Клиническое, биологическое и гистологическое исследование улучшения показателей «индекса дряблости кожи» и косметологически-положительной функциональной перестройки фибробластов при применении MECANO-STIMULATION (стр. 4 )

Таблица 5.

Улучшение на исследуемой стороне в Т1 по сравнению с Т0 (контрольная сторона)	Статистически достоверная разница между сторонами лица после процедур (Т1)	Статистически достоверное улучшение на исследуемой стороне лица в Т1
Глубокие морщины	13.6% (4.8%)	Да (P=0.004)
Неровность	3.8% (?5.1%)	Да (P=0.028)	Да (P=0.016)
Мимические морщины	?3.1% (?10.5%)
Носогубная складка	21.3% (11.6%)	Да (P=0.089)
Эластичность	11.2% (0.5%)	Да (P=0.003)
Упругость	23.1% (2.5%)	Да (P=0.003)	Да (P=0.001)
Сияние	26.3% (14%)	Да (P=0.011)	Да (P=0.026)
Мягкость	2.1% (?7.4%)	Да (P=0.018)	Да (P=0.016)
Темные круги под глазами	18.8% (0%)	Да (P=0.001)

В таблице 6 показаны результаты опросника, заполненного в период Т2 (через месяц после процедур):

Сторона на которой проводились процедуры	Противоположная сторона
Плотность кожи	T1	70	23
T2	75	37
Эластичность кожи	T1	73	20
T2	75	24
Мягкость кожи	T1	67	23
T2	87	12
Уменьшение морщин	T1	87	10
T2	75	12
Уменьшения обвисания	T1	77	20
T2	75	25
Яркость кожи	T1	20	53
T2	62	24

Примечание

Указана доля ответов, оценивающих показатель как улучшенный по сравнению с Т0

Результаты показывают значительное улучшение по всем параметрам, кроме яркости кожи.

Анкета удовлетворенности

В Т1 90% добровольцев были удовлетворены резуотамами механо-стимуляции, в период Т2 число удовлетворенных достигло 100%. В периоды Т1 и Т2 продолжить процедуры хотели 70% и 75% добровольцев, соответственно. 77% поставили процедурам оценку «очень хорошо» или «хорошо» в периоде Т1. Через месяц, в периоде Т2, 87% отмечали положительный эффект сеансов.

Фотографическое исследование

Фотографии иллюстрируют улучшение формы овала лица у 60% добровольцев на стороне проводимых процедур (рисунок 7).

Рисунок 7.

Примечание

Показано уменьшение обвисания кожи после 24 сеансов на примере двух добровольцев.

Исследования in vitro 

Миграционая активность

Этот показатель был оценен по способности фибробластов сокращать свободно-плавающую коллагеновую пленку. Ретракция коллагеновых пленок фибробластами, взятых с участков кожи после механо-стимуляции была достоверно выше, чем у фибробластов с контрольной стороны лица (Р=0,001, рисунок 8).

Рисунок 8.

Измерения силы сокращения матрикса c помощью Glasbox®

Различие между двумя группами фибробластов по количественной оценке силы сокращения коллагеновых пластинок в приборе Glasbox® не наблюдалось.

Рисунок 9.

Исследование синтеза коллагена 1 типа, эластина и гиалуроновой кислоты

Результаты анализа отражены в процентном выражении к периоду Т0. Увеличение синтеза коллагена 1 типа на стороне проводимых процедур по сравнению с противоположной носит недостоверный характер и составило 7.8%±69.8% против 0.0%±0.0%/ соответственно (рисунок 10).

Увеличение синтеза эластина составило на исследуемой стороне составило, в среднем, 45.6%±32.1%, тогда как на контрольной не наблюдалось, а синтез гиалуроновой кислоты увеличился на 80.2%±69.8%, тогда как на контрольной стороне на наблюдалось, P=0.175 and P=0.268, соответственно (рисунок 10).

  Control         Mecano-Stimulation™  Control         Mecano-Stimulation™

  Control         Mecano-Stimulation™ 

Рисунок 10.

Синтез матричных металлопротеиназ (ММП) и тканевых ингибиторов МП

Результаты приведены в процентном выражении к периоду Т0.

Достоверно увеличился синтез МПП-9, прирост составил 115,4%, P<0.05 на стороне процедур.

Достоверных изменений синтеза МПП-1 и ТКМП не обнаружено (рисунок 11).

  Control         Mecano-Stimulation™  Control        Mecano-Stimulation™

Control         Mecano-Stimulation™ 

Рисунок 11. 

Электронная микроскопия

У 4 из 10 довровольцев наблюдались морфологические признаки улучшения на стороне механо-стимуляции:

- расширение сети гранулярного (шероховатого) эндоплазматического ретикулума;

- увеличение свечения митохондрий с отчетливо выраженными кристами;

- увеличение числе мелких вакуолей (предположительно, секреторных);

- структурная перестройка фрагментированных эластичный волокон (как доказательство активации фибробластов)

- Повышение экспрессии ?-актина более чем в 50% случаях (рисунок 12).

Рисунок 12.

Примечание

А - Контрольная сторона (аморфное вещество между фрагментами эластичных волокон)

B - Исследуемая сторона (перестройка эластичных волокон вблизи фибробластов с выраженными митохондриями)

С - Исследуемая сторона (расширение сети гранулярного эндоплазматического ретикулума)

D - Исследуемая сторона (секреторные вакуоли, прикрепленные к цитоплазматической мембране, прилегающей к эластичным волокнам)

Е - Исследуемая сторона (меченные золотом нити ?-актина в фибробластах сосочков дермы)

На образцах кожи контрольной стороны определяются признаки хронического старения, такие как фрагментация эластичных волокон,  снижение плотности и структурированности волокон внеклеточного матрикса и нефункционирующие фибробласты. Эти признаки в большей степени были выражены у 7 из 10 добровольцев.

Обсуждение

Старение кожи - это сложный процесс, зависящий и от внутренних факторов (возраст, генетическая предрасположенность), и от негативного влияния окружающей среды (главным образом, УФ-излучения)14. Клиническими проявлениями, в конечном итоге, являются дряблость, обвислость кожи и глубокие морщины15.

Фибробласты - самые распространенные клетки кожи, играющие ключевую роль в синтезе компонентов межклеточного матрикса, его ремоделирования, а также обладающими сократительной способностью. Исследования in vitro показали, что механическое воздействие на фибробласты способно изменить их функционирование и запустить комплекс биохимических реакций3,4,6, и гипотеза, что механическое воздействие на кожу способно вызвать благоприятные косметические эффекты подтвердилась.

С возрастом кожа истончается, теряет эластичность и становится сухой. Морфологические исследования фибробластов в области морщин показало, уменьшение их сократительной способности и миграционной активности1. Характерные признак старения кожи - это фрагментация волокон межклеточного матрикса16 (в результате ферментативной активности ММП, коллагеназ и эластаз), что разрушает «скелет» дермы. Фибробласты, секретирующие и организующие коллагеновый матрикс не могу прикрепляться к фрагментированному коллагену. Снижение связи с матриксом нарушает передачу механического напряжения на фибробласты и они «коллапсируют». Данная связь необходима для равновесия между выработкой коллагена и коллаген-разрушающих ферментов17. «Коллапсированные» фибробласты отличаются низким синтезом коллагена, но высокой секрецией коллаген-разрушающих ферментов7.

Также при старении кожи снижается выработка протеогликанов (в том числе, гиалуроновой кислоты, обладающей высокой гигроскопичностью - способностью удерживать воду). Фибробласты теряют сократительную способность, и возможность дифференцироваться в миофибробласты, и меньше экспрессируют ?-актин. Это уменьшает механическое напряжение в волокнах межклеточного матрикса, и приводит к снижению эластичности и тонуса кожи. Предыдущие исследования эффективности механо-стимуляции показали ее способность запускать естественную выработку коллагена и эластина9.