“Spinreact” Испания. Экспресс-диагностикумы (стр. 7 )

ПРОЦЕДУРА

1.  Выньте тестовое устройство из пакетика непосредственно перед тестом и поместите его на ровную сухую поверхность.

2.  Держа капельницу для проб над устройством, внесите 2–3 капли (100-150 мкл) пробы в окошечко для пробы.

3.  Считайте результаты в период до 3 минут с момента нанесения пробы.

ИНТЕРПРЕТАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ

ПОЛОЖИТЕЛЬНЫЙ РЕЗУЛЬТАТ: только одна окрашенная полоса в контрольной зоне (C) означает присутствие кокаина.

ОТРИЦАТЕЛЬНЫЙ РЕЗУЛЬТАТ: окрашенная полоса в тестовой зоне (T) и окрашенная полоса в контрольной зоне (C) означают отсутствие кокаина в определяемом уровне. Цветная полоса Т может быть темнее или светлее полосы С.

НЕДЕЙСТВИТЕЛЬНЫЙ ТЕСТ: Отсутствие окрашенной полосы в контрольной зоне (C). Для контроля правильности постановки теста в контрольной зоне всегда должна быть окрашенная полоса.

ПРИМЕЧАНИЕ

Тест разработан для использования только с неразбавленной мочой. Возможно, что такие факторы, как технические или процедурные ошибки, наличие других веществ в пробах мочи, могут влиять на тест и быть причиной ошибочных результатов. Такие примеси, как хлор и /или алюминий, в пробах мочи могут давать ошибочные результаты независимо от метода анализа. Если предполагается наличие примесей, тест необходимо повторить с новой пробой. Положительный результат теста не обеспечивает определение уровня интоксикации или концентрации наркотика в моче. Результат теста после 3 мин может не соответствовать результату, считанному в течение 3 мин. Тест должен учитываться в течение 3 минут после нанесения пробы. Пища или чай, содержащие продукты мака и/или листья коки, могут давать положительный результат в тесте.

ЛИТЕРАТУРА

1.  Ambre, J. J., Anal. Toxicol., 9, 24

2.  Urine Testing for Drugs of Abuse, National Institute on Drug Abuse (NIDA), Research Monograph.

ТЕСТ НА БЕРЕМЕННОСТЬ (ХГЧ) (hCG Spin-Card)

Иммунохроматографический тест на беременность для качественного определения хорионического гонадотропина человека.

Код: 1501тестов) Код: 1501тестов)

ПРИНЦИП

Хорионический гонадотропин человека (ХГЧ) – это гормон, продуцируемый тканью плаценты у беременных женщин. ХГЧ может определяться как в моче, так и в сыворотке в ранний период на 7 – 10 день после зачатия, что делает этот гормон идеальным индикатором беременности.

Данный тест – это одношаговый иммунохроматографический тест для определения ХГЧ в моче.

ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТЬ

Тест определяет ХГЧ от уровня 25 МЕ/л, основан на референсном стандарте (3-й Международный стандарт 75/537) Всемирной Организации Здравоохранения (ВОЗ). В норме при беременности положительная реакция может быть в первый день нарушения менструального цикла. Если первый тест отрицателен, необходимо его повторить несколькими днями позже, при отсутствии менструаций.

СПЕЦИФИЧНОСТЬ

Использование моноклональных антител к ХГЧ обеспечивает высокую степень специфичности теста на ХГЧ. Перекрестная реакция с ЛГ (лютеинизирующий гормон) низка, при концентрации ЛГ 1000 МЕ/л не происходит никакой реакции.

СТАБИЛЬНОСТЬ

Набор, хранящийся при 8-30°C сохраняет стабильность более одного года. Окончание срока хранения указано на каждой упаковке.

ПРОБЫ

Пробы мочи могут быть собраны в чистый стеклянный или пластиковый контейнер в любое время дня, но рекомендуется использовать первую утреннюю мочу, так как она содержит наибольшую концентрацию гормона. Пробы перед выполнением теста могут храниться при 2-8°C 1 – 2 дня. На больший срок они должны быть заморожены при –20°С. Избегайте многократных процедур заморозки - разморозки. Перед тестированием пробы мочи должны быть полностью оттаяны, перемешаны и выдержаны при комнатной температуре.

ПРОЦЕДУРА

1.  Выньте тестовое устройство из пакетика непосредственно перед использованием.

2.  Медленно внесите 5 капель (около 250 мкл) прозрачной пробы мочи в окошечко для пробы номер 1. Держите пипетку вертикально, расстояние между наконечником и окошком 1 должно быть около 1см, так капли будут падать свободно.

3.  Считайте результаты через 5-10 минут. Не учитывайте результаты после 15 минут.

В зависимости от концентрации ХГЧ положительный результат может наблюдаться уже менее, чем через 1 минуту.

ИНТЕРПРЕТАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ

ОТРИЦАТЕЛЬНЫЙ РЕЗУЛЬТАТ: только одна окрашенная полоса в контрольном окошке 3 без окрашенной полосы в тестовом окошке 2.

ПОЛОЖИТЕЛЬНЫЙ РЕЗУЛЬТАТ: окрашенная полоса в контрольном окошке 3 и окрашенная полоса в тестовом окошке 2.

НЕДЕЙСТВИТЕЛЬНЫЙ ТЕСТ: Отсутствие окрашенной полосы в контрольном окошке 3 течение 5 –10 минут. Окрашенная полоса должна быть в любом случае. Повторите тест с новым набором.

ПРИМЕЧАНИЕ

Любая линия или окраска, появляющиеся после 15 мин, не имеют диагностического значения.

Если

Высокие уровни ХГЧ в моче могут наблюдаться у пациенток с хорионической эпителиомой или пузырным заносом.

Окончательная диагностика беременности должна основываться на сопоставлении результатов теста и типичных клинических признаков и симптомов.

Только для использования в диагностике in vitro.

ЛИТЕРАТУРА

1.  Robert, O. Hussa: The Clinical Marker hCG. Preager Publishers, New York 1987.

2.  Siegfried Schwarz, Peter Berger and Georg Wick: The Antigenic Surface of Human Chorionic Gonadotropin as Mapped by Murine Monoclonal Antibodies. Endocrinology , (19

ТЕСТ-ПОЛОСКИ НА БЕРЕМЕННОСТЬ (ХГЧ) (Stick hCG)

Иммунохроматографический тест (тест-полоска) на беременность для качественного определения хорионического гонадотропина человека в моче и сыворотке.

Код: 1501полосок)

ПРИНЦИП

Хорионический гонадотропин человека (ХГЧ) – это гормон, продуцируемый тканью плаценты у беременных женщин. ХГЧ может определяться как в моче, так и в сыворотке в ранний период на 7 – 10 день после зачатия, что делает этот гормон идеальным индикатором беременности.

Тест Stick hCG – это одношаговый иммунохроматографический тест для определения ХГЧ в моче и сыворотке.

ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТЬ

Тест определяет ХГЧ от уровня 25 МЕ/л, основан на референсном стандарте (3-й Международный стандарт 75/537) Всемирной Организации Здравоохранения (ВОЗ). В норме при беременности положительная реакция может быть в первый день нарушения менструального цикла.

СПЕЦИФИЧНОСТЬ

Использование моноклональных антител к ХГЧ обеспечивает высокую степень специфичности теста на ХГЧ. Перекрестная реакция с ЛГ (лютеинизирующий гормон) низка, при концентрации ЛГ 1000 МЕ/л перекрестная реакция не наблюдается.

ХРАНЕНИЕ И СТАБИЛЬНОСТЬ

Набор, хранящийся при 2-30°C сохраняет стабильность более одного года. Окончание срока хранения указано на каждой упаковке.

Тест-полоски Stick hCG чувствительны в влажности воздуха. Держите контейнер плотно закрытым. Не храните однажды вскрытый контейнер в холодильнике. Конденсация воды внутри контейнера может быть причиной порчи тест-полосок.

ПРОБЫ

Пробы перед выполнением теста могут храниться при 2-8°C до 48ч. На больший срок они должны быть заморожены при –20°С. Избегайте многократных процедур заморозки - разморозки. Перед тестированием пробы мочи должны быть полностью оттаяны, перемешаны и выдержаны при комнатной температуре.

Пробы мочи могут быть собраны в чистый стеклянный или пластиковый контейнер в любое время дня, но рекомендуется использовать первую утреннюю мочу, так как она содержит наибольшую концентрацию гормона.

ПРОЦЕДУРА

1.  Внесите 0,5 мл пробы в небольшую пробирку или флакон.

2.  Поместите тест-полоску вертикально в пробу белой подушечкой вниз.

3.  Выньте полоску из пробы и считайте результаты через 5-10 минут.

ИНТЕРПРЕТАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ

ОТРИЦАТЕЛЬНЫЙ РЕЗУЛЬТАТ: только одна окрашенная полоса в середине полоски.

ПОЛОЖИТЕЛЬНЫЙ РЕЗУЛЬТАТ: две окрашенные полосы в середине полоски.

НЕДЕЙСТВИТЕЛЬНЫЙ ТЕСТ: Отсутствие окрашенной контрольной полосы течение 5–10 мин. Окрашенная полоса должна быть в любом случае. Повторите тест с новым набором. Любая линия или окраска, появляющиеся после 15 мин, не имеют диагностического значения.

ПРИМЕЧАНИЕ

Если первый тест отрицателен, при отсутствии менструаций необходимо его повторить несколькими днями позже.

Высокие уровни ХГЧ в моче могут наблюдаться у пациенток с хорионической эпителиомой или пузырным заносом.

Окончательная диагностика беременности должна основываться на сопоставлении результатов теста и типичных клинических признаков и симптомов.

Только для использования в диагностике in vitro.

ЛИТЕРАТУРА

1.  Robert, O. Hussa: The Clinical Marker hCG. Preager Publishers, New York 1987.

2.  Siegfried Schwarz, Peter Berger and Georg Wick: The Antigenic Surface of Human Chorionic Gonadotropin as Mapped by Murine Monoclonal Antibodies. Endocrinology , (19

КРАСНУХА (rubella)

Одношаговый иммунохроматографический тест для качественного определения антител (IgG) к вирусу краснухи в сыворотке или плазме человека.

Код: 1503тестов) Код: 1503тестов)

ПРИНЦИП

Краснуха (Rubella) – это легкое, самоограничивающееся заболевание, обычно в детском возрасте, которое характеризуется симптомами умеренного воспаления верхних дыхательных путей, лимфаденопатией подзатылочной области и эритематозной сыпью. После исчезновения сыпи у молодых людей могут быть артралгии и артриты средней тяжести. За последние 15 лет направление на большее внимание к вирусу краснухи в первую очередь в популяции, восприимчивой к заболеванию, было отмечено уменьшение типичных случаев инфекции краснухи.

В настоящее время раннее определение лабораторного диагноза краснухи уменьшает потенциальный риск этого заболевания плода у женщин на ранних стадиях беременности. Если инфицирование происходит во время первого триместра беременности, вирус может вызывать тяжелую инфекцию плода с развитием множественных аномалий, определяемых как конгенитальный синдром краснухи.

ПРИНЦИП

Тест на антитела (IgG) к вирусу краснухи использует непрямую твердофазную иммуноферментную технологию для качественного определения антител (класс IgG) к вирусу краснухи в сыворотке или плазме человека. При тестировании 5 мкл сыворотки или плазмы вносится в окошко для пробы (S), расположенное сразу за тестовым окошком (T). Если в пробе присутствуют любые антитела к краснухе, они будут связываться с антигеном вируса краснухи, импрегнированном в мембране тестовой пластины. Затем в большую лунку (D) добавляется проводящий раствор (Developer solution). Проба с проводящим раствором двигается под действием капиллярных сил к полоске с антигеном, раствор связывает краситель, конъюгированный с антителами к человеческим IgG. Видимая окраска полоски с антигеном в тестовом окне будет развиваться только, когда конъюгат антител с окраской связывается с антителами к вирусу краснухи, которые соединились с антигеном краснухи. Так конъюгат антител с окраской продолжая перемещаться вдоль по тестовой мембране, будет взаимодействовать с другой полоской, располагающейся в контрольном окне с развитием окраски независимо от присутствия антител к вирусу краснухи в пробе.

РЕАГЕНТЫ

·  Тестовые устройства

·  Проводящий раствор (Developer solution)

Материалы, необходимые, но не представленные в наборе:

·  Пробирки для сыворотки или плазмы

·  Центрифуга

·  Пипетки для проб (5-10 мкл) и наконечники

·  Дозатор (0-200 мкл)

ПРОБЫ

Тест может быть выполнен с сывороткой или плазма. В качестве антикоагулянта может быть использованы цитрат натрия, гепарин или ЭДТА. Отделите сыворотку или плазму от сгустка эритроцитов осторожно, избегая гемолиза. Пробы могут храниться перед выполнением теста при 2-8°C, или должны быть заморожены. Избегайте многократных процедур заморозки - разморозки.

ПРОЦЕДУРА

1.  Выдержите все пробы и реагенты при комнатной температуре перед использованием.

2.  Нанесите на тестовое устройство имя пациента или номер.

3.  При внесении 5 мкл пробы в окошечко для пробы с использованием микропипетки легко касайтесь наконечником микропипетки подушечки мембраны и диспенсируйте содержимое.

4.  Добавьте проводящий раствор, держа капельницу в вертикальном положении над окошком для раствора и диспенсируйте 3-4 капли в лунку D.

5.  Считайте результаты в период от 2 до 6 минут.

ИНТЕРПРЕТАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ

ПОЛОЖИТЕЛЬНЫЙ РЕЗУЛЬТАТ:

Две окрашенные полосы, одна в тестовой зоне (T) и одна в контрольной зоне (C) означают, что антитела IgG к вирусу краснухи обнаружены.

ОТРИЦАТЕЛЬНЫЙ РЕЗУЛЬТАТ:

Только одна окрашенная полоса в контрольной зоне (C) без окрашенной полосы в тестовой зоне на нормально окрашенном фоне означает, что антитела IgG к вирусу краснухи не обнаружены.

НЕДЕЙСТВИТЕЛЬНЫЙ ТЕСТ: Отсутствие окрашенных полос в контрольном (C) окне. Окрашенная полоса в контрольном (C) окне должна быть всегда.

БИБЛИОГРАФИЯ

1.  National Committee for Clinical Laboratory Standards, Specimen Handling and Use of Rubella Serology Test in the Clinical Laboratory. NCCLS publication I/LA7-P Villanova, PA, NCCLS, 1984.

2.  Chernesky, M. A. and Mahony, J. *****bella virus. In Manual of Clinical Microbiology. 5th ed., Balows, A. Et al. (ed.). American Society for Microbiology, Washington, D. C., pp. 918-923, 1991.

3.  Hedman, K. and Rousseau, S. A. Measurement of Avidity of Specific IgG for Verification of Recent Primary Rubella. J. Med. Virol. 27-2

Набор на бактериальный фебрилитет (Набор бактериальных антигенов – Febrile bacterial kit)

Бактериальные антигены. Серодиагностика по Видалю. Тест для полуколичественного определения антител к бруцеллезу, сальмонеллезу и риккетсиозу.

Код: 1205010 (6х100 тестов)

ПРИНЦИП

Стандартизованные суспензии убитых и фиксированных бактерий для полуколичественного определения антител в сыворотке человека, образующихся при некоторых лихорадочных инфекциях, таких как бруцеллез, сальмонеллез и риккетсиоз.

РЕАГЕНТЫ

Реагент	Антиген	Код
Salmonella paratyphi AH	a flagellar	1205011
Salmonella paratyphi AO	1,2,12 somatic	1205021
Salmonella paratyphi BH	b flagellar	1205031
Salmonella paratyphi BO	1,4,5,12 somatic	1205041
Salmonella paratyphi CH	c flagellar	1205051
Salmonella paratyphi CO	6,7 somatic	1205061
Salmonella typhi H	d flagellar	1205071
Salmonella typhi O	1,9,12 somatic	1205081
Brucella abortus (*)	somatic	1205091
Proteus OX2	somatic	1205101
Proteus OX19	somatic	1205111
Proteus OXK	somatic	1205121
Поливалентный положительный контроль (животная сыворотка)	1205201
Поливалентный отрицательный контроль (животная сыворотка)	1205122
*) Также используется для определения антител к Brucella melitensis и Brucella suis.

ПОДГОТОВКА И СТАБИЛЬНОСТЬ

Реагенты: готовы к использованию. Тщательно перемешать реагент перед использованием до гомогенной суспензии. Контроли: готовы к использованию.

Все компоненты набора остаются стабильными до указанного на упаковке срока при 2-8°C. Не замораживать.

ПРОБЫ

Сыворотка. Стабильность до 7 дней при 2-8°C. Гемолизированные и загрязненные пробы не должны быть использованы.

ТРЕБУЕМЫЕ МАТЕРИАЛЫ И ИНСТРУМЕНТЫ

Механический ротатор об./мин), тестовые пробирки 12х100мм, физраствор NaCl 0,9 г/л, термостат 37°С.

ПРОЦЕДУРА

А. Агглютинационный тест на слайде (скрининговый тест)

1.  Выдержите реагенты и контроли при комнатной температуре (Примечание 1).

2.  Поместите 1каплю (50 мкл) пробы (Примечание 2 и 3) и 1 каплю каждого контроля в отдельную ячейку на слайде.

3.  Перемешивайте осторожно флакон с антигеном перед использованием. Добавьте 1каплю (50 мкл) антигена в каждую ячейку вслед за тестируемой пробой.

4.  Перемешайте одноразовой палочкой и распределяя по всей ячейке, ограниченной кругом. Перемешивайте поворачиванием на ротаторе об./мин) в течение 1 минуты.

В. Агглютинационный тест на слайде (титрация)

1.  Используя микродозатор, отдозируйте 80, 40, 20, 10 и 5 мкл неразведенной сыворотки в отдельную ячейку на слайде.

2.  Поместите 1каплю (50 мкл) антигена в каждую ячейку вслед за тестируемой пробой.

3.  Перемешайте одноразовой палочкой, распределяя по всей ячейке, ограниченной кругом.

4.  Перемешивайте поворачиванием на ротаторе (80 – 100 об./мин) в течение 1 минуты.

С. Агглютинационный тест в пробирке

1.  Подготовьте серию разведений для каждой пробы следующим образом:

Разведения	1/20	1/40	1/80	1/160	1/320	…
Проба (мкл)	100	–	–	–	–	…
0,9% NaCl (мл)	1,9	1	1	1	1	…
	1 мл	1 мл	1 мл	1 мл	1 мл	1 мл отбросить

2.  Подготовьте 2 пробирки для положительного и отрицательного контролей: 0,1 мл контроля + 0,9 мл 0,9% NaCl.

3.  Добавьте 1 каплю (50 мкл) антигенной эмульсии в каждую пробирку.

4.  Тщательно перемешайте и инкубируйте тестовые пробирки при 37°C 24 часа (Примечание 4).

СЧИТЫВАНИЕ И ИНТЕРПРЕТАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ

А. Агглютинационный тест на слайде (скрининговый тест)

Считайте результаты макроскопически на наличие или отсутствие видимых агглютинатов в течение
1 минуты после снятия слайда с ротатора при интенсивном освещении, сравнивая результаты с контрольными сыворотками.

Положительные пробы должны быть титрованы в агглютинационном тесте в пробирке.

В. Агглютинационный тест на слайде (титрация)

Считайте результаты макроскопически на наличие или отсутствие видимых агглютинатов в течение
1 минуты после снятия слайда с ротатора при интенсивном освещении, сравнивая результаты с контрольными сыворотками.

Получающаяся реакция примерно эквивалентна тому, что происходит в пробирочном тесте с разведениями сыворотки 1/20, 1/40, 1/80, 1/160 и 1/320 соответственно. Если обнаружена положительная реакция ее желательно подтвердить реакцией на соответствующий титр в пробирочном тесте.

С. Агглютинационный тест в пробирке

Считайте результаты макроскопически на наличие агглютинации (Примечание 5), сравнивая результаты с контрольными пробирками.

Положительный контроль должен давать частичную или полную агглютинацию. Отрицательный контроль не должен давать видимых хлопьев.

Частичная или полная агглютинация с различной степенью просветления супернатанта оценивается как положительный результат.

Титр сыворотки определяется по наибольшему разведению, дающему положительный результат. Титры выше 1/80 – 1/160 обычно расцениваются как текущая инфекция.

ОГРАНИЧЕНИЯ ПРОЦЕДУРЫ

-  Ложноотрицательные результаты могут быть в раннем периоде инфекции, при отсутствии иммунного ответа, при эффекте прозоны (бруцеллез) и лечении антибиотиками (для антигенов Somatic).

-  Серологические перекрестные реакции с Brucella возможны в случаях инфекции или вакцинации такими штаммами, как Vibrio cholerae, Pasteurella, Proteus OX19 и Y. enterocolitica (серотип 9).

-  Большое число ложноположительных реакций может наблюдаться индивидуально у некоторых здоровых пациентов с антигенами Proteus только в агглютинационном тест на слайде. Титр менее 1/160 не имеет значения.

ПРИМЕЧАНИЯ

1.  Чувствительность теста снижается при низкой температуре. Лучшие результаты достигаются при температуре выше 10°С.

2.  При тестировании на антитела к Brucella рекомендуется уменьшить объем пробы до 20 мкл для предупреждения эффекта прозоны.

3.  В некоторых географических зонах с высоким превалированием лихорадочных антител рекомендуется разводить пробу ¼ 0,9% NaCl перед выполнением теста.

4.  Процедура инкубации может быть укорочена следующим образом:

-  антигены Somatic (O) и Proteus: 48-50°С до 4 часов,

-  антигены Flagellar (H): 48-50°С до 2 часов.

5.  Реакции с антигенами Somatic (O) характеризуются крупнозернистой, плотной агглютинацией, которая трудно поддается дисперсии, в то время как реакции с антигенами Flagellar (H) сопровождаются рыхлой, хлопьевидной агглютинацией.

Только для использования в диагностике in vitro.

ЛИТЕРАТУРА

1.  Cruickchank R. et al., Medical Microbiol., 11th Ed.,

2.  Freter R. et al., Manual of Clinical Immunology, 2nd Ed., ASM Washington DC, 460-

3.  Felix A., Trans. Roy. Soc. Trp. Med. Hyg., 37: 321-