Лабораторный журнал практические занятия по микробиологии (стр. 2 )

Определение	Пример
Царство ЭУКАРИОТА
Грибы -
Царство ПРОКАРИОТА
Бактерии -
Актиномицеты -
Царство ВИРА
Вирусы -
Вирусы бактерий (бактериофаги)-

ОСНОВНЫЕ МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ ГРУППЫ БАКТЕРИЙ

Кокки	Палочки	Извитые	Нитчатые
микрококки	бактерии	вибрионы	актиномицеты
диплококки	бациллы	спирохеты
стрептококки	клостридии	спириллы
тетракокки
сарцины
стафило- кокки

ОТЛИЧИЯ БАКТЕРИЙ, БАЦИЛЛ И КЛОСТРИДИЙ

Признак	Бактерии	Бациллы	Клостридии
Наличие споры
Расположение споры
Тип дыхания
Окраска по Граму

Морфология бактерий - размер, форма и взаимное расположение бактери-альных клеток.

Размер микробной клетки зависит от _______________________________

Форму микробной клетки определяет _______________________________

Взаимное расположение микробных клеток зависит от ____________________

__________________________________________________________________

Этапы приготовления фиксированного мазка

1. Обезжиривание стекла

2. Приготовление мазка

3. Высушивание мазка

4. Фиксация мазка с целью: а)________________________________________

б)________________________________________

5. Окраска простым или сложным способом

Тинкториальные свойства - __________________________________________ __________________________________________________________________

Простые методы окраски - ___________________________________________

__________________________________________________________________

Сложные методы окраски - ___________________________________________

___________________________________________________________________

ОБЩАЯ СХЕМА СЛОЖНЫХ (ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНЫХ) МЕТОДОВ ОКРАСКИ:

основной краситель

дифференциальное вещество

дополнительный краситель

ОКРАСКА ПО ГРАМУ

Этап	Вещество	Время обработки
Основной краситель	Генцианвиолет (кристаллвиолет)	1 мин
Фиксатор	Р-р Люголя	1 мин
Дифференцирующее вещество	Спирт этиловый 96	5-10 сек
Промывка	Вода	5-10 сек
Дополнительный краситель	Водный фуксин	1 мин
Промывка	Вода	5-10 сек

Принцип метода:

Генцианфиолет связывается с пептидогликаном клеточной стенки. Толстый слой пептидогликана грамполодительных бактерий связывает много красителя, тонкий слой - грамотрицательных - мало. Раствор Люголя фиксирует краситель за счет образования комплекса краситель-пептидогликан-йод. При обработке мазка спиртом грамотрицательные микроорганизмы быстро теряют краситель и обесцвечиваются, а грамположительные - остаются окрашенными в синий цвет. Дополнительный краситель окрашивает граотрицательные микроорганизмы в красный цвет.

Рис. 3. Строение клеточной стенки грамположительных (А) и грамотрицательных (Б) бактерий(схема). У грамположительных бактерий (А) основной слой - пептидогликан - многослойный и пронизан тейхоевыми кислотами (толстая клеточная стенка); у грамотрицательных бактерий (Б) тонкий пептидогликан и над ним расположена внешняя мембрана, содержащая липиды (тонкая клеточная стенка). 

	Бактерии
	грамположительные	грамотрицательные
Строение клеточной стенки 1.Пептидогликан (муреин)
2. Тейхоевые кислоты
3. Липополисахаридный слой
Окраска по Граму	Сме	сь

ЗАНЯТИЕ N 4

Тема: ОСОБЕННОСТИ МОРФОЛОГИИ ГРИБОВ, ВИРУСОВ

Цель занятия: Научиться готовить препараты типа “раздавленная капля” для изучения особенностей морфологии грибов.

Основные вопросы, разбираемые на занятии:

1. Особенности морфологии грибов.

2. Размножение и классификация грибов.

ОСОБЕННОСТИ МОРФОЛОГИИ ГРИБОВ

Грибы - это низшие бесхлорофильные растения. В отличие от бактерий и актиномицетов они являются эукариотами, т. е. имеют истинное ядро с ядерной оболочкой, хитинсодержащую клеточную стенку и все присущие эукариотам органоиды.

Описано около 100000 видов грибов, подавляющее большинство которых является сапрофитами, около 450 - условно-патогенными и 50 - патогенными видами.

КЛАССИФИКАЦИЯ ГРИБОВ

Классификации грибов основаны на морфологии и особенностях полового размножения. По морфологии в бесполой несовершенной форме грибы можно разделить на 3 основные группы:

1. Дрожжи (Saccharomyces cerrevisiae) ___________________________________________________

_______________________________________________________________

2. Мицелиальные грибы (дерматофиты, плесневые грибы) - ____________

____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

3. Диморфные грибы (Кандида альбиканс) - _________________________

______________________________________________________________________________________________________________________________

Морфологические признаки плесневых грибов

	Мицелий	Споры
Р О Д	Вегетатив-ный	Репродуктивный	Тип	Располо-жение
Mucor	Несепти-рованный	Несептирован-ный споран-гиеносец	Эндоспоры	В спорангии
Aspergillus	Септиро-ванный	Несепти-рованный конидиеносец	Экзоспоры (конидии)	В виде лейки
Penicillium	Септиро-ванный	Септированный конидиеносец	Экзоспоры (конидии)	В виде кисточек

ПРИГОТОВЛЕНИЕ ПРЕПАРАТОВ ДЛЯ ИЗУЧЕНИЯ МИКРООРГАНИЗМОВ В НАТИВНОМ ВИДЕ

МЕТОД “ВИСЯЧЕЙ” КАПЛИ

На покровное стекло наносят каплю бактериальной культуры. К нему прижимают предметное стекло с лункой, края которой смазывают вазелином, так, чтобы капля находилась в центре лунки. Быстро переворачивают препарат, при этом капля должна свободно висеть над лункой, не касаясь ее дна. Микроскопируют с использованием объектива 40х.

МЕТОД “РАЗДАВЛЕННОЙ” КАПЛИ

На поверхность обезжиренного предметного стекла наносят небольшую каплю исследуемого материала или взвеси бактерий и покрывают ее покровным стеклом. Микроскопируют с использованием объектива 40х.

I. Мицелиальные грибы рода ____________ Нативный препарат "раздавленная капля". Увеличение ____