Задание 1. Определение стерильности лекарственных средств.
Для определения стерильности лекарственных средств (субстанций) используют следующие питательные среды:
Жидкая тиогликолевая среда: снижает окислительно-восстановительный потенциал и способствует росту анаэробных микроорганизмов. Используется для выявления анаэробных и аэробных бактерий. Жидкая среда на основе гидролизата казеина и соевых бобов (жидкая среда Сабуро). Используется для выявления грибов и аэробных бактерий.Таблица 4
Минимальные количества испытуемого продукта,
используемые для каждой питательной среды
Количество препарата в контейнере | Минимальное количество, которое следует использовать для посева на каждую среду (если не обосновано или не разрешено использование других количеств) |
Жидкости: - менее 1 мл - 1-40 мл - более 40 мл, но не более 100 мл - более 100 мл Жидкости, содержащие антибиотики | Все содержимое контейнера Ѕ содержимого каждого контейнера, но не менее 1 мл 20 мл 10% содержимого контейнера, но не менее 20 мл 1 мл |
Нерастворимые ЛС, кремы и мази, подлежащие суспендированию или эмульгированию | Все содержимое каждого контейнера, составляющее не менее 200 мг |
Твердые вещества Менее 50 мг 50 мг – 300 мг от 300 мг до 5 г Более 5 г | Все содержимое каждого контейнера Ѕ содержимого каждого контейнера, но не менее 50 мг 150 мг 500 мг |
При определении стерильности водных растворов методом прямого посева:
- определенное количество испытуемого продукта помещают непосредственно в питательную среду. При этом объем образца должен составлять не более 10% объема питательной среды;
- если испытуемый продукт обладает антимикробной активностью, испытания выполняют после нейтрализации подходящим нейтрализующим агентом или путем разведения в достаточном количестве питательной среды;
- при необходимости использования большого объема испытуемого продукта предпочтительно использовать концентрированную питательную среду, приготовленную с учетом последующего разбавления.
Инокулированные питательные среды инкубируют в течение не менее 14 дней при 30 – 35°С (тиогликолевую среду для выявления бактерий) и при 20 – 25°С (среду на основе гидролизата казеина и соевых бобов или жидкую среду Сабуро для выявления грибов).
Ход работы
Занятие 1. Определение стерильности водного лекарственного cредства методом прямого посева в емкости с жидкими питательными средами.
Питательные среды:
Для определения стерильности лекарственных средств используют следующие питательные среды, ростовые свойства и стерильность которых подтверждены предварительно:
- жидкая тиогликолевая среда: для выявления анаэробных и аэробных бактерий; жидкая среда на основе гидролизата казеина и соевых бобов или жидкая среда Сабуро : для выявления грибов и аэробных бактерий.
Инокуляция питательных сред испытуемым лекарственным средством:
Необходимое количество образца испытуемого лекарственного средства (в соответствии с таблицей 4) асептически переносят в жидкую тиогликолевую среду и жидкую среду на основе гидролизата казеина и соевых бобов (или жидкую среду Сабуро). Объем образца должен составлять не более 10% объема питательной среды.
Если испытуемый продукт обладает антимикробным действием, его нейтрализуют подходящим способом.
Отрицательный контроль:
Интактные порции питательных сред из той же партии.
Инкубирование:
Инкубирование инокулированных питательных сред проводят в течение 14 суток при температуре:
- 30 – 35°С – тиогликолевую среду для выявления бактерий; 20 – 25°С – среду на основе гидролизата казеина и соевых бобов (или жидкую среду Сабуро) для выявления грибов.
Занятие 2. Учет результатов. Анализ соответствия качества испытуемого лекарственного средства по показателю «Стерильность».
На протяжении периода инкубации, а также по его завершении (через 14 суток) визуально оценивают наличие макроскопических признаков микробного роста в питательных средах.
Если признаков микробного роста не обнаруживается, то испытуемое лекарственное средство признают выдерживающим испытание на стерильность.
При наличии признаков микробного роста испытуемое лекарственное средство не выдерживает испытание на стерильность.
Результаты заносят в таблицу 5.
Таблица 5
Определение стерильности лекарственного средства
методом прямого посева
Наименование питательной среды | V ЛС в контейнере | V образца ЛС, взятого в испытание | Критерий приемлемости | Результат испытания | Отрицательный контроль |
Тиогликолевая среду | Отсутствие макроскопи- ческих признаков микробного роста в питательных средах при визуальной оценке | ||||
Среда на основе гидролизата казеина и соевых бобов (или жидкая среда Сабуро) |
В заключение делают вывод о соответствии качества испытуемого лекарственного средства по показателю «Стерильность».
Вопросы для подготовки:
Что такое стерильность фармацевтической продукции и какова цель испытания на стерильность? Какие группы лекарственных средств подлежат контролю стерильности? Условия для проведения испытания по определению стерильности. Методы определения стерильности фармацевтической продукции. Что такое система гарантирования стерильности?Тема 5. ВАЛИДАЦИЯ ТЕХНОЛОГИЧЕСКИХ ПРОЦЕССОВ ПРОИЗВОДСТВА СТЕРИЛЬНЫХ ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ
Валидация технологического процесса – документированное подтверждение того, что процесс, проводимый в пределах установленных параметров, может осуществляться эффективно, с воспроизводимыми результатами и приводит к получению лекарственного средства, соответствующего заранее установленным характеристикам качества.
Требования к производству стерильных лекарственных средств:
- минимальный риск загрязнения микроорганизмами, механическими частицами, пирогенными веществами;
- производство в классифицированных чистых помещениях и зонах с постоянным контролем степени их загрязненности.
Различают два типа технологических операций при производстве стерильных лекарственных средств:
- производство с заключительной стерилизацией;
- производство в асептических условиях.
К валидации процессов по изготовлению стерильных лекарственных средств применяются принципиально разные подходы:
- для лекарственных средств, подвергающихся заключительной стерилизации, – валидация процесса стерилизации; для лекарственных средств, производимых в асептических условиях, - валидация процесса стерилизующей фильтрации и асептических операций в целом.
Для достижения уровня гарантированной стерильности лекарственных средств в асептическом производстве применяют системы фильтрации, включающие фильтры стерилизующего уровня для удаления микроорганизмов, а также чистые помещения и локальные зоны со своей инфраструктурой, обеспечивающие асептическую среду вокруг этих систем фильтрации.
Стерилизующий фильтр – фильтр, способный в процессе фильтрации удалять из среды микроорганизмы, присутствующие в ней в определенной концентрации.
Требования, предъявляемые к характеристикам и свойствам стерилизующих фильтров:
- способность удерживать микроорганизмы;
- отсутствие способности к сорбции компонентов лекарственных средств;
- широкая химическая совместимость с различными средами (растворами лекарственных средств);
- способность выдерживать множественные циклы регенерирующих и стерилизационных воздействий;
- стойкость к механическим воздействиям;
- высокая производительность и др.
Часть требуемых характеристик предоставляется в составе документов производителя фильтров.
Свойства, которые определяются спецификой применения в конкретных производственных условиях и с конкретными лекарственными средствами, должны быть подтверждены пользователем фильтров самостоятельно (в частности, удерживающая способность фильтра).
Для проверки удерживающей способности стерилизующего фильтра используют клетки одной из самых мелких «классических» бактерий – Brevundimonas (ранее Pseudomonas) diminuta. Суспензия таких клеток считается международным промышленным стандартом микробиологических модельных загрязнений для определения эффективности удерживающей способности на мембранах с диаметром пор 0,2 мкм.
Проверка удерживающей способности стерилизующего фильтра проводится с учетом реальных условий производства лекарственного средства:
Путем инокуляции суспензии микроорганизма в раствор конкретного лекарственного средства, т. к его компоненты могут оказывать воздействие как на материал фильтра, так и на микроорганизм; В течение времени фильтрации стандартного объема ЛС; При давлении и скорости потока, соответствующих таковым в условиях реального производства лекарственного средства; С учетом температуры фильтрации (если температура раствора лекарственного средства не оказывает влияния на жизнеспособность тест-микроорганизма).Фильтр классифицируется как стерилизующий, если он выдерживает бионагрузку в виде клеток бактерий Brevundimonas diminuta в количестве не менее 107 КОЕ/см2 эффективной площади фильтра и обеспечивает стерильный поток на выходе.
Бионагрузка (биологическая нагрузка) – популяция жизнеспособных микроорганизмов в жидкости до стадии стерилизующей фильтрации.
Для расчета объема суспензии бактерий Brevundimonas diminuta, обеспечивающего необходимую биологическую нагрузку (микробный вызов), используют формулу:
где:
107 (КОЕ/см2) – минимальная нагрузка на 1 см2 активной площади фильтра;
|
Из за большого объема этот материал размещен на нескольких страницах:
1 2 3 4 5 |
