Материалы по токсико–гигиенической оценке биологически активной добавки к пище эпоэкстрин (стр. 5 )

В результате исследования длительного введения субстанции Эпотек установлено, что масса внутренних органов животных, получавших исследуемый препарат, не отличается от таковой у животных из группы контроля (табл. 12).

Таблица 12

Влияние длительного перорального введения субстанции Эпотек на массу внутренних органов крыс самцов

(n=10 в каждой группе)

Показатель	Группа животных
	Контроль М±м, мг	Эпотек 1,58 мг/кг, М+м, мг	Эпотек 32 мг/кг, М+м, мг	Эпотек 158 мг/кг, М+м, мг
Мозг	1498,2+118,8	1518,1+111,2	1516,3+106,2	1520,1+213,8
Сердце	606,4+10,8	597,5+53,5	577,5+43,5	624,0+93,2
Щитовидная железа	15,4+1,9	14,4+2,9	15,0+3,0	14,4+3,3
Тимус	181,0+46,3	180,5+31,1	179.8+34,1	144,6+35,0
Легкие	846,0+75,6	972,1+82,5	869,0+81,0	912,0+85,1
Поджелудоч-ная железа	366,4+17,5	466,8+10,7	451,7+12,3	436,6+25,2
Селезенка	536,4+10,7	503,2+36,2	523,5+15,2	507,4+17,6
Печень	6422,1+138,1	6212,0+652,7	6114,0+652,7	629,0+100,3
Почка (левая)	474,0+72,3	520,4+68,9	501,3+63,1	496,2+11,6
Почка (правая)	456,0+92,6	509,6+72,6	498,5+61,0	471,2+10,1
Надпочечник (левый)	21,8+3,2	18,4+2,2	17,6+2,1	16,9+2,3
Надпочечник (правый)	19,6+3,0	15,4+2,1	15,1+2,0	16,2+2,3

Ниже приведены результаты патоморфологических исследований внутренних органов крыс самцов, получавших субстанцию Эпотек внутрь в дозах 1,58; 32 и 158 мг/кг в течение двух недель.

ГОЛОВНОЙ МОЗГ. На срезах видны различные участки мозга, не отличающиеся по микроскопической картине у животных контрольной и опытных групп. Артерии, вены и капилляры мягкой мозговой оболочки умеренного кровенаполнения. Патологических изменений эндотелия и глии не наблюдается. Нейроны имеют типичное строение, их ядра содержат дисперсный хроматин и ядрышки.

СЕРДЦЕ. На препаратах сердца крыс из контрольной и опытных групп различимы эпикард, миокард и эндокард. Соединительная ткань в миокарде выражена незначительно. Кровенаполнение капилляров умеренное. Кардиомиоциты типичного строения содержат овальные ядра с мелкодисперсным хроматином и хорошо различимыми ядрышками. В цитоплазме кардиомиоцитов выявляется поперечная исчерченность.

ЛЕГКИЕ. Микроструктура органа крыс из опытных групп не отличается от обнаруживаемой в контроле: на срезах хорошо заметен эпителий бронхиального дерева нормального строения. Паренхима легких типична. Вокруг артериол иногда встречаются лимфоидноклеточные инфильтраты в виде муфт.

ПЕЧЕНЬ. Печень типичного дольчатого строения. Центральные вены окружены трабекулами из гепатоцитов. Желчные канальцы и щелевидные синусоиды выстланы эндотелием с купферовскими клетками и отделены от трабекул щелями Диссе. Соединительнотканные перегородки выражены слабо. Синусоиды в основном спавшиеся, иногда умеренно расширены. Сосуды портальных трактов и центральные венулы умеренного кровенаполнения. Гепатоциты имеют ядра, содержащие мелкодисперсный хроматин, выявляются ядрышки. Патологии у крыс из разных групп не обнаружено.

ПОЧКИ. Строение почек типично. Соотношение коркового и мозгового вещества нормальное. Канальцы в корковом слое имеют узкие просветы, в мозговом – относительно более широкие. Эпителий канальцев по всей их длине сохранен. Сосуды коркового и мозгового вещества умеренного кровенаполнения. Существенных различий в строении органа у контрольных и опытных крыс не обнаружено.

ЖЕЛУДОК. На срезах желудка крыс самцов опытных и контрольной групп хорошо различимы отделы желудка. Слизистая оболочка без патологических изменений. В железистой части хорошо виден интактный однослойный призматический покровный эпителий и железы, занимающие по толщине собственную пластинку слизистой оболочки. Железы типичного строения, структура и распределение обкладочных клеток не изменены. Признаки инфильтрации отсутствуют. Сосуды слизистой спавшиеся.

ПОДЖЕЛУДОЧНАЯ ЖЕЛЕЗА. Видно дольчатое строение. Сосуды слабого кровенаполнения. Эпителий ацинусов не изменен. Островки небольшие, имеют различную форму. Существенных отличий в архитектонике органа у опытных и контрольных животных не выявлено.

СЕЛЕЗЕНКА. На срезах органа видны капсула и трабекулы. Отмечается преобладание красной пульпы. Ее синусы умеренного кровенаполнения. В белой пульпе можно видеть периартериальные лимфоидные влагалища и фолликулы, иногда – реактивные центры. Отличий опыта от контроля не выявлено.

ТИМУС. У животных из контрольной и опытных групп тимус типичного дольчатого строения. Видны три типа эпителия, единичные тельца Гассаля. Имеется множество малых лимфоцитов, наблюдаются единичные лимфобласты и макрофаги.

НАДПОЧЕЧНИКИ. Надпочечники крыс из разных групп имеют типичное строение. Соотношение коркового и мозгового слоя нормальное. В корковом веществе хорошо определяется типичная для надпочечников зональность. Клетки клубочковой зоны светлые. Клетки пучковой зоны базофильные, с мелкими вакуолями. Клетки сетчатой зоны в основном эозинофильные, в них обнаруживаются более крупные вакуоли. Венозные синусы мозгового вещества имеют умеренное кровенаполнение.

ЩИТОВИДНАЯ ЖЕЛЕЗА. У всех животных различимо фолликулярное строение железы. Размеры фолликулов увеличиваются от центра к периферии. Фолликулы округлой формы. Коллоид эозинофильный. Соединительная ткань развита незначительно.

Таким образом в надпочечниках, почках, печени, поджелудочной железе, селезенке, желудке, сердце, легких, тимусе, щитовидной железе, головном мозге животных контрольной и опытных групп морфологических изменений не выявлено.

2.3. Изучение кумулятивной активности субстанции Эпотек

(подострой токсичности по тесту Лима)

При выборе доз и оценке результатов исследования хронической токсичности фармакологического вещества следует учитывать его кумулятивное действие. Поэтому для проведения хроничеких токсикологических экспериментов определяют индекс кумуляции фармакологически активного вещества (Икум.).

Индекс кумуляции – это отношение ЛД50 при однократном введении вещества к ЛД50 при кратном введении. Для этой цели используют методы, основанные на учете гибели животных при повторном введении фармакологического вещества.

Подострую токсичность по тесту Лима определяли для субстанции Эпотек. В опыте длительностью 24 дня учитывали гибель животных при ежедневном энтеральном введении вещества в начальной дозе, равной 1/10 ЛД50 (158мг/кг), нарастающей в каждые последующие 4 дня в полтора раза по сравнению с предыдущей.

При энтеральном (внутрижелудочном) введении ЛД50 субстанции составляла 1580 ± 31,7мг/кг, поэтому в первые четыре дня животным вводили исследуемую субстанцию в дозе 158 мг/кг. Полученные результаты представлены в табл. 13. Они позволяют определить как ЛД50 субстанции при кратном энтеральном введени по методу Миллера-Тейнтера, так и оценить индекс кумуляции.

Таблица 13

Результаты теста Лима (n = 10 в группе) для субстанции Эпотек.

Дни введения	1-4	5-8	9-12	13-16	17-20	21-24
Ежедневная доза г/кг	0,158	0,237	0,356	0,534	0,801	1,201
Суммарная доза по перио- дам введения*, г/кг	0,632	0,948	1,422	2,136	3,204	4,806
Кол-во погибших за каждые 4 дня введения	0	2	2	4	1	1

Примечание: * - под периодом введения подразумевается временной интервал с 1-го дня введения субстанции Эпотек по последний день введения соответствующей четырехдневки.

Таблица 14

Результаты определения средних смертельных доз эпотека

при кратном введении

Препарат	Путь введния	ЛД 16 мг/кг	ЛД50 мг/кг	ЛД84 мг/кг
Эпотек	П/о	1050,0	2000,0 ± 46,1	4000	Р<0,05

Икум = ЛД50(остр.)/ЛД50(кратн.), где