Морфофункциональное обоснование применения пробиотиков при субклиническом мастите у коров (стр. 6 )

2.7 Клинико-морфологическая характеристика сочетанной патологии молочной железы и эндометрия у коров

Сочетанное течение мастита и эндометрита у коров рассматривалось рядом исследователей [, 1988; , 1994;, , 1998; , 2008; , 2011]. Однако клинико-морфологические изменения освещены недостаточно при данной патологии у коров.

Развитие субклинического мастита у коров в послеродовой период характеризовалось тем, что клиническое состояние было в пределах физиологической нормы, наблюдалось снижение молочной продуктивности. При этом молочная железа внешне не была изменена, но местами имела на ощупь незначительно плотноватую консистенцию, а с поверхности разреза ее незначительно стекала серозная жидкость с желтоватым оттенком. В структурной организации молочной железы альвеолы были полиморфными, различной величины и содержали серозную жидкость с обилием жировых и молочных включений. Здесь же наблюдались единичные округлые шары с розоватой и гомогенной паренхимой, заполняющие 2/3 альвеол (Рисунок 9).

При наслаивании к субклиническому маститу острого послеродового эндометрита на 10-12 дни после отела у коров клиническое состояние незначительно ухудшалось, хотя температура тела их находилась в пределах нормы (37,7-38,90С). Эндометрит характеризовался катаральным выделением из матки при дефекации, мочеиспускании и, как правило, после ночного отдыха коров. При этом у тех же коров, у которых происходили острые воспалительные процессы в матке в виде катарально-гнойного эндометрита, воспалительные процессы в структуре молочной железы обнаруживались вплоть до катарального – катарально-гнойного мастита (Рисунок 9).

а)	б)	в)	г)

Рис. 9. Структурные изменения в молочной железе и матке у коровы при сочетанной патологии: а) огромные округлые гомогенные образования в просвете альвеол; б) выраженные воспалительные процессы на слизистой оболочки матки; в) серозно-катаральное воспаление молочной железы; г) развитие катарально-гнойного воспаления в молочной железе.

В ультраструктуре клеток молочной железы наблюдались альвеолоциты с цилиндрической цитоплазмой, богатой эндоплазматической сетью, органоидами и светлыми секреторными гранулами. Рядом же с ними наблюдались эпителии, лишенные апикальной части и с неровной поверхностью. В просвете некоторых альвеол молочной железы с катаральным воспалением обнаруживались эпителиальные и соматические клетки с ультраструктурой в пределах нормы (Рисунок 10).

а)	б)	в)

Рис. 10. Ультраструктурные изменения клеток молочной железы при субклиническом мастите: а) вакуолизация лактоцита, гипохромность ядра, дистрофия секреторных гранул; б) ядра лактоцитов гиперхромные; в) обилие цитоплазматических органоидов лактоцитов в просвете альвеолы молочной железы.

Субклеточная организация секреторных клеток молочной железы была различной. Ядра лактоцитов в одних случаях были гиперхромными, а других – гипохромными. Клетки были полиморфны. Встречались альвеолоциты с цилиндрической цитоплазмой, богатой эндоплазматической сетью, органоидами и светлыми секреторными гранулами. Рядом же с ними наблюдались эпителии, лишенные апикальной части и с неровной поверхностью.

2.8 Субклеточная организация молочной железы

при применении пробиотика на основе Bacillus amyloliquefaciens

при субклиническом мастите у коров

В поисковых опытах на 30 сухостойных коровах, больных субклиническим маститом выяснялась возможность применения пробиотиков через сосковый канал однократно в 3-х дозах (0,1; 0,3 и 0,5 г.). Учет результатов лечения проводился путем постановки реакции секрета с 5 ,0% мастидиновым тестом на 7-е сутки после введения препарата (Таблица 8).

Таблица 8 - Эффективность пробиотика при субклиническом мастите у коров в период сухостоя

Группы коров (гол)	Доза препарата (гр.)	Подвергнуто лечению	Излечено
коров	долей	коров	долей
Кол-во	%	Кол-во	%
Первая (10)	0,1	10	9	5	50,0	6	66,6
Вторая (10)	0,3	10	12	7	70,0	9	75,0
Третья (10)	0,5	10	10	7	70,0	7	70,0

Наибольший терапевтический эффект был получен после однократного интрацистернального введения пробиотика на основе Bacillus amyloliquefaciens в дозе 0,3 г. Уменьшение дозы вводимого препарата до 0,1 г привело к снижению на 20,0% количества выздоровевших животных и на 8,40 % - количества излеченных долей. Увеличение дозы пробиотика на основе Bacillus amyloliquefaciens до 0,5 г не привело к увеличению числа излеченных животных и пораженных долей.

В структурной организации молочной железы у коров при дозе 0,3 г пробиотика на основе Bacillus amyloliquefaciens ВКГМ В-10642 (DSM 24614) наблюдались мелкие воспалительно-клеточные инфильтраты из лимфоцитов, гистиоцитов, макрофагов, немногочисленных полинуклеаров – сегментоядерных лейкоцитов (Рисунок 11).

а)	б)

Рис. 11. Структурная организация молочной железы у коровы при дозе 0,3 г пробиотика: а) обилие воспалительно-клеточных инфильтратов в строме; б) клеточные инфильтраты в паренхиме железы.

В ультраструктурной организации молочной железы у сухостойных коров, леченных пробиотиком на основе Bacillus amyloliquefaciens, наблюдались особенности строения мелких воспалительно-клеточных инфильтратов, состоящих из лимфоидно-макрофагальных клеток (Рисунок 12).

а)	б)	в)	г)	д)

Рис. 12. Субклеточная организация клеток молочной железы у коровы при дозе 0,3 г пробиотика: а) контакт лимфоцита с эпителием альвеолы; б) дифференцирующаяся плазматическая клетка в стенке альвеолы; в) расширение микроциркуляторного русла; г) моноцитарная клетка в микроциркуляторном русле; д) полиморфность ядер лактацитов.

Затем на двух группах коров, больных субклиническим маститом, изучение действия препаратов на ткани здоровой и пораженной железы в дозе 0,3 г показало содержание соматических клеток в секрете до введения и через 24, 48, 72, 96 и 240 часов после введения пробиотика (Таблица 9).

Таблица 9 - Динамика клеток в молоке после интрацистернального введения пробиотика на основе Bacillus amyloliquefaciens

Состояние доли вымени	Кол-во долей	Содержание соматических клеток  (тыс/мл), M±m
До введения препарата	После введения препарата спустя, час
24	48	72	96	240
Здоровая (1 опытная)	6	664,0±22,3	604,5± 37,2	599,0± 19,8	580,0± 27,4	556,0± 38,1	525,0± 36,6
Пораженная субклиническим маститом (2 опытная)	6	1446,7±42,6	1023,0± 39,4	884,0± 22,5	647,0± 41,3	545,0± 22,3	496,0± 27,5
Здоровая (контроль)	6	684,0±18,9	524,0± 23,2	548,0± 34,5	488,0± 28,7	504,0± 26,8	525,0± 22,3

Установлено, что интрацистернальное введение испытуемого препарата ни в одном случае не вызвало местной воспалительной реакции и изменения органолептических свойств секрета, увеличения числа соматических клеток. На протяжении опыта количество соматических клеток в секрете опытных (1) и контрольных (здоровых) долей вымени оставалось в пределах физиологической нормы. Интрацистернальное введение препарата в доли вымени, пораженные субклиническим маститом (2 опытная), привело к снижению количества соматических клеток в секрете в первые трое суток в 3,5 раза. В последующие дни содержание соматических клеток в секрете стабилизировалось и не отличалось от такового показателя здоровых долей вымени (таблица 9).