1.5. Апробация работы. Основные результаты исследований были представлены и одобрены на Международных и Всероссийских научно-практических конференциях: «Актуальные проблемы болезней молодняка в современных условиях» (Воронеж, 2002); «Геохимическая экология и биогеохимическое изучение таксонов биосферы» (Москва, 2003); «Актуальные проблемы геохимической экологии» (Семипалатинск, 2005); «Современная ветеринарная защита высокопродуктивных коров» (Воронеж, 2005); «Повышение эффективности лечения и профилактики акушерско-гинекологических заболеваний и биотехники размножения животных» (Киров, 2005); «Сельскохозяйственная наука Республики Мордовия: достижения, направления развития» (Саранск, 2005); «Актуальные проблемы ветеринарной медицины» (Курск, 2005, 2008); «Актуальные проблемы ветеринарной патологии и морфологии животных» (Воронеж, 2006); «Актуальные проблемы ветеринарии в современных условиях» (Краснодар, 2006, 2011); «Актуальные проблемы диагностики, терапии и профилактики болезней животных» (Воронеж, 2006); «Тяжелые металлы и радионуклеотиды в окружающей среде» (Семипалатинск, 2006); «Биогеохимия элементов в субстратной и пищевой цепях агро-аквальных систем» (Тюмень, 2007); «Современные проблемы геоэкологии и сохранения биоразнообразия» (Бишкек, 2007); I и III съездах ветеринарных фармакологов и токсикологов России (Воронеж, 2007; С.-Петербург, 2011); «Актуальные проблемы ветеринарного акушерства, гинекологии и биотехники размножения животных» (Ставрополь, 2007); «Актуальные вопросы ветеринарной медицины» (Екатеринбург, 2007), «Актуальные вопросы интенсивного развития животноводства» (Горки Могилевской обл., Республика Беларусь, 2007); «Трансферт инновационных технологий в животноводстве» (Орел, 2008); «Проблемы, задачи и пути научного обеспечения приоритетного национального проекта «Развитие АПК» (Новочеркасск, 2008); «Новые аспекты биотехнологии репродукции животных» (С.-Петербург, 2008); «Актуальные проблемы повышения эффективности агропромышленного комплекса» (Курск, 2008); «Современные проблемы диагностики, лечения и профилактики болезней животных и птиц» (Екатеринбург, 2008, 2010); «Биогеохимия в народном хозяйстве: фундаментальные основы ноосферных технологий» (Астрахань, 2008); «Современные проблемы ветеринарного обеспечения репродуктивного здоровья животных» (Воронеж, 2009); «Актуальные проблемы болезней обмена веществ у сельскохозяйственных животных» (Воронеж, 2010); «Развитие идей континентальной биогеохимии и геохимической экологии» (Москва, 2010); «Акушерство, гинекология и биотехника размножения в условиях интенсификации животноводства» (Витебск, Республика Беларусь, 2011); «Практическое использование современных научных разработок в воспроизводстве и селекции крупного рогатого скота» (Дубровицы-Быково Московской области, 2011); «Экологические проблемы использования природных и биологических ресурсов в сельском хозяйстве» (Екатеринбург, 2012); «Современные проблемы ветеринарного акушерства и биотехнологии воспроизведения животных» (Воронеж, 2012).
1.6. Публикации. Основные научные результаты, включенные в диссертацию, опубликованы в 64 печатных работах, в т. ч. в 20 ведущих научных журналах, рекомендованных Минобразования России, 2 патентах и 2 методических рекомендациях и пособиях.
1.7. Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 243 страницах в компьютерном исполнении и состоит из введения, обзора литературы, материала и методов исследования, результатов собственных исследований, включающих девять разделов, заключения, выводов и практических предложений по результатам исследований, списка использованной литературы, включающего 471 источник, в том числе 172 зарубежных авторов. Диссертация содержит 48 таблиц и 16 рисунков.
1.8. Основные положения диссертации, выносимые на защиту.
1. Особенности функционирования гормонально-метаболического и антиоксидантного гомеостаза коров во время формирования беременности и в послеродовой период при физиологическом и патологическом их течении.
2. Роль эндокринной, антиоксидантной и NO·– L-аргинин систем в механизмах развития хронических патологий органов воспроизводства.
3. Особенности свободнорадикального окисления и состояния системы антиоксидантной защиты у животных при разном уровне обеспеченности их организма селеном и переходе репродуктивного гомеостаза на циклический режим функционирования.
4. Влияние неорганических и органических соединений селена на гормонально-метаболический и антиоксидантный статус и эффективность их применения для коррекции воспроизводительной функции коров.
2. Материалы и методы исследований
Научные исследования выполнены в 2002-2012гг в отделах патобиохимии и патофизиологии, патологии воспроизводства и молочной железы, лаборатории физико-химических методов исследований ГНУ Всероссийский научно-исследовательский ветеринарный институт патологии, фармакологии и терапии РАСХН в соответствии с планом научно-исследовательских работ по заданиям: 04.01.01 «Изучить роль дисбаланса активных форм кислорода и биологически активных веществ в нарушении обмена веществ, снижении резистентности и возникновении заболеваний продуктивных животных» (№ госрегистрации 01.200.117018); 08.04.02 «Разработать новые экспресстесты и терапевтические препараты для эффективной системы мероприятий по диагностике, профилактике и терапии болезней органов размножения и молочной железы у коров и свиней, обеспечивающих снижение бесплодия маточного поголовья, получение жизнеспособного приплода и производство продукции высокого санитарного качества» (№ госрегистрации 15070.3666 026906.06.8.002.3); 08.04.04 «Разработать новые средства профилактики и терапии массовых нарушений обмена веществ и других незаразных заболеваний сельскохозяйственных животных» (№ госрегистрации 15070.3666 026906.06.8.004.5).
Объектом исследований служили коровы и телки красно-пестрой и черно-пестрой пород со среднегодовой молочной продуктивностью 4,5-6,7 тыс. кг, принадлежащие племзаводу «Дружба», , Воронежской области, находящиеся в агробиоценозах с достаточным содержанием селена, а так же учхозу «Чистые пруды» Кировской области в зоне биогеохимического дефицита селена.
Исследования по оценке адаптивных изменений в гормонально-метаболическом и антиоксидантном гомеостазе коров во время формирования беременности и в послеродовой период при физиологическом и патологическом их течении выполнены на 116 коровах, при бесплодии – на 45 животных и в период становления половой и физиологической зрелости (при переходе гомеостаза животных на циклический режим функционирования) – на 39 телках.
Влияние селенсодержащих препаратов на оксидно-антиоксидантный, гормонально-метаболический статус и воспроизводительную функцию изучено на 598 коровах.
Кормление животных осуществлялось по общепринятым в хозяйствах рационам для сухостойных и дойных коров. Обеспеченность их по общей питательности составляла 93-100%, переваримому протеину – 93,5-98,8%, сахару – 84,6-97,8%, кальцию – 72,4-99%, фосфору – 67-71,6%, каротину – 86,2-92,1% при сахаро-протеиновом отношении 0,8-1,0:1 и кальциево-фосфорном отношении 1,8-2:1.
Клиническое состояние животных оценивали общепринятыми методами, состояние половых органов – методом трансректальной пальпации, а функциональное состояние гормонально-метаболического и антиоксидантного статуса – путем лабораторного анализа образцов венозной крови.
Оценка гормонального статуса осуществлялась путем определения в плазме крови половых (прогестерон, тестостерон, эстрадиол-17β), кортикостероидных (кортизол) и тиреоидных (трийодтиронин) гормонов с использованием тест-систем ИФА фирмы «Хема-Медика» (стероидные гормоны), . А.В.», Москва (трийодтиронин) и спектроанализатора «Униплан». Определение показателей белкового, углеводного, липидного, минерального, витаминного обменов выполнено путем определения содержания в сыворотке, плазме и цельной крови общего белка рефрактометрическим методом (Ю. Б. Филлипович, 1973), его фракций – электрофорезом в агарозном геле (В. Н. Титов, В. А. Амелюшкина, 1994), глюкозы, общего холестерина, креатинина, мочевины, общего кальция, неорганического фосфора, активности АсАТ, АлАТ, γ-ГТ, ЩФ – на биохимическом анализаторе «Hitachi-902» (Япония), цинка, меди, марганца, железа, магния – на атомно-адсорбционном спектрометре «Perkin Elmer-703» (США), селена – спектрофлуориметрическим методом (Н. А. Голубкина, 1995), йода связанного с белком – по Акланду в модификации С. В. Силаевой, общих липидов и триглицеридов – с помощью наборов фирм «Vital Diagnostic» (Россия) и «Lachema» (Чехия), молочной кислоты – с параоксидифенилом ( В., Н., П. и др., 1987), каротина – по методу Карр-Прайса в модификации Юдкина, витамина А – спектрофотометрическим методом (И. П. Кондрахин, Н. В. Курилов, А. Г. Малахов, 1985), витамина Е – по методу Ш., И.(1972), витамина С – титрационным методом с 2,6-дихлорфенолиндофенолом ( В., И., Г. и др., 1980), морфологических показателей крови – на гемоанализаторе «АВХ Micros 60» (Франция).
Для оценки интенсивности течения процессов перекисного окисления липидов, состояния системы антиоксидантной защиты и функционирования L-аргинин – NO· в крови животных определяли содержание малонового диальдегида (И. Д. Стальная, Т. Г. Гаришвили, 1977), активность глутатионпероксидазы и глутатионредуктазы (Г. О. Кругликова, И. М. Штутман, 1976), супероксиддисмутазы (Т. В. Сирота, 1999), каталазы (М. А. Коралюк и др., 1988), сумму стабильных метаболитов оксида азота (Г. Н. Близнецова и др., 2002), содержание S-нитрозотиолов (Р. Kubes et al. 1999).
Обработку экспериментальных данных проводили методами математической статистики, принятыми в биологии и медицине, с использованием компьютерных прикладных статистических программ «Statistica 5.0» (Stat Soft Inc., 1998) и «Microsoft Excel».
Расчет экономической эффективности назначения селенсодержащих препаратов для коррекции воспроизводительной способности коров проведен в соответствии с «Методикой определения экономической эффективности ветеринарных мероприятий» (М., 1982).
В проведении исследований принимали участие также сотрудники и аспиранты ГНУ ВНИВИ патологии, фармакологии и терапии (А. Г. Нежданов, Г. Н. Близнецова, В. И. Шушлебин, Н. Е. Папин, В. И. Беляев, Т. П. Брехов), Института геохимии и аналитической химии им. В. И. Вернадского (В. В. Ермаков) и Вятской госсельхозакадемии (И. Г. Конопельцев), которым автор выражает искреннюю признательность за сотрудничество и оказанную помощь.
|
Из за большого объема этот материал размещен на нескольких страницах:
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 |
Основные порталы (построено редакторами)
