“Spinreact” Испания. Экспресс-диагностикумы (стр. 4 )

Гетерофильные антитела, ассоциированные с инфекционным мононуклеозом, могут присутствовать как в самом начале, так и на 4-й день заболевания, и свидетельствуют о положительном диагнозе, их персистирование может продолжаться несколько месяцев.

Обнаруживаемые уровни гетерофильных антител к ИМ могут обычно определяться на 6-й – 10-й день вслед за появлением симптоматики.

Известно, что этиологическим агентом ИМ является вирус Эпштейна-Барра, но положительные результаты могут быть также при гепатитах, краснухе, лейкемии, лимфоме Веркета и других патологических состояниях.

Лабораторные результаты должны рассматриваться в свете истории болезни пациента.

Положительные результаты наблюдаются примерно в 98% случаев ИМ.

Можно ожидать ложноотрицательные результаты в 2% случаев, а ложноположительные результаты
в 6-13% случаев.

ПРИМЕЧАНИЯ

Реагенты и контроли содержат 0,1% азид натрия в качестве консервантов. Избегайте проглатывания, контакта с кожей и слизистыми оболочками. При обращении с реагентами следует руководствоваться обычными правилами, принятыми в лаборатории.

ЛИТЕРАТУРА

1.  Sumaya, C. V. LAB. MANAGEMENT October: 37

2.  Spector, S. A. and V. Michelotti. Diagnosis Sept: 65

3.  Askinazi, C. Cole and J. L. Brusch. JAMA 236: 1492-1

ТОКСОПЛАЗМОЗ (Toxoplasma latex)

Латексный тест на слайде для качественного и полуколичественного определения антител к токсоплазме в сыворотке человека.

Код: 1201тестов):	2,5 мл	Токсо-латексный реагент
	1мл	положительный контроль
	1мл	отрицательный контроль
	17 х 6	Одноразовые слайды

ПРИНЦИП

Латексный реагент (TOXO-Latex) является суспензией полистироловых латексных частиц, покрытых антигенами Toxoplasma gondii. Латексные частички дают видимую агглютинацию при реакции антиген-антитело. Чувствительность латексного реагента (TOXO-Latex) установлена для определения от минимального уровня антител в 4 МЕ/мл.

РЕАГЕНТЫ

Реагент 1 Белая крышка	TOXO-латексный реагент в виде суспензии. Азид натрия 0,1%.
Реагент 2 Красная крышка	Положительный контроль, содержащий не менее 4 МЕ/мл РФ. Человеческая сыворотка. Содержит 0,1% азид натрия.
Реагент 3 Голубая крышка	Отрицательный контроль, содержащий менее 4 МЕ/мл РФ. Нормальная человеческая сыворотка. Содержит 0,1% азид натрия.

* Человеческая сыворотка, используемая в качестве контролей, прошла тестирование и дала отрицательный результат на HBsAg и ВИЧ. Однако с контролями следует обращаться с необходимыми предосторожностями.

ХРАНЕНИЕ И СТАБИЛЬНОСТЬ

Тщательно перемешайте реагент (TOXO-Latex) перед использованием до гомогенной суспензии без видимых сгустков.

Реагент и контроли хранить при 2-8°C. Не замораживать. При этих условиях компоненты остаются стабильными до указанного на упаковке срока.

Чувствительность теста зависит от объема капли (25 мкл).

ПРОБЫ

Используйте свежую сыворотку, полученную центрифугированием свернувшейся крови. Пробы могут храниться в течение 48 ч при 2-8°C перед выполнением теста. Для более продолжительного хранения пробы необходимо заморозить. Гемолизированные, липемические или загрязненные сыворотки не должны использоваться.

ПРОЦЕДУРА

Качественный тест

1.  Выдержать все контроли и реагент при комнатной температуре перед использованием.

2.  Осторожно перемешать латексный реагент до гомогенной суспензии.

3.  Проверьте реагент с положительным и отрицательным контролями.

4.  Внести по 50 мкл сывороток в соответствующие ячейки слайда.

5.  Добавьте по 25 мкл латексного реагента вслед за каплей сывороток.

6.  Перемешать содержимое ячеек, распространив по всей поверхности ячеек. Поворачивайте слайд вручную или, поместив на механический ротатор при 80-100 об./мин, в течение 4 минут. По окончании инкубации сразу же считайте результаты на наличие или отсутствие видимых агглютинатов. При более позднем считывании возможна неспецифическая агглютинация.

ИНТЕРПРЕТАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ

·  Гомогенная суспензия (отсутствие агглютинации) считается отрицательным результатом и свидетельствует о том, что антитела к токсоплазме отсутствуют, или же уровень антител к токсоплазме в пробе ниже 4 МЕ/мл. Если тестировались сыворотки беременных женщин, тест необходимо повторить в течение беременности вследствие возможной сероконверсии.

·  Присутствие агглютинатов является положительным результатом и обозначает присутствие антител к токсоплазме, которое отражает бывшую или текущую инфекцию. В этом случае рекомендуется выполнить определение титра антител.

Полуколичественный тест

Полуколичественным методом исследуются пробы, давшие положительный результат при качественном исследовании. Тест выполняется, как и указано выше, только пробы предварительно разводятся физраствором (0,9% NaCl). Титр получают серией двукратных разведений в разбавителе (1:2, 1:4, 1:8, 1:16, 1:32 и т. д.).

Определение соответствующей концентрации РФ:

Разведение	1:2	1:4	1:8	. . .
Сыворотка	100 мкл
физраствор	100 мкл	100 мкл	100 мкл
		100 мкл
			100 мкл
Объем пробы	50 мкл	50 мкл	50 мкл
Концентрация будет соответствовать положительному результату в наибольшем разведении:
4х разведение	4х2	4х4	4х8	. . .
Концентрация (МЕ/мл)	8	16	32

НОРМАЛЬНЫЕ УРОВНИ

Взрослые < 4 МЕ/мл

ПРИМЕЧАНИЕ

Токсоплазмоз – это инфекционное заболевание, поражающее животных и людей, которое вызывается протозойным паразитом Toxoplasma gondii. Заражение токсоплазмозом обычно начинается бессимптомно или в легкой форме. У беременных женщин, однако, в результате инфекции происходит внедрение паразита через плаценту в кровообращение плода, что вызывает развитие конгенитального токсоплазмоза. По литературным данным известно, что риск и тяжесть конгенитального токсоплазмоза максимальны, если это происходит в первом триместре беременности.

Конгенитальный токсоплазмоз приводит к различным осложнениям от спонтанных выкидышей и невынашиваемости беременности до генерализованных и неврологических симптомов, которые часто дают поражения глаз.

-  Реагент предназначен для использования in vitro.

-  Сильно положительные сыворотки могут давать эффект «прозоны». Поэтому, если в подозрительных случаях наблюдается отрицательный результат, тест должен быть повторен с разведением сыворотки 1:5.

ЛИТЕРАТУРА

1.  Johnson, A. M. The antigenic Structure of T. gondii, Patology 17, 9

2.  Desmonts, G. and Couvreur, J. Bull NY Acad. Med. 50, 146-

3.  Jacobs, L. Parasitology 11, 631-

4.  Rouss, C. F. and Bourne, G. L., J. Obstet. Gyneacol. ., 79, 115-1

5.  Feldman, H. A. Hosp. Practice, 4, 64

6.  Remington, J. S., Dalymple, W., Jacobs, L. Finland M New Eng. J. Med. 269, 1394-1

ТЕСТ НА БЕРЕМЕННОСТЬ (ХГЧ) (hCG latex - pregnancy test)

Латексный тест на слайде на беременность (определение хорионического гонадотропина человека в моче).

Код: 1200тестов):	Код: 1200тестов):
2,5 мл	5 мл	АнтиХГЧ-латексный реагент
1мл	1мл	положительный контроль
1мл	1мл	отрицательный контроль
8 х 6	16 х 6	Одноразовые слайды

ПРИНЦИП

Набор разработан для определения хорионического гонадотропина человека (ХГЧ) в моче для ранней диагностики беременности. Тест может быть использован на 2 – 4 день задержки месячных, результат готов через 2 минуты. Латексный реагент (Anti-hCG-Latex) является суспензией полистироловых латексных частиц, покрытых мышиными моноклональными антителами к ХГЧ, которые реагируют с присутствующим в моче гормоном, давая видимую агглютинацию. Если в моче ХГЧ отсутствует, агглютинации не будет и, реактив останется неизменным.

Чувствительность латексного реагента примерно 250 МЕ/л (IU/L).

РЕАГЕНТЫ

Реагент 1 Белая крышка	АнтиХГЧ - латексный реагент в виде суспензии. Азид натрия 0,1%.
Реагент 2 Красная крышка	Положительный контроль, содержащий не менее 250 МЕ/л ХГЧ. Контрольная моча. Содержит 0,1% азид натрия.
Реагент 3 Голубая крышка	Отрицательный контроль. Контрольная моча. Содержит 0,1% азид натрия.

ХРАНЕНИЕ И СТАБИЛЬНОСТЬ

Тщательно перемешайте реагент (Anti-hCG-Latex) перед использованием до гомогенной суспензии без видимых сгустков.

Чувствительность теста зависит от объема капли (50 мкл), не используйте другую капельницу, держите капельницу вертикально, перпендикулярно поверхности слайда.

Реагент и контроли остаются стабильными до указанного на упаковке срока при 2-8°C. Не замораживать. Выдержать все контроли и реагент при комнатной температуре перед использованием

ПРОБЫ

Моча. Пробы мочи должны быть собраны в чистые, сухие контейнеры. Рекомендуется использовать первую утреннюю порцию мочи. Пробы могут храниться в течение 12 ч при комнатной температуре перед выполнением теста или в течение 48 ч при 2-8°C. Для более продолжительного хранения пробы необходимо заморозить.

ПРОЦЕДУРА

1.  Выдержать все контроли и реагент при комнатной температуре перед использованием.

2.  Осторожно перемешать латексный реагент до гомогенной суспензии.

3.  Проверьте реагент с положительным и отрицательным контролями. Если не получены ожидаемые результаты, не используйте реагент.

4.  Внести по 100 мкл (2 капли) проб в соответствующие ячейки слайда.

5.  Добавьте по 1 капле (50 мкл) латексного реагента вслед за пробами.

6.  Перемешать содержимое ячеек, распространив по всей поверхности ячеек.

7.  Поворачивайте слайд вручную или на механическом ротаторе (80-100 об./мин) в течение 2 мин.

8.  По окончании инкубации сразу же считайте результаты на наличие или отсутствие видимых агглютинатов. При более позднем считывании из-за подсыхания смеси возможны ошибочные результаты.

ИНТЕРПРЕТАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ

Положительный результат: присутствие агглютинатов в течение 2 минут, уровень ХГЧ в пробе выше 250 МЕ/л.

Отрицательный результат: отсутствие агглютинации в течение 2 минут, уровень ХГЧ в пробе ниже 250МЕ/л.

ПРИМЕЧАНИЕ

Пробы мочи, взятые от пациентов с трофобластическими заболеваниями, такими как хорионкарцинома и пузырный занос, которые секретируют ХГЧ, будут давать положительный результат у небеременных женщин.

Пробы с высокими уровнями ХГЧМЕ/мл) могут давать эффект «прозоны» (т. е. давать отрицательный результат).

Присутствующие в моче гипофизарные гонадотропины, такие как ФСГ и ЛГ, будут давать перекрестную иммунологическую реакцию с ХГЧ. При очень высоких уровнях этих гонадотропинов наблюдаются ложно положительные результаты.

При подозрении на беременность и отрицательном результате теста, тестирование необходимо повторить через 1 – 2 дня.

Только для использования в диагностике in vitro.

ЛИТЕРАТУРА

1.  Meyer, H. M. Jr., “Statement to be included in Directions for use of Anti-hCG Serum” Memorandum, DEW, BOB, Nov.2 (1973).

2.  Braunstein, G. D., et al., Am. J. Obstet. Gynecol. 126:6 (1976).

3.  Uotolia, M., et al., J. Of Immul. Methods/ 42:11 (1981).

4.  Milstein, C., and Kohler, G., Nature 256:

5.  Horwitz, C. A., Masalansky, R., Waldinger, R. Cabera, H., and Ward, P. C., J. Reprod. Fet. 33,

ОБЩИЙ БЕЛОК в моче и цереброспинальной жидкости
(total protein in urine and cerebro-spinal fluid)

Метод с пирогаллол-красным

Для количественного определения концентрации общего белка в моче и цереброспинальной жидкости.

Код: 1001025 2 х 150мл

ПРИНЦИП

Белок реагирует с пирогаллол/молибдатом, формируя красный комплекс. Оптическая плотность образующегося комплекса пропорциональна концентрации белка в пробе.

СОСТАВ РЕАГЕНТОВ

Реагент 1	Пирогаллол-красный рН 2,5	50 ммоль/л
	Молибдат натрия	0,04 ммоль/л
Реагент 2 Стандарт	Альбумин/глобулин	200 мг/л

ПОДГОТОВКА И СТАБИЛЬНОСТЬ

Реагенты готовы к использованию. Реагенты стабильны вплоть до указанной даты (Exp. Date) при 2-8°С. Избегать прямого солнечного света.

ПРОБЫ

Моча, цереброспинальная жидкость.

ПРОЦЕДУРА

Условия измерения:

Длина волны : 598 нм

Оптический путь : 1 см

Температура : 25, 37°С

Измерение : против бланка по реагенту, нужен один бланк на серию.

Закапать в кюветы	Полумикрометод	Микрометод
Бланк	Стандарт	Проба	Бланк	Стандарт	Проба
Стандарт	–	20 мкл	–	–	10 мкл	–
Проба	–	–	20 мкл	–	–	10 мкл
Цветной реагент	1 мл	1 мл	1 мл	500 мкл	500 мкл	500 мкл

Перемешать, инкубировать в течение 5 минут при 37°С или 10 мин при комнатной температуре. Измерить оптическую плотность пробы (А пробы) и стандарта (А стандарта) против бланка по реагенту при 598 нм. Окраска стабильна 30 мин.

ВЫЧИСЛЕНИЕ

С общего белка (г/л) = С стандарта (г/л) х А пробы.

А стандарта

Линейность

Линейность теста 125 – 4000 мг/л. Пробы с уровнем выше 4000 мг/л должны быть разведены 1:2 физраствором, измерены и, конечный результат нужно умножить на 2 (коэффициент разведения).

НОРМАЛЬНЫЕ ВЕЛИЧИНЫ

Моча :	10 – 140 мг/24ч
Цереброспинальная жидкость :	80 – 320 мг/л

ПРИМЕЧАНИЕ

Присутствие SDS и Triton X-100 в концентрации от 0,1% и 1% соответственно влияет на реакцию.