, а при IV ФК – на 72,7%. Увеличение концентрации фибриногена и продуктов его деградации в процессе образования фибрина является известным молекулярным маркером гиперкоагуляционного статуса. Независимо от ФК стенокардии, у больных ИБС повышено содержание РФМК, что характеризует активацию внутрисосудистого свертывания у данной категории больных. Только у больных с III и IV ФК стенокардии выявляется достоверное повышение уровня плазминогена. Причем, содержание плазминогена в плазме крови у больных с III ФК стенокардии повышено как относительно контрольного диапазона, так и значений, выявленных у больных с II ФК стенокардии. В то же время, у больных, имеющих IV ФК стенокардии, количество плазминогена относительного контрольного уровня повышается менее выражено по сравнению с больными имеющими III ФК. Известно, что плазминоген подобно фибриногену, является воспалительным белком. Поэтому его повышение при атеросклерозе, который характеризуется хроническим воспалением интимы в области атеромы вполне закономерно.

При исследовании уровней активности НАДФ-зависимых дегидрогеназ в тромбоцитах обнаружено, что при II и IV ФК стенокардии относительно контрольного диапазона снижена активность Г6ФДГ. Только у больных III ФК в тромбоцитах снижена активность НАДФМДГ. Только у больных IV ФК в тромбоцитах повышена активность ГР. Причем, данное повышение проявляется как относительно контрольного диапазона, так и значений, выявленных при II функциональном классе. В то же время, активность НАДФГДГ в тромбоцитах снижена у больных II и III функционального класса.

Значительные изменения установлены и в уровнях активности НАД-зависимых дегидрогеназ тромбоцитов у больных ИБС. Так, независимо от ФК у больных снижается активность Г3ФДГ. Выявляется тенденция снижения активности ЛДГ с увеличением степени ФК: отсутствие достоверных различий с контрольным диапазоном у больных II ФК, при III ФК – понижение на 38,8%, при IV – 43,4%. Обратная тенденция установлена при исследовании активности НАДН-ЛДГ: также отсутствие различий с контрольным диапазоном у больных II ФК, при III ФК – повышение в 3,0 раза, при IV – в 4,5 раза. Только у больных III функционального класса в тромбоцитах повышается активность НАДН-МДГ.

Заключение. Таким образом, установленное в нашем исследовании повышение уровня фибриногена, активация плазменного звена гемостаза, угнетение системы фибринолиза, повышение уровня плазминогена, увеличение в крови уровня фактора Виллебранда, являющегося биохимическим маркером повреждения эндотелия, свидетельствует о повышении у больных со стенокардией II-IV ФК коагуляционного потенциала и возрастании тромбогенного риска. В тромбоцитах крови у больных ИБС на фоне снижения интенсивности пластического обмена и аэробного дыхания повышается активность анаэробных энергетических процессов. С увеличением ФК стенокардии снижается уровень аэробных процессов в тромбоцитах и повышается интенсивность реакций, характеризующих анаэробный гликолиз. Подобное изменение метаболического статуса тромбоцитов определяет изменение их функциональной активности. Подробное изучение механизмов и структуры изменения метаболических процессов в тромбоцитах позволит разработать методы медикоментозной коррекции их функциональной активности.

ОСОБЕННОСТИ МЕТАБОЛИЗМА ФЕРМЕНТОВ ЛИМФОЦИТОВ У БОЛЬНЫХ ОСТРЫМ НЕЛИМФОБЛАСТНЫМ ЛЕЙКОЗОМ

НИИ медицинских проблем Севера СО РАМН,

Красноярский филиал ГНЦ, Красноярск

Целью настоящего исследования явилось изучение особенностей состояния метаболического статуса лимфоцитов крови у больных ОНЛЛ в зависимости от стадии заболевания.

Материалы и методы: всего под наблюдением находились 100 больных ОНЛЛ с иммунофенотипическим вариантом М4. Средний возраст заболевших составил 42,7±1,5 лет. У 30 больных заболевание было выявлено в стадии первичной атаки, у 49 - в стадии полной ремиссии после проведенного лечения, и у 21 – в стадии повторного рецидива. В качестве контроля обследовано 106 здоровых лиц аналогичного возраста. Определение активности НАД(Ф)-зависимых дегидрогеназ лимфоцитов крови проводилось биолюминесцентным методом при поступлении больных до начала патогенетического лечения. Данным методом определялась активность следующих ферментов: глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы (Г6ФДГ), глицерол-3-фосфатдегидрогеназы (Г3ФДГ), малик-фермента (НАДФМДГ), НАД - и НАДН-зависимой реакции лактатдегидрогеназы (ЛДГ и НАДН-ЛДГ), НАД - и НАДН-зависимой реакции малатдегидрогеназы (МДГ и НАДН-МДГ), НАДФ - и НАДФН-зависимой глутаматдегидрогеназы (НАДФГДГ и НАДФН-ГДГ), НАД - и НАДН-зависимой глутаматдегидрогеназы (НАДГДГ и НАДН-ГДГ), НАД - и НАДФ-зависимых изоцитратдегидрогеназ (НАДИЦДГ и НАДФИЦДГ, соответственно) и глутатионредуктазы (ГР). Описание выборки производили с помощью подсчета медианы (Ме) и интерквартального размаха в виде 25 и 75 процентилей (С25 и С75). Достоверность различий между показателями независимых выборок оценивали по критерию Манна-Уитни. Статистический анализ осуществляли в пакете прикладных программ Statistica 7.0 (StatSoft Inc., 2004).

Результаты. Уровень иммунореактивности определяется не только морфологическим составом клеток иммунной системы и концентрацией иммуноглобулинов в сыворотке крови, но и уровнем метаболических процессов в них, которые в значительной степени определяют функциональную активность иммуноцитов. При исследовании состояния метаболического статуса лимфоцитов крови у больных ОНЛЛ установлено, что активность Г3ФДГ снижена относительно контроля и показателей при ремиссии заболевания, у больных при рецидиве. Активность ферментов ЛДГ, НАДФИЦДГ, МДГ, НАДИЦДГ снижена относительно контроля у всех групп больных. Активность НАДН-ЛДГ снижена относительно контроля у больных при атаке и рецидиве ОНЛЛ. Активность фермента ГР снижена относительного контроля у больных при атаке и ремиссии, у больным при рецидиве активность данного фермента достоверно выше, чем у больных оставшихся групп.

У больных при атаке ОНЛЛ выявляется усиленное напряжение метаболизма митохондриального компартмента иммуноцитов крови. Также снижены интенсивность терминальных реакций гликолиза и уровень концентрации интермедиатов для цикла Кребса. Возникает субстратный недостаток в лимонном цикле лимфоцитов. Ингибирование реакций цикла Кребса не связано с оттоком субстратов на реакции аминокислотного обмена. Особенностью метаболизма лимфоцитов крови у больных данной группы является снижение перекисных процессов в клетках крови, однако, сохраняется возможность реагирования их внутриклеточных антиоксидантных систем.

У больных при ремиссии ОНЛЛ снижена интенсивность гликолиза. Остальные метаболические изменения в лимфоцитах крови аналогичны нарушениям у больных при атаке.

У больных при рецидиве ОНЛЛ снижается интенсивность переноса продуктов липидного катаболизма на окислительно-восстановительные реакции гликолиза. Подобное состояние реакций соответственно может привести к ингибированию гликолиза. При этом можно предположить, что ингибирование ферментативных реакций гликолиза в лимфоцитах крови больных на данной стадии осуществляется на терминальных реакциях. В митохондриальный компартмент этих больных поступает пониженное количество пирувата, что, соответственно, приводит к ингибированию ферментативных реакций цикла трикарбоновых кислот. Особенностью метаболизма клеток иммунной системы у больных данной группы является повышение перекисных процессов в клетках крови и возможность реагирования внутриклеточных антиоксидантных систем.

Заключение: у больных ОНЛЛ на всех стадиях заболевания регистрируются нарушения метаболического статуса лимфоцитов крови. Изменения этого статуса во многом определяют функциональную активность этих клеток и опосредованно влияют на возникновение и прогрессирование заболевание. Проведенное нами исследование активности метаболических ферментов лимфоцитов показало, что у всех больных ОНЛЛ вне зависимости от стадии заболевания в лимфоцитах выявляется функциональная недостаточность, проявляющаяся уменьшением интенсивности метаболических процессов и снижением антиоксидантной защиты клеток, однако в стадии атаки и ремиссии нарушения метаболизма в основном затрагивают углеводный обмен, а при рецидиве – углеводный и жировой обмены. Таким образом, изменения, возникающие у больных ОНЛЛ при рецидиве, свидетельствуют об истощении метаболических резервов клеток иммунной системы.

ОСОБЕННОСТИ МЕТАБОЛИЧЕСКИХ ПАРАМЕТРОВ ЛИМФОЦИТОВ У БОЛЬНЫХ ХРОНИЧЕСКИМ МИЕЛОЛЕЙКОЗОМ И ХРОНИЧЕСКИМ ЛИМФОЛЕЙКОЗОМ

НИИ медицинских проблем Севера СО РАМН,

Красноярский филиал ГНЦ, Красноярск

Целью настоящего исследования явилось изучение особенностей состояния метаболического статуса лимфоцитов крови у больных ХМЛ и ХЛЛ в зависимости от стадии заболевания.

Материалы и методы: всего под наблюдением находилось 44 больных ХМЛ и 57 больных ХЛЛ. Средний возраст заболевших составил 55,2±2,4 года у больных ХМЛ и 55,4±1,6 лет у больных ХЛЛ. У 20 больных ХМЛ и 32 больных ХЛЛ заболевание диагностировалось в развернутую стадию, а у 24 ХМЛ и 25ХЛЛ – в терминальную стадию. В качестве контроля обследовано 106 здоровых лиц аналогичного возраста.

Определение активности НАД(Ф)-зависимых дегидрогеназ лимфоцитов крови проводилось биолюминесцентным методом при поступлении больных до начала патогенетического лечения. Данным методом определялась активность следующих ферментов: глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы (Г6ФДГ), глицерол-3-фосфатдегидрогеназы (Г3ФДГ), НАД - и НАДН-зависимой реакции лактатдегидрогеназы (ЛДГ и НАДН-ЛДГ), НАД - и НАДН-зависимой реакции малатдегидрогеназы (МДГ и НАДН-МДГ), НАДФ - и НАДФН-зависимой глутаматдегидрогеназы (НАДФГДГ и НАДФН-ГДГ), НАД - и НАДН-зависимой глутаматдегидрогеназы (НАДГДГ и НАДН-ГДГ), НАД - и НАДФ-зависимых изоцитратдегидрогеназ (НАДИЦДГ и НАДФИЦДГ, соответственно) и глутатионредуктазы (ГР). Описание выборки производили с помощью подсчета медианы (Ме) и интерквартального размаха в виде 25 и 75 процентилей (С25 и С75). Достоверность различий оценивали по критерию Манна-Уитни. Статистический анализ осуществляли в пакете прикладных программ Statistica 7.0.

Результаты. При исследовании состояния метаболического статуса лимфоцитов крови у больных ХМЛ установлено, что на всех стадиях заболевания снижается активность ферментов Г6ФДГ, ЛДГ, НАДФИЦДГ, НАДИЦДГ, ГР относительно контроля. У больных в развернутой стадии ХМЛ, относительно контроля, дополнительно снижается активность МДГ, НАДН-ЛДГ. У больных в терминальной стадии дополнительно снижается активность фермента Г3ФДГ, относительно контроля. У больных в развернутой стадии ХМЛ снижена интенсивность гликолиза и уменьшен уровень концентрации интермедиаторов для цикла трикарбоновых кислот. При этом можно предположить, что ингибирование ферментативных реакций гликолиза в лимфоцитах крови больных осуществляется на терминальных реакциях. Снижена интенсивность субстратного потока по лимонному циклу. У больных в развернутой стадии имеется недостаточность метаболических реакций митохондриального компартмента. Особенностью метаболизма иммуноцитов крови у больных данной группы является снижение перекисных процессов в клетках крови. У больных в терминальную стадию ХМЛ в лимфоцитах крови снижены пластические процессы, интенсивность переноса продуктов липидного катаболизма на окислительно-восстановительные реакции гликолиза. Гликолиз ингибирован на начальных реакциях. Снижена наработка пирувата в гликолизе, ингибированы ферментативные реакции цикла трикарбоновых кислот. Имеется недостаточность метаболических реакций митохондриального компартмента. У больных данной группы выявляется снижение перекисных процессов в лимфоцитах.

При исследовании состояния метаболического статуса лимфоцитов крови у больных ХЛЛ установлено, что на всех стадиях заболевания снижается активность ферментов ЛДГ, НАДФИЦДГ, МДГ, НАДИЦДГ, НАДН-ЛДГ относительно контроля. У больных в развернутой стадии ХЛЛ дополнительно снижается активность НАДГДГ, а у больных в терминальной стадии – Г3ФДГ, НАДФМДГ, НАДН-МДГ, НАДН-ГДГ, относительно контроля. У больных в развернутую стадию ХЛЛ снижена интенсивность гликолиза и уменьшен уровень концентрации интермедиаторов для цикла трикарбоновых кислот. При этом ингибирование ферментативных реакций гликолиза в лимфоцитах крови больных осуществляется на терминальных реакциях. Снижена интенсивность субстратного потока по лимонному циклу. У больных в развернутой стадии имеются недостаточность митохондриального транспорта и нарушения взаимосвязей между реакциями цикла Кребса и процессами аминокислотного обмена. У больных в терминальной стадии ХЛЛ снижена интенсивность переноса продуктов липидного катаболизма на окислительно-восстановительные реакции гликолиза, ингибированы процессы липидного анаболизма, гликолиз. Снижена наработка пирувата в гликолизе, в митохондриальный компартмент поступает пониженное количество этого субстрата, что, ингибирует ферментативные реакции цикла трикарбоновых кислот. Снижена интенсивность субстратного потока по лимонному циклу. Недостаточность метаболических реакций митохондриального компартмента также определяется снижением активности вспомогательной дегидрогеназной реакции и нарушением взаимосвязей между реакциями цикла Кребса и процессами аминокислотного обмена.

Заключение: проведенное нами исследование показало, что у всех больных ХМЛ и ХЛЛ наблюдается нарушение функциональной активности лимфоцитов в виде уменьшения интенсивности метаболических процессов. Нарушения у больных ХМЛ более выраженные, так как дополнительно присоединяется снижение антиоксидантной защиты клеток. По мере прогрессирования заболевания увеличиваются нарушения, так в развернутой стадии ХМЛ изменения только в углеводном обмене, то в терминальной стадии – в углеводном и жировом обменах. Аналогичные изменения и у больных ХЛЛ.

ОСОБЕННОСТИ ФУНКЦИОНИРОВАНИЯ КЛЕТОК ИММУННОЙ СИСТЕМЫ У БОЛЬНЫХ ОСТРЫМИ ЛЕЙКОЗАМИ

НИИ медицинских проблем Севера СО РАМН,

Красноярский филиал ГНЦ, Красноярск

Целью исследования явилось изучение особенностей клеточного и гуморального звеньев иммунитета у больных ОНЛЛ и у больных ОЛЛ.

Материалы и методы: всего под наблюдением находились 100 больных ОНЛЛ с М2 вариантом и 73 больных ОЛЛ с пре-пре-В вариантом. У 30 больных ОНЛЛ и 25 больных ОЛЛ заболевание было выявлено в стадии первичной атаки, у 49 больных ОНЛЛ и 26 больных ОЛЛ - в стадии полной ремиссии после проведенного лечения, и у 21 больных ОНЛЛ и 22 больных ОЛЛ – в стадии повторного рецидива. В качестве контроля обследовано 106 здоровых лиц аналогичного возраста. Популяционный и субпопуляционный состав лимфоцитов крови оценивали с помощью метода непрямой иммунофлуоресценции с использованием моноклональных антител к CD3, CD4, CD8, CD16, CD19, HLA-DR. Концентрация иммуноглобулинов класса A, M и G в сыворотке определяли иммуноферментным методом. Оценка иммунитета проводилась при поступлении больных до начала лечения. Описание выборки производили с помощью подсчета медианы (Ме) и интерквартального размаха в виде 25 и 75 процентилей (С25 и С75). Достоверность различий между показателями оценивали по критерию Манна-Уитни. Статистический анализ осуществляли в пакете прикладных программ Statistica 7.0 (StatSoft Inc., 2004).

Результаты: при исследовании состояния клеточного иммунитета у лиц контрольной группы и больных ОНЛЛ установлено, что на стадии атаки у больных снижается процентное количество CD3+-, CD4+- клеток. На стадии ремиссии обнаружено снижение абсолютного количества лейкоцитов в крови, снижение абсолютного и относительного уровней лимфоцитов, CD3+-, CD4+-, CD8+-, CD16+-клеток. Кроме того, понижено абсолютное количество CD72+- и HLA-DR+-лимфоцитов. На стадии рецидива ОНЛЛ у больных относительно контроля установлено снижение абсолютного количества лейкоцитов и лимфоцитов в крови, CD8+-, HLA-DR+-лимфоцитов, обнаружено снижение процентного и абсолютного уровней CD3+-, CD4+-, CD16+-клеток. У больных ОНЛЛ на стадии рецидива выявлено снижение абсолютного уровня лейкоцитов и CD8+-клеток, а также относительного и абсолютного уровней CD16+-клеток. При исследовании состояния гуморального иммунитета установлено, что при атаке ОНЛЛ концентрация иммуноглобулинов основных классов и величина уровней относительного синтеза иммуноглобулинов не отличается от контроля. При ремиссии ОНЛЛ обнаружено снижение концентрации Ig G, и повышение величин уровня относительного синтеза Ig M и Ig G. При рецидиве ОНЛЛ выявлено снижение концентрации Ig A, Ig M, Ig G. На этой стадии заболевания обнаружено снижение уровня относительного синтеза Ig G относительно ремиссии.

При исследовании состояния клеточного звена иммунитета у больных ОЛЛ установлено, что на стадии атаки у больных повышается абсолютное содержание лимфоцитов в периферической крови и снижается процентное количество CD3+-клеток. На стадии ремиссии обнаружено снижение относительного и абсолютного уровня лимфоцитов, CD3+-, CD4+- и CD8+-клеток, абсолютного количества CD16+-, CD72+- и HLA-DR+-лимфоцитов. На стадии рецидива ОЛЛ у больных относительно контроля установлено снижение относительного уровня CD3+-клеток и повышение процентного содержания CD16+-лимфоцитов. Относительно больных на стадиях атаки и ремиссии при рецидиве снижается относительное количество CD4+-клеток. Относительно больных на стадии ремиссии при рецидиве ОЛЛ повышается абсолютное и относительное количество лимфоцитов и CD8+-клеток, а также абсолютное содержание CD3+-, CD4+-, CD16+- и HLA-DR+-лимфоцитов. У больных ОЛЛ независимо от стадии заболевания величина индекса активации Т-лимфоцитов повышается относительно контроля, при рецидиве выявляется наибольший уровень данного индекса. При атаке обнаружено снижение величины иммунорегуляторного индекса относительно контроля и больных при рецидиве. Выраженное снижение CD3+- и CD72+-лимфоцитов на стадии ремиссии привело к увеличению величин лейко-Т - и лейко-В-клеточного коэффициентов. Величина лейко-Т-клеточного коэффициента у больных на стадии ремиссии повышена относительно контроля и больных при рецидиве. При исследовании состояния гуморального иммунитета установлено, что при первичной атаке ОЛЛ концентрация иммуноглобулинов основных классов и величина уровней относительного синтеза иммуноглобулинов не отличается от контроля. При ремиссии ОЛЛ обнаружено снижение концентрации Ig A и Ig G. Причем, содержание последнего понижается относительно контроля и относительно величин на стадиях атаки и рецидива. При рецидиве обнаружено выраженное снижение содержания Ig A и Ig M, а также величины уровня относительного синтеза Ig A. На данной стадии заболевания относительно значений при ремиссии, снижается уровень относительного синтеза Ig М.

Заключение: проведенное нами исследование выявило, что у больных ОНЛЛ на стадии рецидива развивается комбинированный иммунодефицит с поражением Т - и В-систем иммунитета. Снижение соотношения CD4+- клеток к цитотоксическим лимфоцитам способствует появлению первичной атаки у больных ОЛЛ. Особенностью рецидива ОЛЛ является увеличение количества NK- клеток. Возникшие Т-иммунодефициты во время ремиссии ОНЛЛ и ОЛЛ имеют одинаковый характер, так как обусловлены идентичной причиной возникновения. Данные иммунодефициты возникли после проведенного курса химиотерапии у больных.

ОСОБЕННОСТИ ИММУННОЛОГИЧЕСКИХ НАРУШЕНИЙ

У БОЛЬНЫХ ХРОНИЧЕСКИМИ ЛЕЙКОЗАМИ

НИИ медицинских проблем Севера СО РАМН,

Красноярский филиал ГНЦ, Красноярск

Целью настоящего исследования явилось изучение особенностей клеточного и гуморального звеньев иммунитета у больных ХМЛ и у больных ХЛЛ в зависимости от стадии заболевания.

Материалы и методы: всего под наблюдением находилось 44 больных ХМЛ и 57 больных ХЛЛ. Средний возраст заболевших составил 55,2±2,4 года у больных ХМЛ и 55,4±1,6 лет у больных ХЛЛ. У 20 больных ХМЛ и 32 больных ХЛЛ заболевание диагностировалось в развернутую стадию, а у 24 ХМЛ и 25ХЛЛ – в терминальную стадию. В качестве контроля обследовано 106 здоровых лиц аналогичного возраста. Популяционный и субпопуляционный состав лимфоцитов крови оценивали с помощью метода непрямой иммунофлуоресценции с использованием моноклональных антител к CD3, CD4, CD8, CD16, CD19, HLA-DR. Дополнительно вычислялись иммунорегуляторный индекс, лейко-Т-клеточный, лейко-В-клеточный индекс и индекс активации Т-лимфоцитов. Концентрация иммуноглобулинов класса A, M и G в сыворотке определяли иммуноферментным методом. Оценка клеточного и гуморального иммунитета проводилась при поступлении больных до начала патогенетического лечения. Описание выборки производили с помощью подсчета медианы (Ме) и интерквартального размаха в виде 25 и 75 процентилей (С25 и С75). Достоверность различий между показателями независимых выборок оценивали по критерию Манна-Уитни. Статистический анализ осуществляли в пакете прикладных программ Statistica 7.0 (StatSoft Inc., 2004).

Результаты: при исследовании состояния клеточного звена иммунитета у больных ХМЛ установлено, что в терминальной стадии снижаются абсолютные содержания лейкоцитов и лимфоцитов в крови, относительно контроля, а последний параметр и относительно больных в развернутой стадии. Независимо от стадии заболевания, у больных ХМЛ снижаются относительные уровни CD3+-, CD4+-клеток, повышается процентный уровень CD72+-лимфоцитов, относительно контроля. У больных в терминальной стадии ХМЛ снижаются абсолютные концентрации CD3+-, CD4+-, CD8+-, CD16+-, CD72+-лимфоцитов и лимфоцитов, экспрессирующих HLA-DR+- антиген, относительно контроля, при этом показатели абсолютного содержания CD8+-, CD72+-, HLA-DR+-лимфоцитов достоверно ниже, чем у больных в развернутой стадии. У больных в развернутой стадии абсолютные показатели CD72+- и HLA-DR+-лимфоцитов достоверно выше, чем у больных в терминальной стадии и контрольной группы. У больных ХМЛ независимо от стадии заболевания снижен лейко-В-клеточный коэффициент, относительно контроля. У больных в развернутой стадии ХМЛ снижен иммунорегуляторный индекс, по сравнению с контролем. При исследовании состояния гуморального иммунитета установлено, что у больных в развернутой стадии ХМЛ, относительно контроля, снижены коэффициенты относительного синтеза Ig A и Ig M, при чем последний показатель достоверно ниже, чем у больных в терминальной стадии. У больных в терминальной стадии снижены концентрации Ig A и Ig M в крови, относительно контроля.