Практические задания по медицинской микробиологии, вирусологии (стр. 2 )

________________________________________________________________

Дезинфекция - ___________________________________________________

________________________________________________________________

Асептика - ______________________________________________________

________________________________________________________________ Антисептика - ___________________________________________________

________________________________________________________________

Подпись преподавателя ________________

Дата__________________

Занятие  №4

Тема: Дыхание, размножение и рост бактерий. Выделение чистой культуры аэробных бактерий (1-й день исследования).

Вопросы для обсуждения:

Дыхание бактерий, сущность процесса. Типы дыхания бактерий. Ферменты и структуры клетки, принимающие участие в процессе дыхания. Рост и способы размножения бактерий. Механизм деления бактериальной клетки. Фазы размножения культуры бактерий в стационарных условиях. Культивирование аэробных бактерий. Факторы, влияющие на рост и размножение  бактерий. Бактериологический метод исследования, его этапы.

Практические задания:

Заполнить таблицу:

Дыхательные ферменты	Наличие дыхательных ферментов у:
аэробов	факультативных анаэробов	облигатных анаэробов
Дегидрогиназы  НАД
Флавинзависимые дегидрогиназы  ФАД
Убихиноны  Co Q
Цитохромы: a, b, c (гемопротеины)

Изучить технику  посева исследуемого материала на плотные и в жидкие питательные среды. Приготовить мазок из исследуемого материала (смесь бактерий),  окрасить по Граму и микроскопировать. Посеять исследуемый материал в чашку Петри с мясо-пептонным агаром. Поставить посевы в термостат. Оформить протокол исследования культуры аэробных бактерий (1-ый день).

Протокол

бактериологического исследования аэробных бактерий

(1-й день исследования)

1. Приготовлен мазок из исследуемого материала (смесь бактерий).

  Рис. 1. Смесь бактерий

  (стрелкой указать грамположительные

  и грамотрицательные бактерии).

2. При окраске по Граму выявлены  ________________________________

3. Произведен  посев исследуемого материала на ______________________

4. Посевы помещены в термостат при  t ___ C  на  __________ часов.

Подпись преподавателя ________________ 

Дата__________________

Занятие  №5

Тема: Факторы влияющие на рост и размножение бактерий. Выделение чистой культуры аэробных бактерий (2 и 3-й дни исследования).

Вопросы для обсуждения:

Охарактеризивать вид, подвид, штамм, клон бактерий. Культуральные свойства бактерий и способы их изучения. Чистая и смешанная культура бактерий. Оценка чистоты культур аэробных бактерий на 2 этапе бактериологического исследования.

Практические  задания:

Ознакомиться с характером  роста бактерий разных видов на плотных и в жидких питательных средах. Изучить культуральные свойства бактерий, входящих в состав бактериальной смеси, посеянной на предыдущем занятии на чашки Петри с МПА (см. протокол, занятие № 4). Выделить  изолированные колонии двух типов (№1 и № 2), приготовить из них мазки, окрасить по Граму, микроскопировать. Пересеять колонии культур №1 и №2 на скошенный мясо-пептонный агар  (МПА). Исследовать характер роста культур №1 и №2 на скошенном МПА и определить чистоту культур. Пересеять чистые культуры №1 и №2 со скошенного МПА на дифференциально-диагностические среды. Оформить протокол исследования культур аэробных бактерий (2 и 3 дни).

Протокол

бактериологического исследования аэробных бактерий

2-й день исследования

Изучены культуральные свойства бактерий. Выявлены 2 типа колоний.

Таблица 1.

Характеристика колоний 

№	Свойства колоний	Колонии
№ 1	№ 2
1	Размер (мм)
2	Форма
3	Края
4	Прозрачность
5	Расположение по отношению к поверхности питательной среды
6	Поверхность
7	Пигмент
8	Структура

Таблица 2.

Характеристика морфологических и тинкториальных свойств бактерий, образующих колонии № 1 и № 2

Свойства бактерий из колоний №1 и №2	Колонии
№ 1	№ 2
Морфологические
Тинкториальные

  Рис.1. Препарат-мазок  из  Рис.2. Препарат-мазок  из

  колонии № 1, окраска по Граму  колонии № 2, окраска по Граму 

Пересев колоний  № 1 и № 2 на скошенный МПА.

Посевы помещены в термостат при t  __ С  на  _____ часов. 

3-й день исследования

Характеристика роста культур № 1 и № 2 на скошенном МПА и определение их чистоты:

Культура № 1 _____________________________________________________

____________________________________________________________________________________________________________________________________

Культура № 2 ______________________________________________________

__________________________________________________________________

__________________________________________________________________

Вывод: Выделены чистые культуры бактерий. Произведен посев выделенных чистых культур № 1 и №  2 в среды Гисса или «пестрого ряда» (глюкоза, лактоза, сахароза, мальтоза, маннит) и МПБ для выявления индола и сероводорода.

Посевы помещены в термостат при t  __ С  на  _____ часов.

Подпись преподавателя ________________

Дата__________________

Занятие  №6

Тема: Ферменты бактерий. Идентификация чистых культур бактерий. Анаэробные бактерии. Выделение чистой культуры и идентификация анаэробных бактерий. Особенности культивирования и идентификации грибов.

Вопросы для обсуждения:

Принципы идентификации аэробных  бактерий. Способы определения ферментативных свойств бактерий. Среды Гисса, их состав и использование. Методы определения продукции бактериями аммиака, индола и сероводорода. Какие свойства бактерий необходимо изучить для определения их видовой принадлежности? Методы создания анаэробных условий для культивирования облигатных анаэробов. Анаэростат, принцип его работы. Среда Китта-Тароцци, ее назначение. Среда Вильсон-Блера, ее применение. Методы выделения чистой культуры облигатных анаэробов. Какие свойства изучают у облигатных анаэробов для определения их видовой принадлежности? Особенности культивирования и идентификации грибов.

Практические задания:

Произвести учет ферментативных свойств культур  №1 и №2. Определить вид выделенных бактерий с помощью дифференциально-диагностических таблиц. Закончить оформление протокола бактериологического исследования аэробных бактерий. 

  Таблица 1.

Дифференциально-диагностические свойства некоторых видов бактерий  рода Bacillus

Вид	Ферментация	Образование	Подвижность	Оксидаза	Каталаза
Глюкозы	лактозы	сахарозы	мальтозы	маниита	индола	H2S	спор
B. cereus	К	К/-	К/-	К	-	-	+	+	+	+	+
btilis	К	К/-	К/-	К	К	-	-	+	+	+	+

  Таблица 2.

Характеристика некоторых свойств Escherichia сoli

Ферментация	Образование	Подвижность	Оксидаза	Каталаза	Образование спор
Глюкозы	лактозы	сахарозы	мальтозы	маниита	индола	H2S
КГ	КГ	-	КГ	КГ	+	-	+	-	+	-

Протокол

бактериологического исследования аэробных бактерий

(4-й  день исследования)

  Таблица 3.

Свойства культур № 1 и № 2

№ пп	Ферментация ( К, КГ или (-)	Образование (+ / -)	Подвижность (+/ -)	Наличие спор (+ / -)	Предположительный вид бактерий
глюкозы	лактозы	сахарозы	мальтозы	маниита	индола	H2S
№1
№2

Заключение: на основании изученных морфологических, тинкториальных, культуральных и биохимических свойств выделенных бактерий можно предположить, что культура №1 относится к виду ____________________, а культура № 2 представляет собой вид ____________________.