Морфофункциональное обоснование применения пробиотиков при субклиническом мастите у коров (стр. 8 )

В трёх опытных группах наблюдалось снижение содержания условно-патогенной микрофлоры - стафилококков и стрептококков, способных на фоне других отрицательных факторов спровоцировать заболевания пищеварительного тракта молодняка крупного рогатого скота.

Таким образом, молоко, полученное из долей, подвергавшихся лечению пробиотиком на основе Bacillus amyloliquefaciens ВКГМ В-10642 (DSM 24614), практически не изменяло микробную экосистему в желудочно-кишечном тракте у телят. Наоборот, было отмечено изменение микробиологического состава в сторону полезной микрофлоры. Это объяснялось увеличением содержания молочнокислой микрофлоры, кишечной палочки, ингибированием роста и размножения условно-патогенной микрофлоры.

2.10 Производственная апробация способов терапии при субклиническом мастите у коров

Апробация способа лечения субклинического мастита у сухостойных коров с применением пробиотика на основе Bacillus amyloliquefaciens ВКГМ В-10642 (DSM 24614)  проведена на 527 коровах, переводимых в сухостойный период.

Коровы опытной группы лечились путем однократной инстилляции в пораженные доли вымени пробиотика на основе Bacillus amyloliquefaciens  в дозе 0,3 г, растворенного в стерильном, теплом, изотоническом растворе натрия хлорида. Животные контрольной группы с субклиническим маститом лечились с использованием мастисан-А согласно наставлению.

Состояние леченых долей коров опытной и контрольной групп контролировалось клинически через 10–15 дней от начала сухостоя и за 10-15 дней до предполагаемого отёла, без сдаивания секрета вымени. Результаты лечения учитывались по реакции молока из долей, подвергшихся лечению, с 2,0%-ным водным раствором мастидина в первый день после отела (Таблица 13).

Таблица 13 - Терапевтическая эффективность препаратов при субклиническом мастите у сухостойных коров

Группы	Находилось на лечении	Излечено
голов	долей	Голов	долей
всего	%	всего	%
Опытная – пробиотик на основе Bacillus amyloliquefaciens	200	300	150	75,0	220	73,30
Контроль – мастисан-А	100	140	60	60,0	80	57,10

Терапевтическая эффективность пробиотика на основе Bacillus amyloliquefaciens оказалась выше, чем мастисан-А. После однократного интрацистернального применения пробиотика было излечено на 15,0% больше коров и на 16,20% больше пораженных долей молочной железы, чем после применения мастисана-А.

Изучение терапевтической эффективности способов лечения сочетанной патологии молочной железы и матки у коров показало, что схема лечения пробиотиками оказалась наиболее эффективной (Таблица 14).

Таблица 14 - Лечебная эффективность способ лечения сочетанной патологии у коров

Группы животных, лечебное средство	Количество животных	Выздоровело животных
гол	%
1 группа (мастинол)	150	100	66,70
2 группа (пробиотик)	150	120	80,0

Применение на коровах второй опытной группы пробиотика позволило увеличить количество выздоровевших животных на 13,30%, при этом снизить медикаментозную нагрузку на организм животных и использовать молоко для выпойки молодняку без ограничений.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

1. Молочная железа у клинически здоровых коров в период лактации характеризовалась развитой железистой тканью с неоднородной структурой и находилась на повышенном уровне функциональной активности. Паренхима ее состояла из различных по величине и форме альвеол с диаметром 144,5 ± 27,2 мкм, заполнялась на 50,0-70,0% молочным секретом, выстилалась плоскими эпителиями высотой 6,2 ± 0,3 мкм, а шириной - 8,2 ± 0,3 мкм. Стенка альвеол преимущественно была выстлана плоскими и кубическими клетками, реже – цилиндрическими. Размеры и формы секреторных клеток находились в прямой зависимости от активности и стадии секреторного цикла. В ультраструктурной организации клетки имели хорошо выраженные контакты – десмосомы. В них превалировали секреторные гранулы и гранулярная эндоплазматическая сеть, а на апикальной поверхности – множественные короткие ворсинки. Ядра примыкали к базальной мембране клеток, продолговатые и содержали умеренное количество гетерохроматина на периферии кариолеммы. 

2. Содержание соматических клеток в молоке у клинически здоровых коров в период лактации находилось в пределах 182 - 277 тыс. Соматические клетки в 58,0 % случаях состояли из малых эпителиальных клеток, а в 38,70% –лимфоцитов.

3. Субклинический мастит у коров в период лактации выявлялся от 37,60 до 42,0 % (преимущественно с сентября по февраль месяц года), тогда как в период сухостоя – в 25,40 % случаях. В послеродовой период заболеваемость коров субклиническим маститом в среднем составила 24,40%. Период лактации не оказывал существенное влияние на заболеваемость коров субклиническим маститом. Чаще выявлялось поражение одной, двух и значительно реже – трех-четырех, а также задних долей вымени.

4. Внешне молочная железа при субклиническом мастите находилась в пределах нормы, но с поверхности разреза ее стекала серозная жидкость с желтоватым оттенком. Микроскопически наблюдалось обилие серозно-катарального выпота в альвеолы, расширение микроциркуляторного русла паренхимы и десквамация секреторных клеток альвеол. Происходило нарушение целостности альвеолярной выстилки, альвеолы местами в значительной степени заполнялись серозно-клеточным экссудатом. В воспалительно-клеточном инфильтрате появлялись немногочисленные полинуклеарные (сегментоядерные), а также – лимфоидные, макрофагальные, плазматические и другие клетки. В ультраструктурной организации клеток превалировала гиперхромность ядер, вакуолизация цитоплазмы и ее органоидов, разрушение апикальной мембраны с лизисом ее ворсинок. Местами ядра лимфоидных клеток фрагментировались, появлялись апоптоидные тела.

5. Количество соматических клеток при субклиническом мастите у коров варьировало в пределах 880 - 1656 тыс. в 1,0 мл секрета. В нем превалировали малые, средние эпителиальные клетки и нейтрофилы в 42,0, 13,0 и 23,0% соответственно. Повышалось содержание средних эпителиальных клеток и нейтрофилов с 23,0 до 36,0 %, а количество малых эпителиальных клеток увеличилось почти в 2 раза. При воспалении железы увеличение содержания нейтрофилов, малых и средних эпителиальных клеток сопровождалось снижением количества лимфоидных клеток – защитных факторов органа.

6. Выявлена положительная корреляция между патологией молочной железы и гипертрофией ее регионарных лимфатических узлов. Размеры их при субклиническом мастите составили 6,72±0,72 Ч 2,71±0,42 см (против 4,45±0,48 Ч 1,38±0,57 см в норме). Гиперпластические изменения в лимфатических узлах вымени наиболее часто наблюдались при одновременном течении субклинического мастита с послеродовым эндометритом у коров.

7. При катарально-гнойном мастите незначительно увеличивался объем пораженной четверти молочной железы, с поверхности разреза которой обильно стекала желтоватая сыворотка и слизисто-серозная жидкость. Клинически выраженное воспаление  вымени сопровождалось уменьшением диаметра альвеол до 36,1 ± 1,2 мкм, а высоты эпителия - 5,1 ± 0,1 мкм. Альвеолы заполнялись катарально-гнойным экссудатом, а строма железы инфильтрировалась лимфоидными клетками. Лактоциты альвеол отторгались и подвергались к некробиозу.

8. Сочетанное течение у коров клинического мастита и послеродового эндометрита в незначительной степени проявлялось на гематологических, биохимических и иммунологических показателях крови в виде отклонения как в углеводно-белковом обмене, так и в снижении резистентности организма. При этом повышалось в крови содержание лейкоцитов на 27,60% и мочевины - на 21,40%, а в сыворотке крови – активность гамма-ГТ – на 41,30% и АлАТ – на 24,70%.

9. Клиническое состояние у коров при одновременном течении субклинического мастита и эндометрита находилось в пределах нормы. Молочная железа внешне не была изменена, но местами имела на ощупь плотноватую консистенцию. Из сосковых каналов выделений не было отмечено, а из половых органов выделялся гнойно-слизистый экссудат с полужидкой консистенцией. Если альвеолы молочной железы преимущественно были полиморфными, различной величины и содержали серозную жидкость с обилием жировых и молочных включений, то происходили острые воспалительные процессы в матке в виде катарально-гнойного эндометрита.

10. При сочетанном течении суклинического мастита и острого послеродового эндометрита у коров в крови отмечалось достоверное увеличение количества палочкоядерных лейкоцитов на 58,0%, эозинофилов в 2,5 раза, моноцитов на 60,0%, количества б - и в-глобулинов на 25,0 и 30,0%, глюкозы на 52,0% и кальция в 1,5 раза, а содержание фосфора снижалось на 55,0%, холестерина - на 26,0 %.

11. Интрацистернальном применение пробиотиков на основе Bacillus amyloliquefaciens сухостойным коровам с субклиническим маститом привело к снижению количества соматических клеток в секрете вымени в первые трое суток в 3,5 раза, не вызвало местной воспалительной реакции, а также позволило излечить больше на 10,0% коров и 17,0% долей вымени по сравнению с базовым препаратом.

12. Субклеточная организация молочной железы у сухостойных коров при применении пробиотиков на основе Bacillus amyloliquefaciens улучшалась за счет гиперпластических процессов. Мелкие воспалительно-клеточные инфильтраты обновлялись лимфоидно-макрофагальными клетками, происходила стадийная дифференциация плазматических и макрофагальных клеток в молочной железе, расширялось микроциркуляторное русло, которое содержало как моноцитарные клетки, так и формирующиеся кровеносные капилляры.