Предисловие (стр. 3 )

Рис. 1. Схема строения молекулы иммуноглобулина Ig (http://www. inim. ru/imm91.html)

По строению тяжелых цепей все иммуноглобулины делят на 5 классов. Они отличаются по физико-химическим и биологическим свойствам.

Иммуноглобулин класса М – пентамер, имеет 5 субъединиц, соединенных особой цепью, обладают высокой молекулярной массой. Вырабатываются при первом поступлении антигена в организм. Не могут проходить через плаценту. Участвуют в активации комплемента. Сохраняются недолго, период полувыведения – не более 5 дней. От всего количества иммуноглобулинов составляют 5 -10 %.

Иммуноглобулин класса G – мономер, имеет 2 активных центра, вырабатываются при повторном попадании антигена, проходят через плаценту. Также активируют систему комплемента. Период полувыведения составляет 24 дня. От всего количества иммуноглобулинов составляют 70 – 80 %.

Иммуноглобулины класса А - могут находиться в сыворотке крови - мономер, 2 активных центра и в секретах слизистых – секреторный ИГ А, который может быть в виде димера и тримера. Секреторные антитела обеспечивают местный иммунитет тканей, защиту слизистых от инфекционных агентов.

Иммуноглобулины класса Е – вырабатываются в незначительных количествах, обладают способностью прикрепляться к некоторым клеткам, участвуют в аллергических реакциях.

Контрольные вопросы для самостоятельной

внеаудиторной работы студентов

1.  Укажите основные свойства антигенов.

2.  Назовите антигены бактерий.

3.  Какие антигены у бактерий называют видовыми? типовыми? групповыми? протективными?

4.  Опишите строение молекулы иммуноглобулина.

5.  Назовите и охарактеризуйте классы иммуноглобулинов.

Тестовые задания по пройденному материалу

1.  Генетически чужеродное вещество, способное вступать в реакции с антителами, называется ###

2.  Антигены, не способные индуцировать образование антител, но способные взаимодействовать с готовыми антителами, называются ###

3.  Эпитоп антигена - это:

А. показатель антигенности данного вещества

Б. участок молекулы антигена, определяющий специфичность

В. показатель полноценности данного вещества

4.  Основные свойства антигенов:

А. Патогенность.

Б. Чужеродность.

В. Вирулентность.

Г. Специфичность.

5.  Антигенами могут быть:

А. Аминокислоты.

Б. Нуклеиновые кислоты.

В. Липополисахариды.

Г. Белки

6.  Протективными свойствами обладают следующие антигены бактерий:

А. Соматический О-антиген.

Б. Жгутиковый Н-антиген.

В. Капсульный К-антиген.

Г. Экзотоксин

7.  В создании местного иммунитета при кишечных инфекциях, респираторных инфекциях ведущую роль играют (впишите слово) ### IgA

8.  Иммуноглобулины класса А:

А. Участвуют в развитии аллергических реакций.

Б. Обеспечивают местный иммунитет.

В. Активируют комплемент классическим путем.

Г. Находятся в секретах слизистых.

9.  Активные центры антител:

А. Образованы гипервариабельными участками тяжелых и легких цепей.

Б. Находятся в шарнирном участке молекулы иммуноглобулина.

В. Не способны взаимодействовать с эпитопами антигенов.

Г. По размерам и конфигурации повторяют рельефность детерминант антигенов.

10.  Паратоп - иначе называется ###связывающим центром

11.  Антигенсвязывающий центр иммуноглобулина находится в ### домен

12.  Уровни специфичности микробных антигенов:

А. Видовые.

Б. Типовые.

В. Тканевые.

Г. Групповые.

13.  Иммуноглобулины класса М:

А. Проходят через плаценту.

Б. Вырабатываются при первичном иммунном ответе.

В. Активируют комплемент классическим путем.

Г. Составляют 70%-80% всех иммуноглобулинов

14.  Антитела, у которых функционирует только один из двух Fab-фрагментов, называют (словосочетание) ### ###

15.  Иммуноглобулины класса М по своей структуре являются ###

16.  При вторичном иммунном ответе образуются специфические иммуноглобулины класса ###

РАЗДЕЛ II.

ИММУНОЛОГИЧЕСКИЕ

(СЕРОЛОГИЧЕСКИЕ) РЕАКЦИИ:

СВОЙСТВА И ПРИМЕНЕНИЕ В ПРАКТИКЕ.

Вопросы для обсуждения.

1.  Основные свойства иммунологических реакций.

2.  Понятие о сероидентификации и серодиагностике.

3.  Реакция агглютинации – разновидности, применение.

4.  Реакция непрямой гемагглютинации.

5.  Реакция преципитации и ее варианты.

6.  Реакция лизиса и реакция связывания комплемента (РСК).

7.  Реакции с участием меченых антител или антигенов.

Иммунологические (серологические) реакции – это реакции между антигенами (АГ) и антителами (АТ), происходящие ин витро. Происхождение названия – от латинского «serum» - сыворотка, потому что одним из обязательных компонентов в этих реакциях является сыворотка - крови больного или диагностическая, полученная от животных.

Основные свойства серологических реакций:

·  Специфичность - способность АГ реагировать только с соответствующими АТ.

·  Двухфазность – все серологические реакции идут в 2 фазы: специфическая – взаимодействие антигенных детерминант с активными центрами антител и неспецифическая - в присутствии электролита (0,9% раствор хлористого натрия) образуются агрегаты, которые выпадают в осадок и обеспечивают проявление реакции.

·  Чувствительность - характеризуется минимальным количеством АГ или АТ, которое может быть обнаружено с помощью данной реакции.

·  Обратимость – в ряде случаев (избыток АГ, действие температуры, рН среды) может произойти диссоциация с восстановлением свойств антигена и антител.

В лабораторной практике серологические реакции применяются:

·  для серодиагностики – выявления антител в исследуемой сыворотке крови с помощью известного антигена;

·  для сероидентификации – определения вида антигена (бактерии, вируса или их сероваров) с помощью известных диагностических сывороток.

Реакция агглютинации (РА) и ее разновидности

Агглютинация – это склеивание микробов или других клеток при действии на них специфических антител в присутствии электролита. В результате происходит образование осадка. Для реакции необходимы следующие компоненты:

·  Антиген (АГ) – взвесь убитых или живых микробов

·  Антитела (АТ) - находятся в сыворотке крови больного человека или предварительно иммунизированного животного

·  0,9 % раствор хлорида натрия

Как и все серологические реакции, РА может применяться с целью сероидентификации или серодиагностики.

Сероидентификация позволяет определить вид микроба с помощью известных АТ, находящихся в диагностической сыворотке. В качестве неизвестного АГ в этом случае будет выступать микроб, выделенный в чистой культуре. Иммунные диагностические сыворотки готовят в производственных условиях из крови животных (кроликов, ослов, баранов), которым предварительно многократно был введен соответствующий АГ.

Например, агглютинирующая шигеллезная сыворотка сыворотка содержит АТ к шигеллам.

Серодиагностика – это способ постановки диагноза по обнаруженным в сыворотке крови больного антителам. Для получения сыворотки берут кровь из вены, собирают в пробирку, оставляют на час при комнатной температуре, сгусток отделяют от стенок пробирки стеклянной палочкой, при необходимости центрифугируют и оставляют в холодильнике. В качестве известного АГ используют диагностикумы – взвесь убитых микробов.

Например, туляремийный диагностикум содержит взвесь убитых туляремийных палочек.

РА может быть поставлена на предметных стеклах (ориентировочная) и в пробирках (развернутая).

РА на стекле. На предметное стекло наносят 2 капли сыворотки и каплю изотонического раствора хлорида натрия В одну из капель сыворотки и в каплю раствора хлорида натрия вносят исследуемую культуру В одну из капель сыворотки микроб не вносят (контроль сыворотки), эта капля должна оставаться прозрачной. В капле раствора хлорида натрия (контроль АГ) должно быть помутнение.

Если реакция положительная, то в капле сыворотки, смешанной с культурой, появятся хлопья агглютината (Рис.2).

Рис.2. Реакция агглютинации на стекле (ориентировочная).

(http://www. collegemicrob. narod. ru/immunology/osnimundiag. html)

Развернутая РА. В качестве примера можно привести развернутую РА с целью серодиагностики брюшного тифа –р. Видаля.

	1:100*	1:200*	1:400*	1:800*	контроль диаг-ма	контроль сыворотки
изотонич. р-р	-	0,5	0,5	0,5	0,5	-
сыворотка крови больного	0,5	0,5	0,5	0,5	-	0,5
диагностикум	3 капли	3 капли	3 капли	3 капли	3 капли	-

Таблица 1.

Серодиагностика брюшного тифа – реакция Видаля

·  - разведения сыворотки больного

Учет результатов проводят через 18 – 20 часов. Сначала оценивают контроли. В контроле сыворотки должна быть прозрачная жидкость, в контроле диагностикума - равномерная муть. Интенсивность реакции оценивают полуколичественно, плюсами. (Рис. 3.)

Рис.3.Реакция Видаля – серодиагностика брюшного тифа.

(http://nsau. edu. ru/images/vetfac/images/ebooks/microbiology/stu/immun/pict/ra3.gif)

++++ - жидкость прозрачная, на дне осадок, при встряхивании – крупные хлопья.

Чем меньше микробов склеились, тем мутнее жидкость и меньше осадок (+++, ++, +). Реакция считается положительной, если она идет не менее, чем на 2 плюса.