Практические задания по медицинской микробиологии, вирусологии (стр. 3 )

Для окончательной идентификации исследование нужно продолжить.

Изучить характер  роста анаэробных бактерий  (посев  почвы) в среде Китта-Тароцци.

1. Без прогрева. Рост 24 ч при  37оС ___________________

1. Прогрев при 800С, 25 мин. Рост 24 ч при  37оС ___________________

Приготовить мазки и окрасить их  по Граму, микроскопировать и зарисовать.

Рис. 1.  Препарат-мазок из среды Китта-Тароцци. Окраска по Граму

Произвести пересев смешанной культуры из среды Китта-Тароцци в  высокие столбики МПА с глюкозой (0,5 %) методом разведения для по-

  лучения изолированных колоний.

Дополнить схемы выделения чистой культуры анаэробных бактерий с использованием методов Цейслера и Вейнберга.

1

2

3

Рис. 2.  Схема выделения чистой культуры анаэробных бактерий с использованием метода Цейсслера

Рис. 3. Схема выделения чистой культуры анаэробных бактерий с использованием метода Вейнберга.

Изучить культуральные свойства анаэробных бактерий в сахарном МПА и среде Вильсона-Блера. Произвести учет ферментативных свойств клостридий в средах Гисса и

  внести данные в таблицу. 

Таблица 4.

Дифференциально-диагностические свойства некоторых видов клостридий

Наименование вида	Ферментация углеводов	Расположение спор	Отношениек О2
глюкоза	лактоза	мальтоза
1	Cl. botulinum
2	Cl. tetani
3	Cl. perfringens

Вывод: _____________________________________________________________________

_____________________________________________________________________________

Изучить культуральные свойства грибов рода Candida на среде Сабуро. Изучить культуральные свойства плесневых грибов.

Подпись преподавателя ________________

Дата__________________

Занятие  №7

Тема: Вирусы. Классификация. Морфология и строение вирионов. Взаимодействие вируса с клеткой.

Вопросы для обсуждения:

Классификация вирусов. Общая характеристика царства вирусов. Морфология вирионов. Структура простых и сложных вирионов. Капсиды вирионов, типы симметрии. Форма и размер вирионов. Строение внешней оболочки (суперкапсида). Вирусный геном, его структура. Неструктурные вирусные белки. Стадии взаимодействия вируса с клеткой: продуктивная и интегративная формы. Последствия интеграции вирусного генома в геном клетки. Особенности репликации ДНК - и РНК-содержащих вирусов. Вирусы с позитивной и негативной полярностью. Синтез вирусных белков. Мишени для действия противовирусных препаратов. Противовирусные химиотерапевтические препараты (общие понятия).

Практические задания:

Изучить  классификацию вирусов, морфологию и строение вирионов с помощью таблиц. Зарисовать структуру простого и сложного вириона.

Рис. 1. Схема строения простого  Рис. 2. Схема строения сложного

  вириона.  вириона.

Подписать типы симметрии капсидов:

Изучить стадии взаимодействия вируса с клеткой.

1._________________________ 2. ________________________ 3. ________________________ 4. ________________________ 5.________________________ 6.________________________

Заполнить таблицу:

Эклипс-фаза для следующих вирусов:
Тип вируса	+ РНК	ДНК	Ретровирус
Транскрипция вируса
Репликация вирусного генома

Пример заполнения таблицы:

Транскрипция вируса	“-” РНК	РНК зависимая РНК-полимераза ---------------->	“+” РНК	-------> R -------> рибосома	Синтез белка
Репликация вирусного генома	“-” РНК	Вирусная РНК-полимераза ---------------->	“+” РНК	Вирусная РНК-полимераза ---------------->	“-” РНК

Подпись преподавателя ________________ 

Дата__________________

Занятие  №8

Тема: Методы культивирования вирусов. Индикация вирусов в клеточных культурах и курином эмбрионе. Вирусы бактерий (фаги). Идентификация бактерий с помощью фагов.

Вопросы для обсуждения:

Вирусологический метод исследования, его этапы. Методы культивирования вирусов. Получение и приготовление первичных, перевиваемых и полуперевиваемых культур клеток. Что представляют собой однослойные, суспензионные и органные культуры клеток? Способы заражения куриного эмбриона. Индикация вирусов в клеточных культурах и курином эмбрионе. Культивирование вирусов в организме лабораторных животных (биологический метод исследования). Ультраструктура и морфологические типы вирусов бактерий. Взаимодействие вирулентного фага с бактериальной клеткой. Взаимодействие умеренного фага с бактериальной клеткой и результат этого процесса. Отличия лизогенных бактерий от нелизогенных. Фаговая конверсия. Практическое использование вирусов бактерий. Тесты на фагочувствительность и фаготипирование бактерий.

Практические задания:

Ознакомиться с методами приготовления клеточных культур и назначением  сред (199, Игла), солевых растворов (раствор Хенкса, раствор фосфатного буфера с антибиотиками), специальных реактивов (трипсин, версен). Изучить методы заражения и вскрытия куриного эмбриона. Подписать способы заражения, применяемые для накопления различных вирусов.

Микроскопировать клеточную культуру Hela, зараженную энтеровирусами, с целью обнаружения цитопатического действия вирусов. Выявить цитопатическое действие энтеровирусов по образованию бляшек в  культуре клеток под бентонитовым покрытием. Поставить реакцию гемагглютинации с аллантоисной жидкостью куриного эмбриона, зараженного вирусом гриппа, по схеме. Учесть результат реакции гемагглютинации (РГА) и определить гемагглютинационный титр вируса. Данные внести в таблицу. 

Таблица 1.

Схема постановки реакции гемагглютинации для определения титра вируса

Ингредиенты в мл	Лунки	Контроль эритроцитов
1-я	2-я	3-я	4-я	5-я	6-я
0,85% раствор NaCl	0,9	0,5	0,5	0,5	0,5	0,5
Аллантоисная жидкость	0,1	→	→	→	→
Полученные разведения	1 : 10	1 :2 0	1 : 40	1 : 80	1 : 160
1% взвесь куриных эритроцитов	0,5	0,5	0,5	0,5	0,5	0,5
Учет результатов

Условные обозначения:

(+) - полная агглютинация эритроцитов, имеет вид зонтика

(-)  - компактный осадок эритроцитов, как в контроле, имеет вид «пуговки»

Зарисовать видимые проявления РГА:

Лунки полистиролового планшета

  1:10  1:20  1:40  1:80  1:160  контроль

Разведения аллантоисной жидкости  эритроцитов 

Заключение: титр вируса гриппа 1:_______