Профилактика и коррекция нарушений функционального состояния у высококвалифицированных спортсменов в условиях тренировочного процесса (стр. 11 )

По окончании нагрузки животное подвергалось эвтаназии с отбором крови из левого предсердия для определения основных биохимических, гематологических показателей и исследования внутренних органов.

По результатам учета продолжительности первого и повторного бега производился расчет суммарной продолжительности двойного бега и показатель восстановления работоспособности, определяемый как процентное отношение времени повторного бега к первичному. Животное препарировалось, органы триады Селье взвешивались, рассчитывались массовые коэффициенты тимуса, надпочечников, селезенки. На слизистой оболочке желудка оценивали наличие язв и геморрагий. В образцах крови определяли содержание основных метаболических показателей мышечного утомления, МСМ, стрессовых гормонов, продуктов перекисного окисления липидов и активность компонентов антиоксидантной защиты, показатели кислотно-основного состояния.

6.2. Фармакологические способы защиты от окислительного стресса на экспериментальной модели гипоксии физической нагрузки у лабораторных крыс.

По результатам предварительного тестирования было сформировано 10 групп белых крыс по 8 особей. Животные одной группы (интактные) подверглись эвтаназии без какого-либо предшествовавшего воздействия. На оставшихся моделировалась физическая нагрузка по вышеприведенной методике. Результаты представлены в таблице 24.

Таблица 24

Показатели антиоксидантного статуса крыс при моделировании гипоксии физнагрузки

Использованные дозировки в пересчете на человека	МСМ, г/л	ТБКРС, нмоль/мл	СОД, усл. ед./мл	ГП, ммоль/мин	КАТ, мкат/л
Интактные (нетренированные)	0,60±0,09	7,70±0,43	50,79±4,58	74,61±0,61	23,98±0,89
Тренированные без фармакологии	0,71±0,06	6,59±0,54	109,24±4,35	75,23±1,58	7,08±1,21
Витамин «Алфавит» 3 таб/сут	0,71±0,04	7,02±0,30	132,01±6,40	74,06±1,19	8,21±1,07
Стромбафорт(станозолол)10мг/сут	0,81±0,07	7,51±0,90	120,85±4,74	75,58±1,00	7,69±0,84
Тестостерон 100 мг/сут	0,78±0,03	5,71±0,39	­– ­	70,90±1,00	6,42±0,86
ТАД (глутатион натрий) 0,6 г/сут	0,51±0,08	7,89±0,65	100,71±6,00	73,34±0,38	9,82±1,80
Езафосфина (фруктоза-1,6-бисфосфат) 0,5 г/сут	0,29±0,02	7,64±0,57	120,33±5,92	72,43±0,28	12,66±2,50
Мексибел(мексидол) 0,8 г 5% /сут	0,83±0,06	8,16±0,94	108,82±3,55	75,11±0,60	5,28±1,43
Тиотриазолин 6 мл 2,5% /сут	0,41±0,05	7,54±0,99	114,23±3,95	73,27±0,80	7,95±1,99
Триметазидин 60 мг/сут	0,58±0,05	6,57±0,48	116,79±3,34	73,14±0,98	9,39±1,91

Тщательность отработки методики тренировки и итогового тестирования подтверждается достоверными изменениями показателей антиоксидантной системы защиты у животных в сравнении с интактными особями: активность СОД возрастала под влиянием тренировок в 2–2,5 раза (p<0,05), активность каталазы, наоборот, снижалась в 3–4 раза (p<0,05).

При назначении поливитаминного препарата отсутствовали достоверные отличия с группой особей, тренированных без фармакологии, которые бы подтверждали наличие защитных свойств. На фоне Езафосфина (фруктоза-1,6-бисфосфата) отмечено минимальное содержание МСМ и максимальная активность КАТ, при назначении ТАД (глутатион натрия) отмечена минимальная активность СОД. Это подтверждает эффективность данных препаратов. Содержание ТБКРС и активность ГП не имели значимых отличий в группах.

7. Создание комплексного способа профилактики негативного воздействия гипоксии нагрузки и защиты организма спортсмена от окислительного стресса.

7.1. Физические и фармакологические способы защиты от окислительного стресса на модели гипобарической гипоксии у лабораторных мышей.

С целью предупреждения негативного влияния окислительного стресса на организм применяются препараты из групп антиоксидантов и антигипоксантов. Из литературы известно об эффективных сочетаниях средств системной энзимной терапии (СЭТ) с препаратами иных фармакологических групп, на которые СЭТ оказывала потенцирующее воздействие. Также представляло интерес изучение как наличия у препаратов СЭТ самостоятельной антиоксидантной активности, так и целесообразности их комбинации с антиоксидантами и антигипоксантами.

Опыты выполняли на мышах-самцах массой 18-22 г. Животных предварительно тестировали в «открытом поле». При формировании выборок следили, чтобы в разные группы попадали активные и неактивные особи в одинаковом соотношении. Было сформировано 9 равновеликих групп по 12 животных в каждой.

Первая группа лабораторных мышей составила контрольную выборку.

На второй группе мышей ежедневно на протяжении 2 недель моделировались условия гипобарической гипоксии: мыши-самцы помещались по 6 особей в эксикатор объемом 5,8 л. Два эксикатора подключались параллельно к насосу, создававшему за 5 минут давление в каждом из них равное 0,6 атм. После декомпрессии животные находились в гипобарических условиях на протяжении 30 минут, после чего осуществлялась компрессия до нормальных атмосферных условий за 1 минуту.

На животных 3-ей – 7-ой групп также на протяжении 2 недель моделировались условия гипобарической гипоксии. Помимо этого им вводился назначенный препарат ежедневно за 30 минут до сеанса гипобарической гипоксии: животные 3-ей группы получали средство системной энзимной терапии Вобэнзим; 4-ой – антигипоксант Мексидол; 5-ой группы – поливитаминный препарат «Алфавит»; 6-ой группы – сочетание Мексидола и поливитаминного препарата «Алфавит»; 7-ой группы – сочетание Мексидола, поливитаминного препарата «Алфавит» и средства СЭТ Вобэнзим (таблица 25).

На мышах 8-ой группы на протяжении 2 недель моделировались условия гипобарической гипоксии, сразу после декомпрессии животные помещались в условия газовой смеси, состоящей на 98% из чистого кислорода и 2% азота. Газовая смесь указанного состава подавалась в эксикатор с животными в течение 10 минут под постоянным давлением 1,2 атмосферы, вывод излишков газа из камеры с животными осуществлялся через дополнительное отверстие в другой части эксикатора для обеспечения постоянного равномерного потока обогащенной кислородом газовой смеси в эксикаторе.

На животных 9-ой группы на протяжении 2 недель оценивалась эффективность разрабатываемого сочетанного способа воздействия – кислородотерапии и фармакотерапии. Им ежедневно вводили Мексидол, поливитаминный препарат «Алфавит» и средство системной энзимной терапии Вобэнзим за 30 минут до сеанса гипобарической гипоксии. Сразу после сеансов гипобарической гипоксии животные помещались на 10 минут в условия газовой смеси, состоящей на 98% из чистого кислорода и 2% азота.

Таблица 25

Суточные дозировки исследуемых средств и способы из назначения

Препарат	Человек (m=70 кг)	Мышь (m=20 г)
Мексидол	0,8 г 5% раствора	внутримышечно	0,03 г 5% раствора	внутрибрюшинно
Алфавит	по 1 таб. 3 цветов	перорально	по 0,03 таб. 3 цветов	через желудочный зонд
Вобэнзим	12 таблеток	0,4 таблетки

По окончании 2-недельного периода животные подвергались вскрытию под кетаминовым наркозом. Во 2-ой – 7-ой экспериментальной группах оно осуществлялось сразу после декомпрессии. В 8-ой и 9-ой группах – по окончании кислородотерапии. Кровь для последующего исследования отбиралась в количестве 3 мл из сосудов глазной ямки животного (таблица 26).

Содержание ТБКРС во всех экспериментальных группах было ниже, чем во 2-ой группе. Это свидетельствует об эффективности защиты. Лишь в экспериментальной группе № 3 оно не отличалось достоверно от группы № 2, животные которой не получали фармакологические препараты. Это свидетельствует об отсутствии антиоксидантных и антигипоксантных свойств у средства СЭТ Вобэнзим. Отмечено, что в исследуемых группах высокому содержанию ТБКРС соответствует низкая активность ГП.

Таблица 26

Показатели антиоксидантного статуса животных в конце исследования

№	Группа животных	ТБКРС, нмоль/мл	СОД, усл. ед./мл	ГП, ммоль/мин	КАТ, мкат/л
1	Контрольная	6,00±0,73	106,16±6,22	72,69±1,06	45,82±4,54
2	Гипобарическая гипоксия	9,52±1,33	113,20±3,84	67,76±2,73	19,25±6,28
3	Гипобарическая гипоксия, Вобэнзим	9,49±1,19	112,01±4,27	65,89±2,91	18,99±5,77
4	Гипобарическая гипоксия, Мексидол	6,78±0,51	106,31±3,31	73,59±1,09	54,35±15,31
5	Гипобарическая гипоксия, Алфавит	8,03±1,09	100,53±5,54	71,70±2,01	48,79±10,24
6	Гипобарическая гипоксия, Мексидол, Алфавит	6,50±0,90	108,12±4,03	73,08±1,54	46,48±12,39
7	Гипобарическая гипоксия, Мексидол, Алфавит, Вобэнзим	5,78±0,88	109,22±6,35	73,93±1,74	32,28±11,59
Группы с кислородотерапией
8	Гипобарическая гипоксия, кислородотерапия	9,39±1,11	111,92±4,87	69,76±1,84	20,05±2,09
9	Сеансы гипобарической гипоксии, разработанный способ защиты (кислородотерапия и фармакотерапия)	4,91±1,68	110,40±8,97	75,86±2,18	28,95±8,75

По результатам монотерапии (группы 3–5) протективные свойства наиболее выражены при назначении Мексидола (минимальные значения ТБКРС, максимальные – ГП). Сочетанная терапия Мексидолом и поливитамином «Алфавит» (группа №6) не имела достоверных преимуществ перед монотерапией Мексидолом (группа № 4).