МЕТОДИКА ПРИГОТОВЛЕНИЕ ГЕЛЯ И АГАРОВЫХ ПЛАСТИНОК
Агаровый гель 5% концентрации готовят в предварительно тарированном стеклянном сосуде с плотно закрывающейся крышкой. Изрезанный агар (ГОСТ 6470-58) заливается дистиллированной водой и оставляется на 30 минут для набухания. Набухший агар нагревается до кипения, доводится до необходимой массы и к теплому гелю добавляется 5 % реактив Эрлиха следующего состава:
п-диметиламинобензальдегида 0,5 г
кислоты хлористоводородной концентрированной
этанола 95% по 15 мл
н-бутанола 90 мл.
Приготовленный таким образом агаровый гель разливается в чашки Петри с горизонтальной поверхностью дна (диаметр 98-100 мм, высота 20 мм), которые расставляются на столе, предварительно выверенном по горизонтальному уровню с помощью ватерпаса. Агар разливается в чашки двумя порциями по 10 и 15 мл. После застывания агара первой порции на ее поверхность каждую чашку помещают 3 металлических цилиндра (или стеклянных с наружным диаметром 8 мм и высотой до 10 мм) и заливают второй слой агара. После застывания агара цилиндрики осторожно вынимают. Образовавшиеся углубления предназначены для помещения в них во время опыта по 1 капле реактива Эрлиха и образцов мазей.
ЗАДАНИЕ 3. Определить влияние степени измельчения лекарственного вещества на скорость высвобождения его из мази методом прямой диффузии в агаровые пластинки в опытах «in vitro».
Для выполнения задания студенты должны:
- поместить образцы (примерно по 1 г) приготовленных мазей в лунки агаровых пластинок,
- закрыть чашки Петри крышками и поставить их в термостат, нагретый до постоянной температуры 37+0,5о С (в лунки предварительно вносят пипеткой по 1 капле реактива Эрлиха);
- измерять диаметр окрашенной зоны, показывающий степень высвобождения (прямой диффузии) препарата из образца мази через 30, 60, 90, 120 и 150 минут от начала опыта;
- по полученным результатам (диаметру окрашенных зон) построить графики зависимости и сформулировать выводы о влиянии степени дисперсности сульфаниламида на скорость его высвобождения из мазей.
ЗАДАНИЕ 4. Определить влияние степени дисперсности препарата на скорость высвобождения его из мази методом диализа через полупроницаемую мембрану по Крувчинскому в опытах «in vitro». Определить содержание препарата в диализате через 30, 60, 90, 120 и 150 минут от начала опыта, продиффундировавшего из мазей через полупроницаемую мембрану (целлофан) одним из предложенных методов:
а) нитритометрическим титрованием; б) фотоколориметрически.
Для количественного определения продиффундировавшего в диализат препарата фотоколориметрическим методом необходимо предварительно построить калибровочный график по методике, аналогичной для построения калибровочного графика при спектрофотометрии.
Полученные в эксперименте результаты внести в таблицу (форма таблицы представлена ниже) и построить графики зависимости скорости высвобождения препарата из мази от степени дисперсности и сделать выводы.
ДИАЛИЗ СТРЕПТОЦИДА С РАЗЛИЧНОЙ СТЕПЕНЬЮ
ДИСПЕРСНОСТИ ИЗ МАЗЕЙ
Таблица 1
Мазь | Количество продифундировавшего вещества | ||||
30 минут | 60 минут | 90 минут | 120 минут | 150 минут | |
Мазь №1 | |||||
Мазь №2 |
Методы обучения и преподавания: работа в малых группах.
Литература
Основная:
1. , , Кыдыралиев и элементы фармакокинетики. Учебное пособие.– Шымкент.– 2008.– 68 с.
2. Технология лекарственных форм. - (Под ред. ) – 1991. - Том 2.
3. Технология лекарств. - – 1980. - Том 1-2.
4. Ажгихин к практическим занятиям по технологии лекарств – 1977. - Стр. 327.
5. , – Биофармация. - 1978.
Дополнительная:
1. Маркевич к лабораторным занятиям по Биофармации.– Шымкент.– 2009 г. 50 с.
2. ГФ РК, ГФ ХI.
3. Лекционный материал.
4. Методические рекомендации для студентов.
Контроль:
Ситуационные задачи:
1. Как может влиять степень измельчения лекарственных веществ на их терапевтическую эффективность:
а) для сульфадимезина при обычном его измельчении и его микронизации?
б) для ацетилсалициловой кислоты при обычном измельчении и его микронизации в 30 раз?
в) для лекарственных веществ фуранового ряда (фурадонин) при обычном измельчении и при их микронизации?
г) для кальциферола при измельчении его частиц до 10 мкм (микронизации) и обычном измельчении ( до 100 мкм )?
д) для антибиотиков (эритромиции) при обычном измельчении и при их микронизации?
Контрольные вопросы:
1. Дайте определение биофармации как науки. Какова основная задача биофармации?
2. Что такое терапевтическая неадекватность? Каковы причины, вызывающие ее?
3. Какое физико-химическое свойство определяет высвобождение препарата из лекарственной формы и его всасывание в организме?
4. Какие факторы входят в понятие «физическое состояние лекарственных и вспомогательных веществ»?
5. Что такое полиморфизм? Какие факторы влияют на возникновение различных полиморфных модификаций веществ? Как влияет полиморфизм на скорость высвобождения и всасывания препарата? Приведите примеры. Как можно управлять этим фактором?
6. Как влияет степень дисперсности препаратов на терапевтическую эффективность лекарств и их побочное действие? Приведите примеры. Как можно управлять этим фактором?
7. Какие методы в опытах «in vivo», «in vitro» применяют для биофармацевтической оценки скорости всасывания лекарственных веществ в организм в зависимости от различных фармацевтических факторов?
8. Какие основные фармакокинетические параметры определяются в опытах «in vivo», «in vitro»? Как они отражаются?
Занятие №13
Кредит 8
Тема 2: Влияние химической модификации на скорость высвобождения и всасывания лекарственных веществ в опытах «in vitro», «in vivo».
.
Цель: Научиться правильно проводить методики опытов «in vitro» «in vivo» для определения влияния химической модификации на скорость и высвобождения лекарственных веществ из лекарственной формы.
Задачи обучения
студент должен знать:
- основные группы фармацевтических факторов;
- методы определения скорости и полноты высвобождения лекарственных веществ из лекарственных форм в опытах «in vitro» применяемые методики, используемые приборы;
- методы определения скорости всасывания лекарственных веществ в организм в опытах «in vivo», применяемые методики, используемые приборы;
- метод определения БД в опытах «in vivo» с использованием однократной дозы препарата;
- метод определения БД в опытах «in vivo» с использованием однократной дозы с применением повторных доз препарата.
студент должен уметь:
- оценить качество приготовленной лекарственной формы;
- проводить биофармацевтические исследования по определению скорости всасывания лекарственного вещества в опытах «in vivo» с использованием однократной дозы препарата;
- правильно вводить исследуемые лекарственные формы лабораторным животным и правильно отбирать пробы биологических жидкостей (крови, мочи) для анализа;
- определять количественное содержание лекарственных веществ в биологических жидкостях методами спектрофотометрии, фотоколориметрии, нитритометрии;
- делать правильные выводы о влиянии заданных фармацевтических факторов на скорость и полноту всасывания лекарственных веществ из лекарственной формы.
Основные вопросы темы:
по базисным знаниям:
1. Латинская терминология по теме занятия.
2. Машины и аппараты, применяемые в производстве готовых лекарственных форм и экстракционных препаратов, их классификация, устройство и принцип работы.
3. Методы и методики оценки качества лекарств и стандартизации сырья, полуфабрикатов и готового продукта. Применяемые приборы. Принцип их действия.
по теме занятия:
1. Химическая модификация как один из фармацевтических факторов, влияющих на терапевтическую эффективность лекарства. Возможности управления этим фактором.
2. Методика проведения прямой диффузии в агаровые пластины в опытах «in vitro».
3. Методика диализа по Крувчинскому для биофармацевтических опытов «in vitro» для мягких лекарственных форм.
4. Методы определения скорости и полноты высвобождения лекарственных веществ из лекарственных форм в опытах «in vitro» применяемые методики, используемые приборы;
5. Методы определения скорости всасывания лекарственных веществ в организм в опытах «in vivo», применяемые методики, используемые приборы;
6. Метод определения БД в опытах «in vivo» с использованием однократной дозы препарата;
7. Метод определения БД в опытах «in vivo» с использованием однократной дозы с применением повторных доз препарата.
ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА СТУДЕНТОВ
Студенты должны выполнить следующие задания:
ЗАДАНИЕ 1. Для выполнения работы в опытах «in vivo» по определению влияния простой химической модификации на скорость и полноту высвобождения лекарственного вещества из лекарственной формы, приготовить следующие лекарственные формы:
1. Водная суспензия фуросемида 1% №1 – в кислотной форме.
Технология: суспензия фуросемида 1 % в кислотной форме готовится из порошка измельченных таблеток. В качестве растворителя используется вода очищенная.
2. Водный раствор фуросемида 1% №2 – в виде натриевой соли.
Технология: кислотную форму фуросемида переводят в натриевую соль в виде 1%-ного раствора. Для этого 0,05 г порошка измельченных таблеток растворяют в 2 мл 0,06 М раствора едкого натра.
|
Из за большого объема этот материал размещен на нескольких страницах:
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 |
